天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院，天津市肺癌研究所，天津市肺癌轉(zhuǎn)移與腫瘤微環(huán)境實(shí)驗(yàn)室

盧雅杰 劉紅雨 陳 軍*

肺癌是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其中80％～85％的病例為非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在歐洲，每年肺癌新發(fā)病例超過(guò)20萬(wàn)，而死亡的人數(shù)占所有癌癥相關(guān)死亡的20％。在美國(guó)，每年約有15萬(wàn)患者死于肺癌[1-3]。在中國(guó)大陸，肺癌的發(fā)病率和病死率均呈顯著升高的趨勢(shì)。據(jù)2008年我國(guó)衛(wèi)生部的統(tǒng)計(jì)，肺癌相關(guān)死亡率居惡性腫瘤總死亡率的首位，為30.83/10萬(wàn)。在男女惡性腫瘤相關(guān)死亡中，肺癌均為最主要原因[4]。手術(shù)、放療和化療一直都是NSCLC的主要治療方法。統(tǒng)計(jì)顯示，相當(dāng)一部分患者在就診時(shí)已為ⅢB期或Ⅳ期，失去了手術(shù)治療的機(jī)會(huì)。盡管各種新型化療藥物不斷出現(xiàn)并為多學(xué)科綜合治療提供了新手段，以鉑類為主的聯(lián)合化療方案的術(shù)后輔助化療也已被證實(shí)可提高患者的生存期，但就晚期肺癌的治療而言，目前在傳統(tǒng)藥物化療方面已經(jīng)到了一個(gè)平臺(tái)期——以鉑類為基礎(chǔ)的化療方案，在晚期（ⅢB or Ⅳ）NSCLC患者中，緩解率（Response Rate）僅30％～40％，中位生存期僅為8～10個(gè)月。

隨著對(duì)腫瘤發(fā)病機(jī)制及其生物學(xué)行為研究的不斷深入，人們?cè)絹?lái)越多地把焦點(diǎn)聚向了以特異性高、不良反應(yīng)輕為特點(diǎn)的分子靶向治療。近幾年來(lái)，在肺癌的分子靶向治療領(lǐng)域，研究熱點(diǎn)集中在EGFR、K-ras和VEGF等靶點(diǎn)上，涌現(xiàn)出許多針對(duì)這些靶點(diǎn)的分子靶向藥物。在將胞外刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路中一些激酶起到了至關(guān)重要的作用，分子靶向藥物能夠特異性地抑制這些激酶的活化，從而阻斷了信號(hào)傳導(dǎo)通路。吉非替尼（Gefitinib）商品名為易瑞沙（IRESSA），是由阿斯利康公司開(kāi)發(fā)的第一個(gè)用于治療NSCLC的分子靶向藥物，是EGFR酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKI），其化學(xué)名為N-（3-氯-4-氟苯基）-7-甲氧基-6-（3-馬啉亞丙氧基）喹唑啉-4-胺，分子式為C22H24CIFN403，為低分子量苯胺喹唑啉的衍生物，口服有活性。臨床前研究顯示吉非替尼本品可抑制多種類型的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，特別是對(duì)NSCLC，其單藥療效肯定。

EGFR是由原癌基因erbB編碼的具有酪氨酸激酶活性的跨膜受體，屬于erbB受體家族。EGFR是一種跨膜糖蛋白，它包括3個(gè)部分：胞外配體結(jié)合區(qū)域，跨膜區(qū)域和胞內(nèi)部分，其中胞內(nèi)部分包含有一個(gè)酪氨酸激酶區(qū)域[5,6]。EGFR廣泛分布于除成熟骨骼肌細(xì)胞、體壁內(nèi)胚層和造血組織以外的所有組織細(xì)胞。當(dāng)表皮生長(zhǎng)因子（epidermal growth factor，EGF）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子Q（transforming growth factor-Q，TGF-Q）或amphiregulin等配體與EGFR結(jié)合之后能夠誘發(fā)EGFR單體之間的同二聚化或EGFR與其他erbB家族成員之間的異二聚化。EGFR二聚化使每個(gè)受體的酪氨酸激酶區(qū)域均發(fā)生磷酸化，通過(guò)磷酸化效應(yīng)酪氨酸激酶區(qū)域得以活化從而觸發(fā)多種信號(hào)傳導(dǎo)的瀑布效應(yīng)。在erbB受體信號(hào)傳導(dǎo)中重要的通路包括：（1）Ras/Raf/MAPK通路，該通路通常與細(xì)胞的增殖相關(guān)；（2）PI3K/Akt通路，該通路介導(dǎo)多種生物學(xué)過(guò)程，包括細(xì)胞生存。

吉非替尼作為一種分子靶向治療藥物，通過(guò)抑制EGFR酪氨酸激酶胞內(nèi)磷酸化阻斷下游信號(hào)Akt和MAPK的傳導(dǎo)通路，誘導(dǎo)細(xì)胞停止在G1期，阻止表達(dá)EGFR的腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。但是臨床實(shí)踐證明并非所有患者都能從中獲益，NSCLC各組織類型間存在分子靶向藥物療效上的差異。例如多項(xiàng)臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果均證實(shí)腺癌為EGFR-TKI的優(yōu)勢(shì)人群。吉非替尼的抗腫瘤活性與EGFR的突變有關(guān)。Lynch[7]及Paze[8]等人研究了EGFR突變與NSCLC患者對(duì)吉非替尼的敏感性的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)這些突變均發(fā)生在酪氨酸激酶區(qū)域的ATP結(jié)合位點(diǎn)附近，為發(fā)生在19號(hào)外顯子上的缺失突變或18和21外顯子上的替代突變，這兩種突變改變了下游信號(hào)傳導(dǎo)并啟動(dòng)了抗凋亡機(jī)制，從而產(chǎn)生了致癌作用。同時(shí)突變使EGFR酪氨酸激酶區(qū)域ATP結(jié)合位點(diǎn)周圍的重要?dú)埢l(fā)生重新配置，從而穩(wěn)定了這些殘基與酪氨酸激酶抑制劑之間的關(guān)系，增加了腫瘤細(xì)胞對(duì)于酪氨酸激酶抑制劑的敏感性。結(jié)果表明，EGFR突變?nèi)巳菏褂眉翘婺嶙鳛橐痪€方案可獲得更長(zhǎng)的無(wú)進(jìn)展生存期，臨床研究表明，腺癌、女性、非吸煙、亞裔的NSCLC患者獲益明顯。這無(wú)疑是肺癌治療史上的一個(gè)巨大的進(jìn)步。

K-Ras是EGFR通路的下游信號(hào)分子，在約15％～30％的NSCLC患者中存在有K-Ras突變，該突變是一種多發(fā)生在K-Ras2號(hào)外顯子第12或13密碼子的點(diǎn)突變，發(fā)生K-Ras突變的肺腺癌細(xì)胞對(duì)于吉非替尼原發(fā)耐藥并提示腫瘤預(yù)后不佳[13]。Uchida[14]等人認(rèn)為K-Ras突變誘發(fā)的腫瘤對(duì)于吉非替尼的耐藥性可能與該突變導(dǎo)致的Erk和（或）Akt活化有關(guān)。

近期在NSCLC中發(fā)現(xiàn)了EML4-ALK融合基因，與EGFR突變，K-ras突變往往不同時(shí)存在于一個(gè)患者體內(nèi)，具有鮮明的臨床特征，并且對(duì)EGFR-TKI治療不敏感，而對(duì)ALK抑制劑敏感，提示該靶點(diǎn)是肺腺癌特異性較高的分子標(biāo)記物，本文就EML4-ALK融合基因的結(jié)構(gòu)及研究現(xiàn)狀作一綜述。

1 EML4-ALK融合基因的基因結(jié)構(gòu)

ALK，即人類間變性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK），于1994年首先發(fā)現(xiàn)于間變性大細(xì)胞淋巴瘤AMS3細(xì)胞株中[15]，是由1 620個(gè)氨基酸組成的跨膜蛋白，屬于胰島素受體家族[16]。該蛋白由膜外部分、跨膜區(qū)域以及膜內(nèi)催化區(qū)域組成，下游信號(hào)通路為Ras-ERK、JAK3-STAT3，以及PI3-K/Akt等，這些通路與細(xì)胞增殖、存活、遷移密切相關(guān)[17-18]。EML4是人類棘皮動(dòng)物微管相關(guān)蛋白樣4（echinoderm microtubule-associated-proteinlike 4，EML4），屬于棘皮動(dòng)物微管相關(guān)蛋白樣蛋白家族，由N末端堿基區(qū)、疏水的棘皮動(dòng)物微管相關(guān)蛋白區(qū)（hydrophobic echinoderm microtubule-associated protein-like protein，HELP）以及WD重復(fù)區(qū)三部分構(gòu)成。近年來(lái)在肺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，ALK基因可通過(guò)與EML4基因形成融合基因,從而促進(jìn)肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)，其表達(dá)產(chǎn)物為一種嵌合酪氨酸激酶，并且在NSCLC的發(fā)生發(fā)展中起重要的作用。

2007年Soda首次在非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后標(biāo)本中檢測(cè)到EML4-ALK融合基因。該基因是在一名62歲男性吸煙肺腺癌患者手術(shù)標(biāo)本中擴(kuò)增出的，由3926個(gè)堿基組成的cDNA片段，編碼一個(gè)由1059個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)，該蛋白的氨基端（殘基1-496）是EML4基因編碼蛋白的一部分，而羧基端（殘基497-1059）則由ALK基因編碼蛋白的一部分構(gòu)成[3]，重排為EML4-ALK，導(dǎo)致異常酪氨酸激酶表達(dá)。該融合基因定位于2號(hào)染色體的短臂上（2p21和2p23），其5’端為EML4的片段，3’端為ALK的片段，由倒置后的EML4基因片段與殘余的ALK片段連接。該融合基因擁有EML4基因中的BASIC區(qū)域，疏水的棘皮動(dòng)物微管相關(guān)蛋白區(qū)（hydrophobic echinoderm microtubuleassociated protein-like protein，HELP）以及部分WD重復(fù)區(qū)（后兩部分在部分亞型中缺失）和ALK基因中的Kinase功能區(qū)[21]。此外，該文作者還在75名患者中發(fā)現(xiàn)了另外5名患者也具有EML4-ALK融合基因，這些病人EGFR 和KRAS基因均為野生型。

目前，已經(jīng)報(bào)道了14種EML4-ALK融合基因的亞型，均為不同的EML4外顯子與ALK基因外顯子20融合而成。

2 EML4-ALK基因與NSCLC

Soda等[21]在隨后的研究中，應(yīng)用RT-PCR的方法對(duì)于75例NSCLC患者的組織標(biāo)本進(jìn)行了EML4-ALK融合基因、EGFR18、19、20、21號(hào)號(hào)外顯子突變，以及K-ras突變的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)5例患者存在EML4-ALK 1型融合基因（3例腺癌，2例鱗癌），同時(shí)發(fā)現(xiàn)該基因陽(yáng)性的患者不存在EGFR以及KRAS突變。并且，在繼續(xù)檢測(cè)了261例包括非霍奇金淋巴瘤、結(jié)直腸癌、胃腸道腫瘤在內(nèi)的其他惡性腫瘤的EML4-ALK融合基因后，均未發(fā)現(xiàn)含有該基因。Fukuyoshi等[30]分別檢測(cè)了104例肺癌、555例胃腸道腫瘤、90例乳腺癌標(biāo)本，僅1例肺癌標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)了EML4-ALK的轉(zhuǎn)錄，在其余的腫瘤中均未發(fā)現(xiàn)該融合基因，研究者認(rèn)為這樣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果強(qiáng)烈提示這一靶點(diǎn)很有可能為NSCLC所特有。但是2009年Lin等[31]發(fā)表在 Mol Cancer Res上的研究中，209例乳腺癌患者5例檢出該融合基因，83例結(jié)直腸癌患者2例檢出，106例NSCLC中有12例檢出，提示該融合基因也可能與包括肺癌在內(nèi)的多種實(shí)體腫瘤相關(guān)，但仍以NSCLC中檢出率最高。

同年，Inamura等[25]使用RT-PCR的方法檢測(cè)221例包含了腺癌、鱗癌、大細(xì)胞癌以及小細(xì)胞癌在內(nèi)的肺癌患者EML4-ALK融合基因的mRNA情況，對(duì)于檢測(cè)陽(yáng)性的患者，進(jìn)一步使用免疫組化的方法觀察融合基因的表達(dá)。結(jié)果只在腺癌這一組織類型中檢測(cè)到5例患者（3.4％）有融合基因的并均在細(xì)胞質(zhì)中用免疫組化檢測(cè)到ALK融合蛋白。

上述2項(xiàng)研究均來(lái)自日本，隨后在1項(xiàng)來(lái)自歐美的多中心參與的研究中，Perner等[26]使用FISH方法檢測(cè)600例NSCLC患者EML4-ALK基因情況，發(fā)現(xiàn)融合基因的發(fā)生率小于Soda報(bào)道的6.7％以及Kentaro 報(bào)道的3.4％，只有2.7％。并且在檢測(cè)出融合基因的腫瘤中，并不是所有的腫瘤細(xì)胞均含有該融合基因。

由于早先研究淋巴瘤ALK融合基因類型的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)除了人們熟知的NPM-ALK之外還有10多種其他的融合基因，與淋巴瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。在NSCLC中，是否也存在除了EML4-ALK融合基因以外的其他類型的ALK融合基因，也有學(xué)者就此展開(kāi)研究。Rikova等[27]的實(shí)驗(yàn)中，研究了41種NSCLC細(xì)胞株以及150例NSCLC腫瘤標(biāo)本中磷酸化的酪氨酸相關(guān)的多個(gè)靶點(diǎn)，ALK相關(guān)融合基因除了3例為EML4-ALK外，還有1例為T(mén)FG-ALK融合基因。但在2008年Shinmura等[28]的研究中，使用RT-PCR以及測(cè)序檢測(cè)的77例NSCLC患者，除了2例腺癌患者檢測(cè)到EML4-ALK（2.6％，1型和2型各1例）外，并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)含有NPM、TPM3、CLTC、ATIC和TFG-ALK。

3 EML4-ALK融合基因陽(yáng)性NSCLC的臨床病理特征

2007年Soda首次在非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后標(biāo)本中檢測(cè)到EML4-ALK重排融合。此后，美國(guó)、日本、韓國(guó)及中國(guó)香港均有報(bào)道，但在未經(jīng)選擇的NSCLC中，EML4-ALK陽(yáng)性檢出率較低，約1.5～6.7％。為了提高該融合基因的檢出率，Shaw等設(shè)定研究入組的患者必須具備兩種或更多的下列特征：女性、亞裔、無(wú)或僅少量吸煙史、腺癌。結(jié)果顯示141例患者中19例（13％）為EML4-ALK陽(yáng)性，如果不吸煙或僅少量吸煙者/和不伴有EGFR突變者，EML4-ALK陽(yáng)性率分別高達(dá)22％和33％。

美國(guó)麻省總醫(yī)院Shaw于2009年在臨床腫瘤雜志《J Clin Oncol》上發(fā)表論文，對(duì)EML4-ALK融合基因陽(yáng)性肺癌患者的臨床及病理學(xué)特征進(jìn)行了描述，探討了其對(duì)于化療及EGFR-TKI藥物療效的影響。EML4-ALK陽(yáng)性者中，年輕患者、男性患者比例較高，不吸煙或輕度吸煙患者較多，絕大多數(shù)組織學(xué)檢查結(jié)果為腺癌，且大部分為印戒細(xì)胞亞型。且與EGFR突變和KRAS突變多不會(huì)同時(shí)出現(xiàn)：即具有EML4-ALK融合基因的患者多為EGFR和KRAS野生型；而EGFR和（或）KRAS突變的患者多不具有EML4-ALK融合基因。與療效的相關(guān)性分析顯示，EML4-ALK陽(yáng)性與EGFR-TKI耐藥明顯相關(guān)，EGFR-TKI治療在10例EML4-ALK陽(yáng)性患者中均顯示無(wú)效。然而，EML4-ALK陽(yáng)性患者和陰性患者的緩解率相似，且至疾病進(jìn)展時(shí)間也相當(dāng)。

4 EML4-ALK融合基因的生物學(xué)功能

研究者研究了EML4-ALK融合基因的各個(gè)功能區(qū)，其中的兩個(gè)區(qū)在各個(gè)亞型中均包含，即：EML4基因片段中的basic區(qū)及ALK基因的kinase區(qū)。EML4具有使該融合基因產(chǎn)物蛋白二聚化的功能，而ALK基因的膜內(nèi)催化區(qū)域能在形成二聚體時(shí)激活，其異常激活導(dǎo)致細(xì)胞的癌變。Soda[21]等通過(guò)構(gòu)建缺失EML4 Basic區(qū)、HELP區(qū)、WD區(qū)的質(zhì)粒的3T3細(xì)胞，接種裸鼠后發(fā)現(xiàn)，缺失EML4 Basic區(qū)的完全不能成瘤，而缺失HELP區(qū)和WD區(qū)的均能成瘤，但瘤體較小，提示各功能區(qū)在肺癌的轉(zhuǎn)化過(guò)程中均發(fā)揮作用，但Basic 區(qū)的作用可能最為重要。而kinase區(qū)為ALK基因的膜內(nèi)催化區(qū)域，其激活后通過(guò)相關(guān)信號(hào)通路調(diào)控細(xì)胞增殖、存活和遷移。

Soda 等將攜帶EML4-ALK 基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染小鼠胚胎成纖維細(xì)胞3T3，而使后者獲得了致瘤性，接種于裸鼠皮下后成瘤。而在攜帶EML4-ALK的所有轉(zhuǎn)基因小鼠的肺組織中，自發(fā)性形成數(shù)百個(gè)腺癌病灶；這種轉(zhuǎn)基因的小鼠在口服ALK激酶的抑制劑后，腫瘤均趨于消失；而在靜脈注射轉(zhuǎn)染EML4-ALK的3T3細(xì)胞后，小鼠均由于呼吸衰竭而死亡，而使用ALK激酶抑制劑后，能明顯延長(zhǎng)這些小鼠的生存時(shí)間。Lin E等[31]為進(jìn)一步研究其功能，在轉(zhuǎn)染沉默5’EML4和3’ALK的siRNA后，在部分細(xì)胞中出現(xiàn)生長(zhǎng)抑制，而將沉默EML4-ALK基因的siRNA轉(zhuǎn)染至A549和H838細(xì)胞系，這兩種細(xì)胞系均為EML4-ALK野生型，結(jié)果這些細(xì)胞系均無(wú)生長(zhǎng)抑制，說(shuō)明EML4-ALK基因在陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞發(fā)生，生長(zhǎng)過(guò)程中起到非常重要的作用。

目前研究發(fā)現(xiàn)EML4-ALK融合基因與STAT3，AKT/PI3K及RAS/ERK等信號(hào)通路有關(guān)系。轉(zhuǎn)錄因子C/EBPβ（CCAAT/enhancer binding protein beta）具有提高細(xì)胞增殖和生存能力。ALK基因通過(guò)STAT3信號(hào)通路，提高C/EBPβ的mRNA及蛋白水平；還通過(guò)ERK1/2磷酸化C/EBPβ的第235位蘇氨酸，激活C/EBPβ蛋白[37]。研究發(fā)現(xiàn)ALK也可以通過(guò)SHH/GLI1信號(hào)通路發(fā)揮作用，且可激活A(yù)KT/PI3K信號(hào)通路穩(wěn)定GLI1蛋白[38]。此外，Ken Takezawa等報(bào)道，EML4-ALK與ERK-BIM 和STAT3-Survivin 信號(hào)通路有關(guān)， 而ALK抑制劑引起的細(xì)胞凋亡可能是通過(guò)抑制了BRK信號(hào)通路導(dǎo)致的BIM上調(diào)以及STAT3信號(hào)通路抑制后下調(diào)了survivin 引起的。

5 ALK抑制劑的臨床應(yīng)用前景

目前，針對(duì)ALK基因的小分子抑制劑Crizotinib（PF02341006）正處于多項(xiàng)臨床試驗(yàn)研究階段，Kwak于2009年ASCO年會(huì)上報(bào)告ALK抑制劑Crizotinib （PF-02341066）治療19例EML4-ALK陽(yáng)性的NSCLC患者，取得令人鼓舞的53％的有效率，之后，在第46屆ASCO年會(huì)上，輝瑞公司的crizotinibⅠ/Ⅱ期臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)布。這項(xiàng)研究由來(lái)自韓國(guó)首爾國(guó)立大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Yung-Jue Bang博士主持，該研究采用熒光原位雜交技術(shù)（FISH）檢測(cè)患者是否攜帶ALK融合基因，共入組了82例攜帶ALK融合的NSCLC患者，既往接受治療的中位次數(shù)為3次。所有患者均口服Crizotinib 250mg。結(jié)果顯示，客觀緩解率為57％，緩解持續(xù)時(shí)間1～15個(gè)月。＞90％的患者腫瘤縮小大于30％。8周疾病控制率（DCR）為87％，約72％的患者6個(gè)月無(wú)疾病進(jìn)展。其結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證了Kwak等的報(bào)道。研究者認(rèn)為，對(duì)于攜帶EML4-ALK融合基因的NSCLC患者，Crizotinib治療的緩解率高，且安全性良好。目前， Crizotinib Ⅲ期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中。

Yongjun Li等[39]近期通過(guò)兩種分子抑制劑進(jìn)一步研究非小細(xì)胞肺癌EML4-ALK融合蛋白的功能，分子抑制劑選取ALK SMI TAE684及 PF2341066（是臨床正在發(fā)展的一種c-met及ALK雙重抑制劑）[40]，研究其對(duì)表達(dá)EML4-ALK三型的細(xì)胞株H2228細(xì)胞株包括EML4 1-6外顯子及其體外移植瘤的抑制作用[41-44]。另外，還比較了TAE684與PF2341066的療效。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，EML4-ALK融合基因有與NPM-ALK相似的信號(hào)通路，包括Akt、ERK、STAT3，這些信號(hào)通路都可以被TAE684抑制。TAE684降低H2228細(xì)胞株活性，這種抑制呈劑量依賴性，IC50為15nm，通過(guò)CASPASE3、7活性升高及annexin V染色證實(shí)誘發(fā)凋亡。抑制劑處理24小時(shí)后，96％細(xì)胞停止在G1期，對(duì)照組為56％。上述結(jié)果表明，TAE684通過(guò)促進(jìn)凋亡和抑制細(xì)胞增殖來(lái)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，而抑制細(xì)胞增殖為主要原因。 另外，TAE684還抑制ALK蛋白激活以及下游信號(hào)的傳導(dǎo)，結(jié)果表明，在H2228中EML4-ALK激活ERKPI3K STAT信號(hào)通路，與NPM-ALK在ALCL細(xì)胞株中的作用相似。

在體外構(gòu)建移植瘤的實(shí)驗(yàn)中，已有研究證實(shí)，TAE684誘導(dǎo)表達(dá)NPM-ALK融合基因的淋巴瘤生長(zhǎng)抑制，如果EML4-ALK是非小細(xì)胞肺癌癌基因驅(qū)動(dòng)因子，那么該抑制劑也應(yīng)該對(duì)這些腫瘤有相似的作用。為了驗(yàn)證這個(gè)假說(shuō)，作者構(gòu)建了H2228動(dòng)物模型。結(jié)果表明，該抑制劑對(duì)A549動(dòng)物模型沒(méi)有抑制作用（A549細(xì)胞不表達(dá)融合基因，并且KRAS突變，EGFR野生型）[45]，而在H2228動(dòng)物模型出現(xiàn)完全的生長(zhǎng)抑制作用，該結(jié)果說(shuō)明，TAE684特異性地抑制H2228的EML4-ALK。另外，比較TAE684與PF2341066的療效，無(wú)論在體內(nèi)還是在體外研究中，PF2341066療效均不如TAE684。

6 展望

綜上所述，與其他分子靶標(biāo)和靶向藥物相比，EML4-ALK的研究歷程才剛開(kāi)始，EML4-ALK陽(yáng)性患者的臨床特征與EGFR突變者相似，但并不能從EGFR-TKI靶向治療中獲益。故對(duì)擬行TKI治療的患者，可以首先檢測(cè)KRAS突變狀態(tài)，排除陽(yáng)性后對(duì)KRAS陰性者進(jìn)行EGFR突變檢測(cè)；若EGFR突變陽(yáng)性，選擇TKI治療，陰性則繼續(xù)行EML4- ALK檢測(cè)；若EML4-ALK陽(yáng)性者，需要嘗試針對(duì)ALK的靶向治療。由此，我們認(rèn)為EML4-ALK是對(duì)NSCLC個(gè)體化治療檢測(cè)的進(jìn)一步豐富和完善，我們有理由相信，EML4-ALK融合基因作為具有獨(dú)特臨床特征肺癌的又一分子標(biāo)志物，昭示著針對(duì)ALK的靶向治療將促使肺癌個(gè)體化治療更加精準(zhǔn)有效和逐步走向成熟完善。針對(duì)這一靶點(diǎn)的深入研究，將有助于篩選EGFR-TKI合適的治療人群并開(kāi)創(chuàng)EGFR-TKI耐藥的NSCLC靶向治療新領(lǐng)域。

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