摘 要:以“龍井一號”黒稻為試驗材料,研究了不同程度干旱脅迫對黒稻產(chǎn)量及花青素-3-葡萄糖苷的影響。結(jié)果表明,隨著干旱脅迫程度的增加,千粒重和實際產(chǎn)量呈下降趨勢,黒米中花青素-3-葡萄糖苷的含量隨著干旱脅迫程度的增加而增加。
關(guān)鍵詞:干旱脅迫 黒稻 花青素-3-葡萄糖苷
中圖分類號:S-3 文獻標識碼:A 文章編號:1672-3791(2012)12(a)-0145-02
黑米被認為是稻米中的珍品,黑米有滋陰補腎、補中益氣、活血化淤等功效。黑米具有的很多生理功能都與其所含的花色苷類色素有關(guān)。黑米花色苷(anthocyanin)屬于黃酮多酚類化合物,是由花青素(anthocyanidin)與各種糖以糖苷鍵結(jié)合形成的糖苷[1],黑米花色苷中含量最多的是花青素-3-葡萄糖苷[2]。研究發(fā)現(xiàn)黑米成熟過程中會在種皮內(nèi)積聚形成大量花色苷,從而使其糙米呈現(xiàn)出棕紅色、紫紅色、紫黑色乃至黑色等顏色?;ㄉ帐侵参镏匾拇渭壌x產(chǎn)物之一,在植物組織中,花色苷作為吸收紫外線的色素對植物體起著保護作用,當植物遭遇低溫、干旱等環(huán)境脅迫時,植物體內(nèi)會迅速積累花色苷幫助植物體抵御逆境[3]。
由于食品加工業(yè)中常用的人工合成色素的安全性越來越多地受到人們的關(guān)注,以及黑米花色苷色素的工業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用的實現(xiàn),使食品工業(yè)對黑米花色苷的需求量日益增加。目前對水稻的環(huán)境脅迫研究較多,但對黒稻的研究較少。試驗以干旱脅迫處理黒稻,探討其干旱程度對黒稻的產(chǎn)量和花青素-3-葡萄糖苷含量的影響,以期為提高黒稻中花色苷產(chǎn)量提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料與干旱處理
供試品種選自吉林新星天然植物開發(fā)有限責任公司提供的優(yōu)質(zhì)品種“龍井一號”黑稻。本試驗于吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院植物科學(xué)學(xué)院實驗基地進行。
采用盆栽實驗,土壤為水稻土,所用塑料盆直徑大小為30 cm,高40 cm,于2010年8月上旬進行移栽,挑選生長一致的秧苗每盆3棵苗。2010年8月25日開始水分脅迫處理。設(shè)對照CK(土壤相對持水量100%)、輕度脅迫A1(最大持水量的30%)、中度脅迫A2(最大持水量的60%)3個處理。水分脅迫處理前,將全部試驗材料澆水至盆土水分飽和。以后對照植株保持每天澆水至土壤水分飽和,每天定時取土測定處理植株盆土含水量,使處理植株盆土含水量分別達到相對應(yīng)的水分含量。整個試驗過程取樣8次,每隔5天取樣1次,取樣后立即放入冰盒,帶回實驗室,用于花青素-3葡萄糖苷測定的黒稻于-80 ℃保存?zhèn)溆?,成熟時測定千粒重及產(chǎn)量。
1.2 方法
1.2.1 土壤含水量
土壤含水量:按5點取樣法取土,105 ℃烘干24 h,土壤含水量=(土壤鮮重-土壤干重)/干土重×100%[4]。
1.2.2 花青素-3-葡萄糖苷測定
采用高效液相色譜法[5]:吸取黑米提取物的制備液1 mL定容至10 mL,取10 μL上樣。標準曲線的繪制:將花青素-3-葡萄糖苷標準品10 mg溶于10 mL1%的鹽酸甲醇溶液,即為1 mg/mL的標準液。從標準液中吸取一定量,用1%鹽酸甲醇稀釋成0.1、0.2、0.5、0.7、1.0 mg/mL標準品待測液,取10 μL上樣,以花青素-3-葡萄糖苷濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標進行線性回歸分析,繪制標準品的標準曲線:Y=1.864960×10-5 ×-0.329793,r=0.9999。
色譜條件:ODSC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流動相:4%磷酸∶乙腈(8.8∶1.2,V∶V,pH=2),0.45μm濾膜抽濾,等梯度洗脫,流速0.8 mL/min;柱溫30 ℃;檢測波長520 nm。
1.2.3 產(chǎn)量及千粒重的計算
折合成公頃產(chǎn)量計算。
2 結(jié)果與分析
由表1可以看出各種控水處理均引起黒稻產(chǎn)量的降低,干旱程度越嚴重,降低幅度越大。土壤相對含水量60%(A1)和土壤相對含水量30%(A2)在控水結(jié)束后產(chǎn)量分別比對照降低了0.9%和3.1%。
2.1 干旱脅迫對花青素-3-葡萄糖苷含量的影響
黑米種皮中主要含有花青素-3-葡萄糖苷和芍藥素-3-葡萄糖苷兩種花色苷單體,且花青素-3-葡萄糖苷含量最高[6]。由圖2可知,在整個試驗過程中花青素-3-葡萄糖苷含量的變化均呈上升趨勢,且兩個干旱處理的黒稻中花青素-3-葡萄糖苷含量均高于CK。
3 討論
(1)灌漿是禾谷類作物生長的重要時段,其持續(xù)時間和灌漿速率決定了最終的籽粒重量是產(chǎn)量的重要構(gòu)成因子之一[7]。干旱是影響水稻產(chǎn)量和品質(zhì)的主要環(huán)境因子,水稻灌漿期的干旱脅迫能使籽粒產(chǎn)量下降[8]。下降的程度取決于脅迫的輕重和持續(xù)時間,試驗結(jié)果表明兩種程度的干旱脅迫下產(chǎn)量都比對照組低。
(2)黑米花色苷中含量最多的是花青素-3-葡萄糖苷,花色苷的合成是內(nèi)因和外因共同作用的結(jié)果,基因編碼的酶決定了花色苷合成的種類,而環(huán)境因子不僅能影響花色苷生物合成的速率,而且可以對其積累量和穩(wěn)定性產(chǎn)生作用[9]。黑米進入著色期,花色苷開始大量積累,給黑米一個干旱的逆境生長環(huán)境,使黒稻中抗逆因子之一的花色苷增多來抵御缺水的逆境,干旱處理下花色苷含量均高于對照。因此,創(chuàng)造適度干旱的土壤環(huán)境,可提高黒稻中花色苷的含量?;ㄉ湛鼓娴臋C制目前還不十分清晰,因此干旱脅迫對增加黒稻中花色苷含量的機制還有待進一步研究。
參考文獻
[1]王艷龍,石紹福,韓豪,等.中國黑米花色苷研究現(xiàn)狀及展望[J],中國生化藥物雜志,2010,31(1):63-66.
[2]張芳軒,張名位,張瑞芬,等.黑米種皮中花色苷組成及含量的HPLC分析[J].中國糧油學(xué)報,2010,25(12):122-125.
[3]胡可,韓科廳,戴思蘭.環(huán)境因子調(diào)控植物花青素苷合成及呈色的機理[J].植物學(xué)報,2010,45(3):307-317.
[4]許麗穎,赫玉蘋,王剛,等.水分脅迫對紫葉李葉片色素含量與PAL活性的影響[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2007,29(2):1682-172.
[5]薛曉麗.HPLC法測定黑米中花青素的主要成分及含量[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(11):4854-4855.
[6]孔令瑤,汪云,曹玉華,等.黑米色素的組成與結(jié)構(gòu)分析[J].食品與生物技術(shù)學(xué)報,2008,27(2):25-29.
[7]王成璦,王伯倫,張文香,等.干旱脅迫時期對水稻產(chǎn)量及產(chǎn)量性狀的影響[J].農(nóng)藝科學(xué),2008,24(2):160-166.
[8]梁滿中,譚周镃,陳良碧,等.干旱脅迫對水稻水分利用效率的影響[J].生命科學(xué)研究,2000,4(4):351-353.
[9]黃鴻曼,袁利兵,彭志紅,等.花青素的生物合成與環(huán)境調(diào)控研究進展[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,13:118-120.