■F.N.AlmeidaJ.K.HtooJ.ThomsonH.H.Stein
(1.伊利諾斯州立大學(xué),動(dòng)物科學(xué)系,厄巴納,美國IL 61801;2.Evonik lndustries AG,Hanau德國 63457;3.Evonik Degussa Corporation,Kennesaw,GA美國 30144)
美國屠宰業(yè)生產(chǎn)出的血制品可用于斷奶仔豬日糧中,這是因?yàn)檠鞍拙哂泻芨叩臓I養(yǎng)價(jià)值(De-Roucheyet等,2002)。豬飼喂血制品后的生產(chǎn)性能的改善效果已被證實(shí)(Steidinger等,2000)。雖然血制品含有豐富的粗蛋白質(zhì)(CP)和氨基酸(AA),但是血制品的質(zhì)量受到加工工藝的影響(Meeker,2009),包括加熱處理方式對(duì)質(zhì)量的影響。如果產(chǎn)品加熱過度,則會(huì)產(chǎn)生美拉德反應(yīng),因而可能會(huì)降低AA尤其是賴氨酸的消化率(Nursten,2005)。
噴霧干燥血粉(SDAB)是搜集屠宰動(dòng)物全血,并在收集的同時(shí)添加抗凝血?jiǎng)?Ockerman等,2000)。噴霧干燥過程的特征,平均入口溫度為225℃,出口溫度相對(duì)較低,低于70℃(Ockerman等,2000)。噴霧干燥血球(SDBC)和噴霧干燥血漿蛋白(SDPP)都是從動(dòng)物血液生產(chǎn)而得,動(dòng)物血從屠宰廠收集,在血液離心處理前添加檸檬酸鈉作為抗凝血?jiǎng)x心處理后從血漿中分離出血細(xì)胞。然后兩個(gè)部分分別噴霧干燥得到SDBC和SDPP(Ockerman等,2000;vanDijk等,2001)。血粉是用快速干燥或滾筒干燥器干燥全血而得。這個(gè)過程涉及幾個(gè)步驟,包括傾析、加熱、加壓、干燥和粉碎。水分在加熱和干燥過程中被去除,使產(chǎn)品變成所需的干物質(zhì)形式。干燥過程可能會(huì)影響血粉的營養(yǎng)價(jià)值或品質(zhì),因?yàn)榧訜釙?huì)導(dǎo)致賴氨酸和還原糖通過美拉德反應(yīng)縮合,從而降低賴氨酸的可用性(例如,利用賴氨酸合成蛋白)(Bellaver,2005)。
因?yàn)椴煌难破吩谏a(chǎn)中使用不同的加工工藝,所以不同的血制品的氨基酸消化率也不同。例如,已證明用20多種來源的血粉飼喂試驗(yàn)鼠,氮的消化率受干燥類型、干燥溫度和干燥時(shí)間的影響(Moughan等,1999)。在該試驗(yàn)中,氮消化率和干燥溫度及時(shí)間相關(guān),在150℃下干燥210 min的血粉,其氮的消化率系數(shù)為170,而在95℃下噴霧干燥30 s的血粉,其氮消化率系數(shù)為950。而比較美國不同血制品飼喂斷奶仔豬的氨基酸消化率的差異,尚未見報(bào)道。因此,本文旨在測(cè)定SDAB、SDBC、SDPP和2種血粉(ABM和PBM)飼喂斷奶仔豬的表觀回腸消化率(AID)和標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率(SID)。
本試驗(yàn)的方法經(jīng)伊利諾斯州立大學(xué)的試驗(yàn)動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)的審查和批準(zhǔn)。本試驗(yàn)在伊利諾斯州立大學(xué)研究中心進(jìn)行。試驗(yàn)豬是G型公豬和F-25母豬雜交的后代(Genetiporc Alexandria MN USA)。本試驗(yàn)使用的血制品包括:SDAB、SDBC和SDPP,均來自APC Inc.,Ankeny,IA,USA;快速 干 燥 禽 血 粉 (ABM)來 自 Griffìn Industries LLC Cold Spring,KY,USA;豬血粉(PBM)來自Consumers Supply Distributing Co.,North Sioux City,SD,USA;酪蛋白購自International Ingredients lnc.,St.Louis,MO,USA(見表 1)。
表1 原料組成營養(yǎng)成分分析(g/kg,飼喂基礎(chǔ),另有指明標(biāo)注除外)
試驗(yàn)選用7頭斷奶閹公豬[初始體重(11.5±1.1)kg]在回腸末端安裝一個(gè)T型瘺管,采用7×7拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì),每個(gè)拉丁方含有7種日糧和7個(gè)階段兩個(gè)因素。每只豬被分別飼養(yǎng)在獨(dú)立的限位欄(1.2 m×1.5 m)里,控制室內(nèi)環(huán)境(27℃,76%濕度)。每欄安裝一個(gè)乳頭式飲水器。試驗(yàn)結(jié)束時(shí),平均末重為(17.5±1.5)kg。
7種日糧配方設(shè)計(jì)見表2和表3。其中第1種日糧,用酪蛋白作為唯一的粗蛋白質(zhì)和氨基酸來源,用于測(cè)定酪蛋白粗蛋白質(zhì)和氨基酸的AID和SID,并可用于測(cè)定不同生產(chǎn)過程生產(chǎn)的血制品的粗蛋白質(zhì)和氨基酸的AID和SID(Fan等,1995);另外5種日糧基于酪蛋白和每種血制品的混合物來進(jìn)行設(shè)計(jì);最后1種日糧是無氮日糧,用于測(cè)定回腸氨基酸和粗蛋白質(zhì)基礎(chǔ)內(nèi)源性損失。所有日糧中均添加維生素和礦物質(zhì),滿足或超過目前推薦的營養(yǎng)需要量(NRC 1998)。所有日糧都含有4 g/kg氧化鉻,作為標(biāo)記物。
表2 試驗(yàn)日糧原料組成(g/kg,飼喂基礎(chǔ))
表3 試驗(yàn)日糧營養(yǎng)成分分析(g/kg,飼喂基礎(chǔ))
整個(gè)試驗(yàn)過程,每天飼喂1次,飼喂水平是維持需要量的3倍,自由飲水。記錄每個(gè)階段初始時(shí)豬的體重,并記錄每天所提供的飼料量。每個(gè)階段的頭5 d作為日糧的適應(yīng)期。在第6 d和第7 d,采用標(biāo)準(zhǔn)的操作程序收集8 h回腸消化物(日流量約30%)(Almeida等,2011)。
食糜樣品凍干后碾磨粉碎并通過2 mm篩,用于化學(xué)分析。用茚三酮柱后衍生離子交換色譜法分析日糧成分和回腸樣品的氨基酸組成。氨基酸用過甲酸氧化,用焦亞硫酸鈉中和(Llames等,1994;Commission Direcetive,1998)。用6 N HCl在110℃下水解蛋白24 h后分解成氨基酸,采用內(nèi)標(biāo)法(正亮氨酸),通過測(cè)定與茚三酮反應(yīng)產(chǎn)物在570 nm處的吸收值來定量檢測(cè)。色氨酸用HPLC-熒光檢測(cè)法(消光280 nm,發(fā)射356 nm)檢測(cè),用八水氫氧化鋇在110℃下堿水解20 h(Commission Directive,2000)。日糧組成成分和回腸樣品在103℃下烘箱干燥4 h分析干物質(zhì)含量(方法935.29;AOAC International,2007),粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定按照Dumas方法步驟(方法968.06;AOAC International,2007)。同時(shí),進(jìn)行日糧和回腸樣品的鉻含量(方法 990.08;AOAC International,2007)、原料組成的灰分(方法942.05;AOAC International,2007)和酸水解乙醚浸出物(方法954.02;AOAC International,2007)的分析,總能分析用彈式量熱法分析(Model 6300,Parr Instruments,Moline,IL,USA)。
每種日糧粗蛋白質(zhì)和氨基酸的回腸表觀消化率系數(shù)的計(jì)算方法同Baker等(2010)描述的方法。通過飼喂無氮日糧來測(cè)定每種氨基酸在回腸末端的基礎(chǔ)內(nèi)源性損失。通過CP和每種AA的回腸內(nèi)源性損失校正AID,來計(jì)算每種日糧的CP和每種AA的SID(Baker等,2010)。添加了酪蛋白和每種血制品的日糧,通過減去酪蛋白在日糧中貢獻(xiàn)的可消化CP和AA的濃度來計(jì)算每種血制品的CP和AA消化率。但每一種血制品的CP和AA消化率的計(jì)算方法各不相同(Fan等,1995)。
數(shù)據(jù)分析采用SAS的Proc MIXED程序(SAS Institute Inc.,Cary,NC)進(jìn)行。用單變量程序來檢測(cè)極端值。觀測(cè)得SDAB、SDBC、SDPP、ABM和PBM組有超過3個(gè)均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差較大,作為極端值排除。觀測(cè)到SDBC有2個(gè)極端值,PBM有1個(gè)極端值,均被剔除出數(shù)據(jù)集。此模型將日糧作為固定效應(yīng),豬和豬的飼喂時(shí)間(即7 d的試驗(yàn)期)作為隨機(jī)效應(yīng)。所有的計(jì)算中,豬只作為一個(gè)試驗(yàn)單位,用α=0.05來判定各均值之間的差異顯著性。
在試驗(yàn)期間,所有的豬保持健康體況并能輕易的完成采食。SDBC、SDPP、ABM和PBM的干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)含量(見表1)和已發(fā)表的文章(DeR-ouchey等,2002、2003;Meeker,2009;NSNG,2010)結(jié)論接近一致。同樣地,SDBC和2種來源的血粉的所有必需氨基酸組成和NRC(1998)及DeR-ouchey等(2002)報(bào)道的值一致。
SDAB的粗蛋白質(zhì)AID比ABM和PBM的粗蛋白質(zhì)AID高(P<0.01),但和SDBC和SDPP的粗蛋白質(zhì)AID及酪蛋白的AID沒有差異(P>0.05)(見表4)。SDAB、SDBC、SDPP和酪蛋白中的所有氨基酸(除異亮氨酸、半胱氨酸和甘氨酸之外)的AID比ABM 和PBM 的AID 高(P<0.05)。SDAB、SDBC、SDPP和酪蛋白的賴氨酸AID比ABM和PBM的賴氨酸AID高(P<0.01)(分別為0.952、0.940、0.941、0.926、0.702和0.751),但ABM和PBM 的賴氨酸AID沒有差異(P>0.05)。SDAB、SDBC、SDPP和酪蛋白的必需氨基酸平均AID和總氨基酸平均AID均比ABM和PBM的高(P<0.01)。
SDAB、SDBC、SDPP和酪蛋白的粗蛋白質(zhì)SID比ABM和PBM的粗蛋白質(zhì)SID高(P<0.01)(分別為1.040、0.945、0.995、0.965、0.704和0.689)(見表5)。賴氨酸的SID值,SDAB(0.998)、SDBC(0.976)、SDPP(0.981)和 酪 蛋 白 (0.970)比 ABM(0.740)和PBM(0.786)的高,但是,ABM和PBM的賴氨酸SID沒有差異(P>0.05)。相同地,SDAB、SDBC、SDPP和酪蛋白的必需氨基酸平均SID比ABM和PBM的高(P<0.01)。SDAB、SDBC、SDPP和酪蛋白的總氨基酸平均SID比ABM和PBM的高(P<0.01)。SDAB的大部分氨基酸的SID接近1.0,除了精氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸的SID略高于1.0。ABM和PBM
的組氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和纈氨酸的SID更低(P<0.01)。然而,ABM和PBM的大部分氨基酸的SID值之間沒有差異。
表4 美國血制品飼喂斷奶仔豬的粗蛋白質(zhì)和氨基酸的表觀回腸消化率系數(shù)
表5 美國血制品飼喂斷奶仔豬的粗蛋白質(zhì)和氨基酸的回腸消化率標(biāo)準(zhǔn)化系數(shù)
SDPP的粗蛋白質(zhì)AID值與Mateo等(2007)及Cervantes-Pahm等(2010)報(bào)道的一致。據(jù)觀察可知,2種血粉和噴霧干燥血制品之間的AID值存在差異,其原因可能是ABM和PBM加工過程中的熱破壞程度比SDAB、SDBC和SDPP加工過程的熱破壞程度高。本試驗(yàn)并未關(guān)注血產(chǎn)品加工過程中的的干燥溫度和時(shí)間,但是,據(jù)報(bào)道,商業(yè)血粉的干燥時(shí)間在0.5~240 min范圍內(nèi),干燥溫度在92~500℃范圍內(nèi)(Moughan等,1999)。噴霧干燥血制品的加工溫度范圍在200~250℃(Ockerman等,2000),但是其加溫的時(shí)間很短,這也許就是噴霧干燥相比其他干燥方式的優(yōu)勢(shì)(Torrallardona,2010)。在飼料加工過程中,蛋白涉及到加熱處理,這將導(dǎo)致美拉德反應(yīng)的發(fā)生,在初始階段,賴氨酸的氨基和還原糖的羰基發(fā)生反應(yīng)(Nursten,2005)。然而,賴氨酸和還原糖的反應(yīng)產(chǎn)物不能被豬消化,所以,賴氨酸的消化率降低了(González-Vega等,2011)。賴氨酸與粗蛋白質(zhì)比值可作為熱損壞蛋白的指標(biāo),因?yàn)榕c受熱破壞的飼料其賴氨酸含量降低,而粗蛋白質(zhì)含量不變(Kim等,2012)。ABM和PBM的賴氨酸與粗蛋白質(zhì)比值(分別為0.085和0.087)相對(duì)低于SDAB(0.092)、SDBC(0.096)和 SDPP(0.090)的賴氨酸與粗蛋白質(zhì)比值,這表明ABM和PBM的熱破壞程度確實(shí)高于SDAB、SDBC和SDPP的熱破壞程度。噴霧干燥牛血粉的賴氨酸與粗蛋白質(zhì)比值(0.129)也高于快速干燥牛血粉的賴氨酸與粗蛋白質(zhì)比值(0.085),表明噴霧干燥比快速干燥造成的熱損壞程度低,快速干燥中血粉的干燥時(shí)間雖短(3.5 min),但干燥溫度范圍高在260~427℃(Kramer等,1978;Kats等,1994)。從20種來源的血粉產(chǎn)品的檢測(cè)結(jié)果可見,其中有7個(gè)賴氨酸與粗蛋白質(zhì)比值平均為0.081的樣品(511)的氮消化率低于另7個(gè)賴氨酸與粗蛋白質(zhì)比值平均為0.084的樣品(896)的氮消化率(Moughan等,1999)。可見,賴氨酸與粗蛋白質(zhì)比值是評(píng)價(jià)蛋白飼料原料的一個(gè)很有價(jià)值的營養(yǎng)質(zhì)量指標(biāo)。目前的研究結(jié)果都支持這一觀點(diǎn)。本試驗(yàn)中使用的ABM和PBM的大多數(shù)氨基酸AID值相對(duì)低于Ravindran等(2005)報(bào)道的3種不同來源血粉的氨基酸SID值。這一結(jié)果也反應(yīng)了血粉在加工過程中受到了熱破壞,因?yàn)楸驹囼?yàn)中血粉(ABM和PBM)的賴氨酸與粗蛋白質(zhì)比值的均值(0.086)比Ravindran等(2005)報(bào)道的數(shù)據(jù)(0.103)低。
SDPP的氨基酸SID值和之前報(bào)道的值一致(Gottlob等,2006)。據(jù)我們所知,SDAB飼喂豬的氨基酸SID值尚未見有報(bào)道,但是本試驗(yàn)測(cè)得的SDBC、SDPP、酪蛋白、ABM和PBM的賴氨酸SID值和之前的報(bào)道值(Rayadurg,2005;Cervantes-Pahm等,2010;NSNG2010)接近一致。
Kadim等(2002)、Adedokun等(2008)報(bào)道的氨基酸SID超過1.0,出現(xiàn)這一結(jié)果可能的原因是測(cè)試成分的氨基酸組成含量比內(nèi)源性氨基酸的含量還低。然而,本試驗(yàn)情況并非如此。本試驗(yàn)使用的日糧含90 g/kg酪蛋白,在家禽中已被觀測(cè)到,家禽日糧的酪蛋白含量從0增加至150 g/kg,回腸內(nèi)源性氨基酸呈線性增加(Adedokun等,2007)。內(nèi)源性氨基酸增加,則會(huì)導(dǎo)致氨基酸的SID值增加。由于在日糧中添加了酪蛋白導(dǎo)致了相對(duì)較高的內(nèi)源性氨基酸,這可能就是我們?yōu)槭裁磿?huì)觀察到氨基酸SID值超過1.0的原因。然而,本試驗(yàn)結(jié)果清楚的表明了噴霧干燥血制品的氨基酸SID值接近1.0。
本試驗(yàn)的結(jié)果表明,不同品種的家禽或豬的血粉,其營養(yǎng)品質(zhì)沒有差異。這一結(jié)果和Kats等(1994)報(bào)道的結(jié)果一致,其報(bào)道不同品種的家禽或豬的血粉飼喂斷奶仔豬的性能表現(xiàn)沒有差異。
總之,SDAB、SDBC和SDPP的氨基酸SID值比ABM和PBM的氨基酸SID值高,這表明斷奶仔豬日糧添加噴霧干燥血粉優(yōu)于添加普通血粉產(chǎn)品。不同品種的家禽或豬的血粉產(chǎn)品飼喂斷奶仔豬的氨基酸SID值沒有差異。