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貯藏溫度對(duì)山竹果皮木質(zhì)化相關(guān)酶活性和果肉腐爛的影響

2013-03-06 02:32于立梅劉朝霞陳海光
食品科學(xué) 2013年18期
關(guān)鍵詞:山竹果殼常溫

楊 敏,于立梅,*,劉朝霞,陳海光

(1.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院輕工食品學(xué)院,廣東 廣州 510225;2.廣東檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心,廣東 廣州 510623)

貯藏溫度對(duì)山竹果皮木質(zhì)化相關(guān)酶活性和果肉腐爛的影響

楊 敏1,于立梅1,*,劉朝霞2,陳海光1

(1.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院輕工食品學(xué)院,廣東 廣州 510225;2.廣東檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心,廣東 廣州 510623)

以海南山竹果為原料,研究不同貯藏溫度(30、4℃)對(duì)采后山竹果皮木質(zhì)化相關(guān)酶活性和果肉腐爛的影響,探討山竹果皮木質(zhì)化效應(yīng)。結(jié)果表明,不同貯藏溫度對(duì)山竹果皮木質(zhì)化效應(yīng)程度不同,低溫處理初期有冷害現(xiàn)象,導(dǎo)致酶活性和木質(zhì)素含量增強(qiáng),但隨著貯藏期延長(zhǎng)至末期,常溫處理的木質(zhì)素含量比同低溫處理的木質(zhì)素含量增加14.3%。常溫貯藏山竹果實(shí)PAL、POD、PPO及CAD活性比低溫增加顯著。常溫處理和低溫處理的山竹PAL活性峰值分別為170.40U/(g·h)和180.12U/(g·h),在貯藏后期(6~15d),各組處理的活性均呈現(xiàn)持續(xù)下降的趨勢(shì)。低溫處理的腐爛指數(shù)低于常溫處理,15d常溫處理的腐爛率增加了78.89%,低溫處理的腐爛率增加了32.22%,可能是低溫處理延緩果殼木質(zhì)化相關(guān)酶活性,減少細(xì)胞代謝物質(zhì)含量的積累,保持較低的呼吸強(qiáng)度,從而可以抑制腐爛。

山竹果;木質(zhì)化;酶活性; 貯藏溫度

山竹(Garcinia mangostana L.)為藤黃科(Guttiferae)山竹子屬植物,又稱(chēng)倒捻子、鳳果或莽吉柿,原產(chǎn)于馬來(lái)西亞群島,現(xiàn)分布于印度尼西亞、菲律賓、緬甸、馬來(lái)西亞、越南、泰國(guó)、錫蘭、中國(guó)等地。山竹味偏酸,補(bǔ)益作用較強(qiáng),具有“熱帶果后”之稱(chēng)。果實(shí)可食部分占29 %~45%,果皮表皮紫褐色,其余部分淺白色,厚度為0.8~1.1cm,占單果鮮質(zhì)量的52%~68%[1-2]。由于山竹生產(chǎn)的季節(jié)性較強(qiáng),采收后極易出現(xiàn)果皮木質(zhì)化、褐變和腐爛變質(zhì),影響著山竹的食用品質(zhì)和商品價(jià)值。木質(zhì)化的出現(xiàn)與果殼組織細(xì)胞壁中木質(zhì)素的沉積有關(guān),而木質(zhì)素的生成由植物細(xì)胞中的一些酶來(lái)調(diào)控,如多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂醇脫氫酶(CAD)、過(guò)氧化物酶(POD)及其同工酶等。在植物體內(nèi),PAL是在木質(zhì)化進(jìn)程中將L-苯丙氨酸轉(zhuǎn)化成反式肉桂酸的關(guān)鍵酶,而過(guò)氧化物酶參與將羥基肉桂醇聚合成木質(zhì)素[3]。對(duì)于采后山竹果實(shí)木質(zhì)化及硬度的增加是否與相關(guān)酶的活性變化相關(guān),果皮木質(zhì)化對(duì)果肉的影響均未見(jiàn)報(bào)道。因此本實(shí)驗(yàn)以海南山竹果實(shí)為材料,主要探討常溫(30℃)和低溫(4℃)處理對(duì)山竹果殼木質(zhì)化相關(guān)酶活性和果肉腐爛的影響,初步探討山竹采后果品木質(zhì)化對(duì)果肉的影響,為山竹果殼木質(zhì)化形成機(jī)理和果肉保鮮提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

實(shí)驗(yàn)原料山竹采自海南五指山市毛道鄉(xiāng)山竹種植園。果實(shí)于正常食用成熟度采收,采后當(dāng)天運(yùn)回學(xué)院實(shí)驗(yàn)室。

PVP(聚乙烯吡咯烷酮) 張家港科悅精細(xì)化工有限公司;NADP(輔酶Ⅱ) 美國(guó)Sanland 公司;磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、反式肉桂酸(cinnanic acid) 美國(guó)Alfa Aesar公司;β-巰基乙醇、硼砂、硼酸、鹽酸、L-苯丙氨酸、三羥甲基氨基甲烷(Tris)等均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?/p>

1.2 儀器與設(shè)備

DU-730型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 日本島津分析儀器廠(chǎng);恒溫水浴鍋 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司;電熱恒溫培養(yǎng)箱 上海索譜儀器有限公司;HY-Z型調(diào)速振蕩器 常州國(guó)華電器有限公司;高速離心機(jī) 長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司;KQ5200超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司。

1.3 方法

選取無(wú)機(jī)械損傷、大小均勻、成熟度一致的山竹果實(shí),分裝于0.02mm聚乙烯袋,用橡皮筋繞兩道扎袋口而不密封,分別于30℃(常溫)和4℃(低溫)貯藏。每份35個(gè),重復(fù)5次。每3d每組隨機(jī)取1份,將果肉和果皮分離,果皮粉碎后進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定。

1.3.1 木質(zhì)素含量的測(cè)定

參照朱海英等[4]的方法。

1.3.2 粗纖維含量的測(cè)定

參考黃萍等[5]的方法。

1.3.3 PPO活性的測(cè)定

參照Galeazzi[6]和Zauberman[7]等的方法。樣品液制備:取山竹果殼4.0g,加入20mL 0.1mol/L pH6.8預(yù)冷的磷酸鈉緩沖液,在冰浴條件下研磨,勻漿后將勻漿液全部轉(zhuǎn)移入離心管中。在12000r/min、4℃條件下離心20min,收集上清液即為PPO提取液,低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

PPO活性的測(cè)定:在6.7mL的反應(yīng)體系中,加入4.4mL 0.1mol/L pH6.8的磷酸緩沖液,2.0mL 0.1mol/L的鄰苯二酚(0.1mol/L pH6.8的磷酸緩沖液溶解)和0.3mL酶提取液,立即混合后在420nm波長(zhǎng)處比色,然后迅速放在37℃的水浴中反應(yīng),酶提取液加入后開(kāi)始計(jì)時(shí),測(cè)定在420nm波長(zhǎng)處反應(yīng)11min吸光度的變化,空白為0.1mol/L的磷酸緩沖液(pH6.8)。以每克樣品(鮮質(zhì)量)每分鐘吸光度變化0.001為一個(gè)酶活力單位(U),酶活性以U/g表示。

1.3.4 PAL活性的測(cè)定

參照Koukol[8]和王敬文[9]等的方法,稍有變動(dòng)。樣品液制備:稱(chēng)取1.0g山竹果殼,置于研缽中,加入20mL 0.lmol/L pH8.8預(yù)冷的硼酸-硼砂提取緩沖液(含40g/L PVP、5mmol/L β-巰基乙醇),在冰浴條件下研磨成勻漿。將勻漿液全部轉(zhuǎn)入到離心管中,于4℃條件下,12000r/min離心20min,收集上清液,即為粗酶提取液,低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

PAL活性的測(cè)定:l.0mL 0.05mol/L L-苯丙氨酸,2.9mL 0.1mol/L pH8.8硼酸緩沖液,0.1mL樣品液。以煮沸5min的失活酶樣品液作為對(duì)照,以加0.1mL的硼酸緩沖液為空白對(duì)照?;靹蚝螅瑢⑵渲糜?7℃水浴中保溫60min。保溫結(jié)束后,立即向反應(yīng)管中分別加入0.1mL 6.0mol/L的HCl終止反應(yīng),如有沉淀應(yīng)離心除去。用空白對(duì)照調(diào)零,分別測(cè)定樣品管和對(duì)照管中溶液在波長(zhǎng)290nm處的吸光度(A1和A0),以每小時(shí)每克樣品(鮮質(zhì)量)酶促反應(yīng)體系吸光度A290變化0.01為1個(gè)PAL活性單位(U),酶活性以U/g表示。

1.3.5 CAD活性的測(cè)定

參照Goffner等[10]的方法。樣品液制備:取山竹果殼3.0g,加入15mL 0.1mol/L pH8.8預(yù)冷的Tris-HCl提取緩沖液(含40g/L PVP、5mmol/L β-巰基乙醇),在冰浴條件下研磨,勻漿后在12000r/min、4℃條件下離心20min,收集上清液即為樣品液,低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

CAD活性的測(cè)定:酶液反應(yīng)體系為:2.8mL 0.1mol/L pH8.8 Tris-HCl緩沖液、1mL 2mmol/L的NADP、1mL 1mmol/L的反式肉桂酸、0.1mL樣品液,以煮沸5min的樣品液作對(duì)照,以加0.1mL緩沖液為空白對(duì)照;將其置于37℃保溫30min。結(jié)束保溫后,立即向反應(yīng)管中分別加入0.1mL 6.0mol/L的HCl終止反應(yīng),如有沉淀應(yīng)離心除去。用空白對(duì)照調(diào)零,分別測(cè)定樣品管和對(duì)照管中溶液在波長(zhǎng)340nm處的吸光度(A1和A0),以每小時(shí)每克樣品(鮮質(zhì)量)酶促反應(yīng)體系吸光度A340變化0.001為1個(gè)CAD活性單位(U),酶活性以U/g表示。

1.3.6 POD活性的測(cè)定

參照Hammerschmidt[11]、Kar[12]和Srivastava[13]等的方法。樣品液制備:取山竹果殼4.0g,加入20mL 0.1mol/L pH6.8預(yù)冷的磷酸鈉提取緩沖液(含40g/L PVP、5mmol/L β-巰基乙醇),在冰浴條件下研磨,勻漿后以12000r/min、4℃條件下離心20min,收集上清液即為樣品液,低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

POD活性的測(cè)定:6.2mL反應(yīng)液中含有0.3mL 4.0%愈創(chuàng)木酚、0.3mL 0.46%過(guò)氧化氫、5.0mL磷酸鈉緩沖液(pH6.8)和0.6mL酶液,從加酶液后1min開(kāi)始記錄每分鐘反應(yīng)體系在470nm波長(zhǎng)處的吸光度,連續(xù)測(cè)定6min,以每克樣品(鮮質(zhì)量)每分鐘吸光度變化0.001為1個(gè)POD活性單位(U),酶活性以U/g表示。

1.3.7 腐爛指數(shù)的測(cè)定

參考芮懷瑾等[14]的方法,將果實(shí)按腐爛面積大小分為4級(jí)。0級(jí),無(wú)腐爛;1級(jí),腐爛面積小于果實(shí)面積的10%;2級(jí),腐爛面積占果實(shí)面積的10%~30%;3級(jí),腐爛面積大于果實(shí)面積30%。按下式計(jì)算腐爛指數(shù):腐爛指數(shù)/% =(∑(級(jí)別×該級(jí)果數(shù))/總果數(shù))×100

1.3.8 數(shù)據(jù)分析方法

每個(gè)實(shí)驗(yàn)測(cè)定重復(fù)3次,獲得平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。應(yīng)用SPSS 19.0軟件對(duì)所有試驗(yàn)最終數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,采用Duncan’s新復(fù)極差法進(jìn)行方差分析,檢驗(yàn)差異顯著性(P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度貯藏山竹果殼木質(zhì)素含量的變化

圖1 不同溫度貯藏山竹果殼木質(zhì)素的變化Fig.1 Changes of lignin content during storage of mangosteen pericarp at different temperatures

木質(zhì)素作為植物次生代謝產(chǎn)物,是構(gòu)成細(xì)胞壁次生結(jié)構(gòu)的主要成分。山竹果殼木質(zhì)素含量的上升是衡量山竹果實(shí)貯藏期木質(zhì)化敗壞的最重要的生理指標(biāo)之一。如圖1 所示,在整個(gè)貯藏期,山竹果殼木質(zhì)素含量隨著貯藏期的延長(zhǎng)均呈上升趨勢(shì)。在0~3d,低溫處理的木質(zhì)素含量高于常溫處理,可能是冷害作用加速了木質(zhì)化,持續(xù)6d左右,但差異不顯著。在6~15d貯藏期,低溫處理的木質(zhì)素含量始終低于常溫處理,0d時(shí),兩種處理組的木質(zhì)素含量均為16.13g/100g,當(dāng)貯藏15d后,常溫處理的木質(zhì)素含量比同期低溫處理的木質(zhì)素含量增加14.3%。經(jīng)差異顯著性檢驗(yàn)分析,在貯藏第9~15天時(shí),常溫與低溫處理的木質(zhì)素含量之間的差異性顯著(P<0.05)。上述結(jié)果表明,低溫貯藏在一定程度上能抑制山竹果殼木質(zhì)素的形成,延緩果殼的木質(zhì)化。徐俐等[15]的研究表明,竹筍低溫貯藏時(shí)的呼吸強(qiáng)度明顯低于常溫貯藏,進(jìn)一步說(shuō)明了室溫條件下鮮竹筍的呼吸作用比低溫條件下旺盛,與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果類(lèi)似。

2.2 不同溫度貯藏山竹果殼粗纖維含量的變化

圖2 不同溫度貯藏山竹果殼粗纖維含量的變化Fig.2 Changes of coarse fiber content during storage of mangosteen pericarp at different temperatures

如圖2所示,山竹果殼粗纖維含量隨著貯藏期的延長(zhǎng)均呈上升趨勢(shì)。在貯藏0~3d時(shí),低溫處理的粗纖維含量高于常溫,貯藏3~6d,常溫處理的粗纖維急速增加,其中在第9天時(shí)達(dá)到了穩(wěn)定值,常溫和低溫處理的果殼粗纖維含量分別為29.50g/100g和25.37g/100g,常溫處理比低溫處理的含量高4.13%。經(jīng)差異顯著性檢驗(yàn)分析,6d后常溫處理與低溫之間差異性顯著(P<0.05)。上述結(jié)果表明,常溫貯藏條件下的山竹果殼粗纖維生成速率較低溫處理快,低溫貯藏在一定程度上能抑制山竹果殼粗纖維的形成,延緩果殼的衰老。經(jīng)相關(guān)性分析,山竹果殼粗纖維含量與木質(zhì)素含量相關(guān)系數(shù)為0.851,表明山竹果殼木質(zhì)化除了表現(xiàn)為木質(zhì)素含量的增加,也伴隨著粗纖維含量的增加。劉尊英等[16]研究結(jié)果表明,降低貯藏溫度能顯著抑制采后豌豆苗纖維化速率,并有效抑制可溶性糖和蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分的下降及因葉綠素降解而引起的黃化。

2.3 不同溫度貯藏山竹果殼PPO活性的變化

圖3 不同溫度貯藏山竹果殼PPO活性的變化Fig.3 Changes of PPO activity during different temperature storage of mangosteen pericarp at different temperatures

從圖3可知,山竹果殼在貯藏期內(nèi)其多酚氧化酶活性均呈現(xiàn)比較一致的變化,山竹果殼的PPO活性在0~3d內(nèi)迅速下降,而后3~6d內(nèi)又呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。6~9d緩慢下降,其中12d活性稍高,差異不顯著,總體趨勢(shì)下降,經(jīng)差異顯著性檢驗(yàn)分析,第3天后,各處理間差異顯著(P<0.05)。原因可能為酶和底物接觸,又有氧氣存在,就會(huì)發(fā)生木質(zhì)化。伴隨著木質(zhì)化的進(jìn)行,山竹果殼表面變得致密堅(jiān)硬,果殼木質(zhì)層的不斷加厚也使得果實(shí)內(nèi)外環(huán)境被逐漸阻隔開(kāi)來(lái)。導(dǎo)致缺少作為反應(yīng)條件之一的氧氣,PPO活性逐漸下降。其次由于PPO作為植物氧化酶系中得一種內(nèi)源呼吸酶,其活性與新陳代謝密切相關(guān):隨著貯藏時(shí)間推移,山竹代謝速率的下降導(dǎo)致PPO活性隨之降低。以上結(jié)果表明:低溫處理能較有效降低山竹果殼中PPO活性。吳振先等[17]報(bào)道,荔枝PPO活性在果實(shí)貯藏過(guò)程中也呈現(xiàn)出先降低后升高,最后又降低的變化趨勢(shì)。2.4 不同溫度貯藏山竹果殼PAL活性的變化

圖4 不同溫度貯藏山竹果殼PAL活性的變化Fig.4 Changes of PAL activity during storage of mangosteen pericarp at different temperatures

苯丙氨酸解氨酶(PAL)是連接初級(jí)代謝和苯丙烷類(lèi)代謝、催化苯丙烷類(lèi)代謝第一步反應(yīng)的酶,也是木質(zhì)化沉積最重要的酶類(lèi)。從圖4可知,在0~3d內(nèi),常溫處理的PAL活性稍下降,隨后在3~6d內(nèi)上升至峰值,而低溫處理的PAL活性在0~6d急劇上升,可能是低溫冷害誘導(dǎo)PAL活性升高,常溫處理和低溫各組處理的峰值分別為170.40U/(g·h)和180.12U/(g·h),在貯藏后期(6~15d),各組處理的活性均呈現(xiàn)持續(xù)下降的趨勢(shì)。經(jīng)差異顯著性檢驗(yàn)分析,貯藏第3d時(shí)低溫處理和常溫處理的差異性顯著(P<0.05),低溫處理的山竹果殼PAL活性在初期明顯高于常溫處理的山竹果殼,低溫冷害作用加速了木質(zhì)化沉積。鄭永華等[18]研究認(rèn)為低溫誘導(dǎo)枇杷果實(shí)PAL活性上升,低溫條件下果實(shí)PAL活性一直處于較高水平,促進(jìn)果實(shí)木質(zhì)素的合成,導(dǎo)致冷害癥狀的出現(xiàn)。

2.5 不同溫度貯藏山竹果殼CAD活性的變化

肉桂醇脫氫酶(CAD)是植物木質(zhì)素合成途徑中重要的限速酶,也是木質(zhì)素單體合成最后階段的一種酶,從圖5得知,兩種處理的山竹果的CAD活性呈現(xiàn)不同的變化。在0~3d內(nèi),低溫和常溫各組CAD活性都出現(xiàn)上升趨勢(shì),低溫顯著高于常溫,可能是低溫誘導(dǎo)CAD活性。在3~6d內(nèi),低溫活性下降,常溫處理的CAD活性增長(zhǎng)非常迅速,常溫從375U/(g·h)增長(zhǎng)到579.67U/(g·h)、低溫3d達(dá)到峰值為446U/(g·h)。6~15d 低溫處理D的CAD活性變化甚微。9~15d,常溫處理的CAD活性呈緩慢增長(zhǎng)趨勢(shì)。經(jīng)差異顯著性檢驗(yàn)分析,不同的貯藏期,兩種處理的CAD活性均差異顯著(P<0.05)。經(jīng)相關(guān)性分析,山竹果殼的CAD活性與木質(zhì)素含量的相關(guān)系數(shù)為0.397,表明CAD能促進(jìn)山竹果殼木質(zhì)素含量的增加,并在山竹果殼木質(zhì)化進(jìn)程中起到了極其重要的作用。吳錦程等[19]研究得出,枇杷果實(shí)貯藏過(guò)程中溫度對(duì)CAD活性影響較大,12℃條件下貯藏的果肉CAD活性顯著低于4℃貯果的活性水平,低溫誘導(dǎo)了CAD活性的較大增加,從而促進(jìn)4℃條件下果肉木質(zhì)素的生成。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同生理狀態(tài)下不同實(shí)驗(yàn)材料CAD的生理功能有所差別。

圖5 不同溫度貯藏山竹果殼CAD活性的變化Fig.5 Changes of CAD activity during storage of mangosteen pericarp at different temperatures

2.6 不同溫度貯藏山竹果殼POD活性的變化

圖6 不同溫度貯藏山竹果殼POD活性的變化Fig.6 Changes of POD activity during storage of mangosteen pericarp at different temperatures

過(guò)氧化物酶(POD)是木質(zhì)素生物合成中最后一步的關(guān)鍵酶,在H2O2參與下催化木質(zhì)素單體聚合成木質(zhì)素,參與木質(zhì)素在細(xì)胞壁的聚合,提高組織木質(zhì)化程度。如圖6所示,兩種處理的樣品POD活性呈現(xiàn)相似的變化趨勢(shì),貯藏期間的變化為0~6d POD增加,可以認(rèn)為是采后逆境的脅迫所致,誘發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生來(lái)抵御活性氧的傷害。隨著木質(zhì)化進(jìn)程,第6~15天POD活性下降。通過(guò)木質(zhì)素相關(guān)性分析,0~6d,POD活性與組織木質(zhì)素含量呈顯著正相關(guān)。許曉春等[20]發(fā)現(xiàn),荔枝果皮POD活性貯藏初期有一定程度的增加,隨著果皮褐變的開(kāi)始,活性減小, 席玙芳等[21]在相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)POD活性與組織木質(zhì)素含量呈顯著正相關(guān)。

2.7 不同貯藏溫度對(duì)山竹果肉腐爛指數(shù)的變化

圖7 不同貯藏溫度山竹果肉腐爛指數(shù)的變化Fig.7 Changes of decay index during storage of mangosteen pulp at different temperatures

果蔬采后腐爛是一個(gè)全球性的問(wèn)題,在世界范圍內(nèi)約有25%的果蔬產(chǎn)品因腐爛變質(zhì)而不能利用,在山竹果為期15d的貯藏過(guò)程中,山竹果肉的色澤呈現(xiàn)乳白色→白色、黃斑點(diǎn)→大面積的黃色的變化,果肉也不同程度地發(fā)生自溶現(xiàn)象。采后腐爛一個(gè)主要原因是隨呼吸作用增強(qiáng)而造成乙烯濃度過(guò)高。山竹果肉產(chǎn)生自溶現(xiàn)象,果肉產(chǎn)生自溶現(xiàn)象是由于本身降解酶的作用,破壞了果肉表面的防腐膜,使高糖果汁外溢,引起各種微生物的滋生而加劇了整個(gè)果肉的敗解。果肉自溶現(xiàn)象除了與果肉本身降解酶和微生物侵染有關(guān)外,還因?yàn)楣庵泄z含量及存在方式發(fā)生了改變和淀粉酶降解淀粉。由圖7可以看出,不同處理的山竹果腐爛指數(shù)均隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增大,但低溫處理的腐爛指數(shù)低于常溫處理,15d常溫處理的腐爛率增加了78.89%,低溫處理的腐爛率增加了32.22%,可能是低溫處理延緩果殼木質(zhì)化相關(guān)酶活性,減少細(xì)胞代謝物質(zhì)含量的積累,保持較低的呼吸強(qiáng)度,從而可以抑制腐爛,其中以低溫處理效果最佳。

3 結(jié) 論

果蔬組織的木質(zhì)化由一系列相關(guān)酶類(lèi)控制。多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂醇脫氫酶(CAD)和過(guò)氧化物酶(POD)都參與酚類(lèi)物質(zhì)代謝,是木質(zhì)化過(guò)程中的關(guān)鍵酶類(lèi)。PPO通過(guò)參與酚類(lèi)物質(zhì)(如綠原酸、香豆素等)的氧化過(guò)程,而促進(jìn)木質(zhì)素的形成;PAL是木質(zhì)素生物合成中的限速酶,能催化苯丙氨酸轉(zhuǎn)化為肉桂酸;CAD是苯丙烷類(lèi)代謝中催化木質(zhì)素前體香豆醛向香豆醇轉(zhuǎn)化,它是木質(zhì)素代謝途徑中的一個(gè)重要環(huán)節(jié);而POD則在木質(zhì)素生物合成的最后一步中通過(guò)催化H2O2分解而使木質(zhì)素單體發(fā)生聚合反應(yīng)形成木質(zhì)素。本實(shí)驗(yàn)中,隨著貯藏期的延長(zhǎng),山竹果實(shí)的硬度逐漸上升,果實(shí)中PAL、POD、PPO及CAD活性表現(xiàn)為不同時(shí)期的增加趨勢(shì),同時(shí)伴隨著木質(zhì)素含量的增加。在促進(jìn)山竹果殼木質(zhì)化過(guò)程中,CAD起到主導(dǎo)作用,PPO與PAL也能促進(jìn)木質(zhì)素的形成積累,這3種酶與木質(zhì)素含量的相關(guān)性均表現(xiàn)為正相關(guān)。低溫處理雖在貯藏初期有一定的冷害失調(diào),但在整個(gè)貯藏期低溫能顯著抑制木質(zhì)化相關(guān)酶活性的上升,抑制木質(zhì)素含量的增加,因此能較好地保持山竹果實(shí)的新鮮度,延緩出現(xiàn)木質(zhì)化現(xiàn)象和果肉腐爛。

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Effect of Storage Temperature on Enzyme Activities Associated with Peel Lignification and Pulp Decay of Mangosteen

YANG min1,YU Li-mei1,*,LIU Zhao-xia2,CHEN Hai-guang1
(1. College of Light Industry and Food Technology, Zhongkai University of Agriculture and Engineering, Guangzhou 510225, China;2. Guangdong Inspection and Quarantine Technology Center, Guangzhou 510623, China)

Mangosteen harvested from Hainan province was stored at 30 or 4 ℃ to investigate the effect of storage temperature on enzyme activities associated with peel lignification and pulp decay of mangosteen during postharvest storage. Results showed the degree of peel lignifications varied depending on the storage temperature. Chilling injury occurred at the early period of cold storage, leading to increased enzyme activities and lignin content, but lignin content was increased by 14.3% at the later stage of storage at 30 ℃ than storage at 4 ℃. In addition, the activities of PAL, POD, PPO and CAD in mangosteen stored at 30 ℃ were significantly higher than those observed at 4 ℃. The peak PAL activity at 30 ℃ and 4 ℃was 170.40 U/(g?h) and 180.12 U/(g?h), respectively. A continuous decrease in PAL activity was observed at the later stage of storage, regardless of storage temperature. The decay index of mangosteen after 15 days of storage at 30 ℃ was 78.89% compared to 32.22% at 4 ℃. This result may be related to inhibited enzyme activities involved in peel lignifications at low temperature, reduced accumulation of cellular metabolites and low respiration intensity, therefore inhibiting pulp decay.

mangosteen fruit;lignification;enzymes activity;storage temperature

TS255.36

A

1002-6630(2013)18-0307-05

10.7506/spkx1002-6630-201318063

2012-07-03

廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(10451022501005679)

楊敏(1967—),女,副教授,碩士,研究方向?yàn)槭称焚A藏與加工。E-mail:yangmgz-001@163.com

*通信作者,于立梅(1973—),女,副教授,博士,研究方向?yàn)槭称焚A藏與加工。E-mail:biyingwang2003@163.com

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