鮑延娥 董曉芳 佟建明 翟欽輝

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100193;2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院，楊凌 712100)

1932 年，Vondell［1］首次提出了雞蛋的魚腥味問題。雞蛋的魚腥味主要來源于其中殘留的三甲胺(trimethylamine，TMA)［2］。當(dāng) 母雞代 謝 TMA的能力不能滿足機(jī)體的需要時，無法代謝轉(zhuǎn)化的TMA就會逐漸累積并沉積于發(fā)育成蛋黃的卵泡中，導(dǎo)致一種類似魚腥味的氣味從雞蛋中散發(fā)出來，形成魚腥味雞蛋［3］。當(dāng)雞蛋中TMA含量累積到 1.0～1.5 μg/g(蛋黃中 TMA 含量累積到4μg/g)時，人才能通過嗅覺識別到雞蛋的魚腥味［4］。一般魚腥味雞蛋中TMA含量至少是正常雞蛋的 10 倍(1.0 μg/g vs.0.1 μg/g)［2］。魚腥味嚴(yán)重影響雞蛋的品質(zhì)和人們的感官接受能力，本文將主要對魚腥味雞蛋的形成機(jī)制及其影響因素進(jìn)行概述。

1 魚腥味雞蛋的形成機(jī)制

TMA分子式為(CH3)3N，沸點(diǎn)為2.87℃，具有高揮發(fā)性，是一種帶有魚腥味的叔胺。研究發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)生魚腥味雞蛋的蛋雞其卵巢內(nèi)不同大小的卵泡中均含有TMA［5］。正常情況下，母雞通過采食或內(nèi)源性代謝在腸道中產(chǎn)生的TMA，經(jīng)腸道吸收后通過血液循環(huán)運(yùn)送到肝臟和腎臟，在含黃素單氧化酶 3(flavin-containing monooxygenase 3，F(xiàn)MO3)的作用下氧化為無魚腥味的氧化三甲胺(trimetlylamine oxide，TMAO)，通過腎濾過經(jīng)尿排出體外［6］。但某些雞種FMO3基因發(fā)生突變，可導(dǎo)致其氧化TMA的能力下降或消失，機(jī)體內(nèi)未氧化的TMA不易通過腎濾過排出，而在循環(huán)中逐漸累積，大量沉積于卵泡中，導(dǎo)致魚腥味雞蛋的產(chǎn)生［3］?？梢姡~腥味雞蛋的產(chǎn)生與體內(nèi)TMA的代謝密切相關(guān)。TMA在體內(nèi)的代謝主要分為4個過程:1)TMA前體物質(zhì)的攝入。母雞通過采食攝入TMA前體物質(zhì)。膽堿是TMA的前體物質(zhì)，甜菜堿、肉堿、卵磷脂以及菜籽粕中的芥子堿可以在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為膽堿［7-8］。2)TMA的合成。機(jī)體內(nèi)的TMA主要來源于腸道微生物對TMA前體物質(zhì)的降解，少量來自于膽汁、卵磷脂和腸道細(xì)胞碎片的代謝［9］。膽堿能夠通過細(xì)菌脫氨基作用水解產(chǎn)生TMA［5］，但只有當(dāng)飼糧中膽堿的添加量超過了蛋雞腸道的吸收能力時，膽堿才會在十二指腸后端被腸道細(xì)菌利用［10］。甜菜堿、肉堿和卵磷脂可以在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為膽堿［7］，菜籽粕中的芥子堿也能在腸道細(xì)菌的作用下水解為膽堿和芥子酸［8］。另外，細(xì)菌還原酶能將飼糧中的TMAO還原成TMA［11］。3)TMA的利用。經(jīng)腸道吸收的 TMA主要在肝臟中被 FMO3氧化為 TMAO［12］，只有少量的TMA通過逐步脫甲基過程降解為更簡單的胺［9］。FMO3對TMA的氧化反應(yīng)需要經(jīng)過4步來完成，還原型輔酶Ⅱ(NADPH)首先將FMO3的結(jié)合域黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)氧化為還原態(tài)FAD;還原態(tài)FAD與分子氧結(jié)合，形成黃素前氧化中間體(flavin-hydroperoxide，F(xiàn)ADDOOH);FADDOOH再與TMA結(jié)合，分子氧的一個氧原子轉(zhuǎn)移到TMA上，形成TMAO;分子氧的另一個氧原子則形成水，并釋放出還原型輔酶Ⅰ(NADP+)［13］。相關(guān)研究表明，一些細(xì)菌也能降解TMA［14］，且在細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)了能夠氧化 TMA的 FMO3［15］。4)TMA的排泄。TMA可以通過血液輸送到呼吸氣體、汗液、唾液、尿液和腺體分泌物中［16］。對于蛋雞而言，TMA的主要去路是雞蛋和糞。

2 魚腥味雞蛋的影響因素

雞蛋魚腥味是一種代謝性疾病，受遺傳、日齡、氣候、營養(yǎng)及其他因素的影響，其中主要受遺傳(FMO3基因型)和營養(yǎng)因素(飼糧中TMA前體物質(zhì))的共同影響。

2.1 FMO3 基因突變

含黃素單氧化酶(FMO)，又稱微粒體功能胺氧化酶［17］，具有催化氮(N)和硫(S)氧化的功能，能夠氧化多種親核物質(zhì)，降低一些物質(zhì)的毒性和藥理活性［18］。FMO家族由 6種亞型(FMO1～FMO6)組成，其中FMO3是參與TMA代謝唯一的有效酶［12］。FMO3包含1個5＇非編碼外顯子和8個編碼外顯子，主要存在于家禽的肝臟和腎臟中，以肝臟中含量最高［3］。

Dolphin等［19］于1997年首次證實(shí)了FMO3和雞蛋魚腥味相關(guān)聯(lián)。Honkatukia等［3］研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)FMO3外顯子7處即第984 bp處堿基A突變?yōu)門時，引起其編碼的第329個氨基酸由蘇氨酸(T)轉(zhuǎn)變?yōu)榻z氨酸(S)，由5個氨基酸殘基組成的高度保守序列FATGY變?yōu)镕ASGY，導(dǎo)致FMO3不能正常的將TMA氧化為TMAO。相關(guān)研究表明，F(xiàn)ATGY序列可能為FMO3的底物結(jié)合區(qū)，A/T突變導(dǎo)致FMO3與TMA無法有效地結(jié)合，酶與底物的親和力降低，反應(yīng)速度隨之變慢［20-21］。我國除了白萊航蛋雞和東鄉(xiāng)綠殼蛋雞不具有這種基因突變外，其他大部分雞種群體都帶有這種突變基因［22-23］，定性分析表明魚腥味表現(xiàn)型屬于隱性遺傳［24］。魚腥味雞蛋常見于褐殼蛋雞品系中［25］，因褐殼蛋雞基本是由洛島紅與白洛克交配而成，而洛島紅與白洛克都帶有這種突變基因，導(dǎo)致5%～10%的商品蛋雞會產(chǎn)生魚腥味雞蛋［26］。Ward［27］研究報(bào)道，褐殼蛋雞FMO3基因突變的頻率大約為20%?？梢姡現(xiàn)MO3基因突變存在著個體和品系的差異。

根據(jù)T329S突變位點(diǎn)的變化，將FMO3分為3種基因型:AA、AT和TT基因型。研究發(fā)現(xiàn)，在海蘭褐蛋雞品系中，該突變一般都偏離了哈代-溫伯格平衡(Hardy-Weinberg equilibrium)，TT基因型所占比例較低［3，22，28-29］。一般 TT 基因型蛋雞雞蛋中TMA含量最高，AT基因型次之，AA基因型最低，但無顯著差異(P＞0.05)。當(dāng)飼糧中含有高劑量的TMA前體物質(zhì)時，各基因型蛋雞雞蛋中TMA含量才會有顯著差異(P＜0.05)，TT基因型蛋雞較敏感，雞蛋中TMA含量顯著高于AA和 AT 基因型(P ＜0.05)。Honkatukia等［3］檢測了不同基因型蛋雞FMO3 mRNA的表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)各基因型無顯著差異(P＞0.05)。王晶［29］也得到類似結(jié)論，并發(fā)現(xiàn)各基因型蛋雞FMO3活性也有顯著差異(P＜0.05)，AA基因型最高，TT基因型最低。

2.2 日齡和氣候

雞蛋中TMA濃度隨日齡呈現(xiàn)間歇性變化。Ward［27］和 Alison［28］研究均發(fā)現(xiàn)，雞蛋中 TMA 含量每日變化差異大、不穩(wěn)定，魚腥味的產(chǎn)生具有間歇性，認(rèn)為這種間歇性可能與蛋黃的形成有關(guān)。王晶［29］報(bào)道，AT和 TT基因型蛋雞蛋黃中 TMA含量隨日齡的增加呈間歇性上升。而早期研究表明，雞蛋中TMA含量隨蛋雞日齡的增加呈現(xiàn)降低的 趨 勢［5，25，30-32］。Danicke 等［31］給 雞 飼 喂 添 加4 000 mg/kg膽堿的試驗(yàn)飼糧時，72周齡蛋雞雞蛋中TMA含量比47周齡蛋雞顯著降低(P＜0.05)。Overfield 等［25］給雞飼喂添加 9% 菜籽粕的試驗(yàn)飼糧3周后，魚腥味雞蛋的發(fā)生率從20%降低到11%，認(rèn)為這是蛋雞適應(yīng)試驗(yàn)飼糧的結(jié)果。March等［5］認(rèn)為這不僅與蛋雞對試驗(yàn)飼糧的適應(yīng)性有關(guān)，還可能與小腸和盲腸中的細(xì)菌菌群有關(guān)。此外，Miller等［30］研究發(fā)現(xiàn)，隨著蛋雞日齡的增加，雞蛋中TMA的含量逐漸下降，并且秋季和冬季產(chǎn)生魚腥味雞蛋的幾率要高于春季。

2.3 營養(yǎng)因素

影響雞蛋魚腥味的營養(yǎng)因素主要是飼糧中TMA前體物質(zhì)和FMO3抑制劑。

2.3.1 飼糧中TMA前體物質(zhì)

TMA前體物質(zhì)主要包括膽堿、甜菜堿、肉堿、卵磷脂、菜籽粕、芥子堿和TMAO等。魚腥味雞蛋的產(chǎn)生與飼糧中TMA前體物質(zhì)的添加水平密切相關(guān)。Alison［28］研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中雙低菜籽粕的添加量低于4%時，蛋雞不會產(chǎn)生魚腥味雞蛋。而Overfield等［25］在飼糧中添加3%的菜籽粕，蛋雞在5 d內(nèi)便會產(chǎn)生魚腥味雞蛋;從飼糧中去掉菜籽粕后，蛋雞則不再產(chǎn)生魚腥味雞蛋。Ward等［24］研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加0、6%、12%、18%和24%的菜籽粕，TT基因型蛋雞蛋黃中TMA含量與飼糧中菜籽粕水平(12% ～24%)呈線性相關(guān);與菜籽粕相比，飼糧中添加等量(550～2 200 mg/kg)的膽堿不會導(dǎo)致魚腥味雞蛋的產(chǎn)生。王晶［29］指出，高劑量(2 960 mg/kg)膽堿會顯著增加蛋黃中的TMA含量(P＜0.05)，試驗(yàn)第21天和第42天2 960 mg/kg膽堿組蛋黃中TMA含量分別為370 mg/kg膽堿組的2.86和3.07倍，并發(fā)現(xiàn)添加2 960 mg/kg膽堿時，各基因型蛋雞FMO3 mRNA表達(dá)量顯著下降(P＜0.05)，TT基因型甚至降低了54.29%，F(xiàn)MO3活性平均降低了33.99%，說明膽堿不僅能夠產(chǎn)生TMA，還能通過抑制FMO3基因的表達(dá)及其活性來參與TMA的代謝。Danicke等［31］在飼糧中分別添加0、500、1 000 和4 000 mg/kg的膽堿，添加量低于1 000 mg/kg時，蛋黃中TMA含量隨膽堿添加量的增加而呈現(xiàn)緩慢上升的趨勢;當(dāng)添加量達(dá)到4 000 mg/kg時，蛋黃中TMA含量顯著升高(P ＜0.05)。Kretzschmar等［32］給羅曼褐殼蛋雞飼喂含4 000 mg/kg膽堿的飼糧，TT基因型蛋雞蛋黃中TMA含量顯著升高(P＜0.05)，AT基因型有所上升，但2個基因型間差異不顯著(P ＞0.05)。Honkatukia等［3］指出，在 6 000 mg/kg膽堿處理下，AT和TT基因型蛋雞蛋黃中三甲胺 -氮(TMA-N)含量較高，為 5.6 ～23.4 μg/g，相當(dāng)于蛋黃中TMA含量為23.6～98.7μg/g。因此，實(shí)際生產(chǎn)中，低劑量添加膽堿不會導(dǎo)致魚腥味雞蛋的產(chǎn)生，但高劑量膽堿的添加則會增加雞蛋中TMA含量，使其帶有魚腥味。魚粉中含有不同水平的 TMA以及 TMAO。Pearson等［33］研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加含100 mg/kg TMAO的魚粉，6 d內(nèi)便可檢測到魚腥味雞蛋。Fenwick等［34］在飼糧中添加含500 mg/kg TMAO的魚粉，雞蛋中TMA含量上升1.10 μg/g。Lowis等［35］研究表明，飼糧中添加肉堿和卵磷脂均顯著增加大鼠盲腸中TMA含量(P ＜0.05)。然而，Zhang 等［36］研究發(fā)現(xiàn)，與膽堿和TMAO相比，等量的甜菜堿、肉堿和卵磷脂不會顯著增加人尿中TMA含量(P＞0.05)。

2.3.2 飼糧中FMO3抑制劑

飼糧中除了含有TMA的一些前體物質(zhì)，還有一些能夠抑制FMO3活性的成分。菜籽粕中含有多種FMO3抑制劑，如致甲狀腺腫素可以降低FMO3活性，5-乙烯基 -2-惡唑啉硫酮能與TMA競爭FMO3活性中心，單寧則以非競爭性機(jī)制抑制FMO3活性，但不同種類的單寧是否具有不同的抑制機(jī)制目前尚不清楚［37-39］。另外，Mc-Gee［40］研究表明，菜籽粕中硫代葡萄糖酸鹽對FMO3活性的抑制作用與雞蛋魚腥味的形成相關(guān)。然而，Kretzschmar等［32］指出硫代葡萄糖酸鹽不是FMO3的抑制劑，影響雞蛋中TMA-N含量的并不是硫代葡萄糖酸鹽，而是芥子堿，但在飼糧中大量添加芥子堿并沒有發(fā)現(xiàn)其對FMO3有強(qiáng)烈的抑制作用。而另有相關(guān)研究表明，芥子堿對FMO3有一定的抑制作用［41-42］。

2.4 腸道微生物

March等［5］試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，各基因型蛋雞小腸和盲腸中均含有TMA，并且盲腸中TMA含量要高于小腸;飼糧中添加膽堿，盲腸中TMA含量增加明顯，小腸中則變化較小。Danicke等［31］指出，當(dāng)膽堿添加量達(dá)到4 000 mg/kg時，蛋黃和盲腸食糜中TMA含量均顯著升高(P＜0.05)，二者呈現(xiàn)線性相關(guān)。王晶［29］研究發(fā)現(xiàn)，2 960 mg/kg膽堿組蛋雞蛋黃和盲腸中TMA含量均顯著高于370 mg/kg膽堿組(P＜0.05)，蛋黃中 TMA含量與盲腸中TMA含量呈顯著正相關(guān)(P＜0.05)。Pearson等［43］在飼糧中添加10%的菜籽粕，對照組蛋黃中TMA含量為5.20μg/g，而試驗(yàn)組(切除盲腸)蛋黃中TMA含量僅為0.06μg/g。試驗(yàn)組和對照組蛋雞分別注射TMA(14C)，試驗(yàn)組蛋雞每天吸收的TMA為6 mg/kg BW，而對照組為13 mg/kg BW。試驗(yàn)組與對照組血漿中TMA含量分別為 212、443 ng/mL，半衰期分別為 63、97 min。而且，飼糧中沒有TMA前體物質(zhì)時也有魚腥味雞蛋的產(chǎn)生，進(jìn)一步說明盲腸微生物在發(fā)酵食糜產(chǎn)生TMA的過程中起到重要作用。Zentek等［44］對TMA的產(chǎn)生也有類似的結(jié)論，并發(fā)現(xiàn)蛋雞經(jīng)口攝入廣譜抗生素后，腸道微生物代謝活性和雞蛋中TMA含量均顯著降低(P＜0.05)。隨后的研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加新霉素或四環(huán)素可以降低雞蛋魚腥味，推測革蘭氏陽性菌在TMA的形成過程中起到重要作用，TMA的形成與腸道特殊的微生物菌群相關(guān)，但具體的菌種目前還無法確 定［4］。 然 而，Kretzschmar 等［32］用 低 膽 堿(500 mg/kg)飼糧替代高膽堿(4 000 mg/kg)飼糧飼喂蛋雞4周，雞蛋中TMA含量顯著下降(P＜0.05)，認(rèn)為雞蛋中 TMA含量的上升與飼糧中TMA前體物質(zhì)有關(guān)，而與蛋雞腸道微生物菌群無關(guān)。

2.5 其他影響因素

芳香烴受體激動劑、共軛亞油酸、炎性細(xì)胞因子等因素可以通過影響FMO3 mRNA的表達(dá)來影響TMA的代謝。早期研究表明，一些芳香烴受體激動劑如 2，3，7，8- 四氯二苯并 -p-二(TCDD)［45］、3- 甲 基 膽 蒽 (3MC)和 苯 并 芘(BaP)［46］能夠促進(jìn) FMO3 mRNA 的表達(dá)，而 c-9，t-11和t-10，c-12共軛亞油酸則會抑制其表達(dá)［47］;炎性細(xì)胞因子能夠降低肝臟FMO3活性，但抗壞血酸鹽和二硫蘇糖醇(DTT)可以恢復(fù)其活性［48］。此外，Borbas等［49］在鏈脲霉素(STZ)誘導(dǎo)小鼠糖尿病的研究中發(fā)現(xiàn)，胰島素能夠抑制肝臟FMO3 mRNA的表達(dá)，降低FMO3活性，且血糖水平與FMO3 mRNA表達(dá)水平呈極顯著相關(guān)(P＜0.01)，推測在胰島素缺乏狀態(tài)下，血糖水平可能是機(jī)體調(diào)節(jié)FMO3 mRNA表達(dá)的信號分子。

3 小結(jié)

我國目前蛋雞養(yǎng)殖規(guī)模處于世界第一［22］，其中褐殼蛋雞的比例很高。當(dāng)飼糧中添加菜籽油、菜籽粕、魚粉或高劑量膽堿時，極易誘發(fā)褐殼蛋雞產(chǎn)生魚腥味雞蛋。2004年，德國羅曼公司將FMO3 T239S突變位點(diǎn)用于魚腥味雞蛋的選擇，并于2006年將該突變基因從父母代雞中剔除。但該基因的剔除對蛋雞有無影響尚無報(bào)道，F(xiàn)MO3作用于TMA的具體機(jī)制以及TMA前體物質(zhì)在蛋雞體內(nèi)的代謝如何影響其mRNA表達(dá)還不明確，對此仍需展開深入研究。目前，關(guān)于魚腥味雞蛋的研究多集中于FMO3基因型、TMA前體物質(zhì)及其相互作用對雞蛋中TMA含量的影響，但盲腸微生物是否影響TMA的形成及其機(jī)制以及隨著蛋雞日齡的增加雞蛋中TMA含量下降的機(jī)制尚沒有統(tǒng)一的觀點(diǎn)，有待于進(jìn)一步研究。

［1］ VONDELL J H.Is the production of“off-flavor”eggs an individual characteristic?［J］.Poultry Science，1932，11:375.

［2］ HOBSON-FROHOCK A，LAND D G，GRIFFITHS N M，et al.Egg taints:association with trimethylamine［J］.Nature，1973，243:304-305.

［3］ HONKATUKIA M，REESE K，PREISINGER R，et al.Fishy taint in chicken eggs is associated with a substitution within a conserved motif of the FMO3 gene［J］.Genomics，2005，86(2):225-232.

［4］ ZENTEK J.Egg taint—a problem of practical importance［J］.Lohmann Information，2002，28:3-6.

［5］ MARCH B E，MACMILLAN C.Trimethylamine production in the caeca and small intestine as a cause of fishy taints in eggs［J］.Poultry Science，1979，58:93-98.

［6］ PEARSON A W，BUTLER E J，CURTIS R F，et al.Rapeseed meal and egg taint:demonstration of the metabolic defect in male and female chicks［J］.The Veterinary Record，1979，104(14):318-319.

［7］ ZEISEL S H.Choline:critical role during fetal development and dietary requirements in adults［J］.Annual Review of Nutrition，2006，26:229-250.

［8］ QIAO H，CLASSEN H L.Nutritional and physiological effects of rapeseed meal sinapine in broiler chickens and its metabolism in the digestive tract［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2003，83:1430-1438.

［9］ SMITH J L，WISHNOK J S，DEEN W M.Metabolism and excretion of methyamines in rats［J］.Toxicology and Applied Pharmacology，1994，125:296-308.

［10］ ZEISEL S H，DACOSTA K A，YOUSSEF M，et al.Conversion of dietary choline to trimethylamine and dimethylamine in rats:dose-response relationship［J］.The Journal of Nutrition，1989，119(5):800-804.

［11］ BARRETT E L，KWAN H S.Bacterial reduction of trimethylamine oxide［J］.Annual Review of Microbiology，1985，39:131-149.

［12］ LANG D H，YEUNG C K，PETER R M，et al.Isoform specificity of trimethylamine N-oxygenation by human flavin-containing monooxygenase(FMO)and P450 enzymes:selective catalysis by FMO3［J］.Biochemical Pharmacology，1998，56(8):1005-1012.

［13］ SCHLAICH N L.Flavin-containing monooxygenases in plants:looking beyond detox［J］.Trends in Plant Science，2007，12(9):412-418.

［14］ 殷峻，陳英旭，劉和，等.三甲胺降解細(xì)菌的分離、降解特性及其系統(tǒng)發(fā)育分析［J］.環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2004，24(5):883-889.

［15］ CHEN Y，PATEL N A，CROMBIE A，et al.Bacterial flavin-containing monooxygenase is trimethylamine monooxygenase［J］.Proceedings of the National A-cademy of Sciences of the United States of America，2011，108(43):17791-17796.

［16］ AYESH R，MITCHELL SC，ZHANG A Q，et al.The fish odour syndrome:biochemical，familial and clinical aspects［J］.British Medical Journal，1993，307:655-657.

［17］ ZIEGLER D M，MITCHELL C H.Microsomal oxidaseⅣ:properties of a mixed-function amine oxidase isolated from pig liver microsomes［J］.Archives of Biochemistry and Biophysics，1972，150(1):116-125.

［18］ ZIEGLER D M，POULSEN L L.Hepatic microsomal mixed-function amine oxidase［J］.Methods in Enzymology，1978，52:142-151.

［19］ DOLPHIN C T，JANMOHAMED A，SMITH R L，et al.Missense mutation in flavin-containing mono-oxygenase 3 gene，F(xiàn)MO3，underlies fish-odour syndrome［J］.Nature Genetics，1997，17(4):491-494.

［20］ STEHR M，DIEKMANN H，SMAU L，et al.A hydrophobic sequence motifcommon to N-hydroxylating enzymes［J］.Trends in Biochemical Science，1998，23(2):56-57.

［21］ AMBROSI C，LEONI L，PUTIGNANI L，et al.Pseudobactin biogenesis in the plant growth-promoting rhizobacterium Pseudomonas strain B10:identification and functional analysis of the L-ornithine N(5)-oxygenase(psbA)gene［J］.Journal of Bacteriology，2000，82(21):6233-6228.

［22］ 張龍超，徐桂云，鄭江霞，等.雞蛋魚腥味敏感等位基因在幾個雞種中的分布研究［C］.楊寧.中國家禽業(yè)——機(jī)遇與挑戰(zhàn):第十三次全國家禽學(xué)術(shù)討論會論文集.北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社，2007:293-296.

［23］ 王曉亮.遺傳與環(huán)境因素對雞蛋品質(zhì)性狀的影響及相關(guān)候選基因的研究［D］.碩士學(xué)位論文.北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

［24］ WARD A K，CLASSEN H L，BUCHANAN F C.Fishy-egg tainting is recessively inherited when brown-shelled layers are fed canola meal［J］.Poultry Science，2009，88(4):714-721.

［25］ OVERFIELD N D，ELSON H A.Dietary rapeseed meal and the incidence of tainted eggs［J］.British Poultry Science，1975，16(2):213-217.

［26］ 林青芳.德國羅曼以先進(jìn)的基因定域及基因檢測技術(shù)全球首家解決褐殼/粉殼雞蛋的魚腥味問題［J］.家禽科學(xué)，2007(2):48.

［27］ WARD A K.Genetic and dietary interactions of fishyegg taint in brown-shelled laying hens［D］.Master’s Thesis.Saskatoon:University of Saskathewan，2008.

［28］ ALISON K W.Genetic and dietary interactions of fishy-egg taint in brown-shelled laying hens［D］.Master’s Thesis.Saskatoon:University of Saskathewan，2008.

［29］ 王晶.FMO3基因型和膽堿對雞蛋三甲胺含量影響的研究［D］.博士學(xué)位論文.哈爾濱.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

［30］ MILLER W S，EWINS A，CHUBB L G.Egg taints［J］.Veterinary Record，1972，91(25):632-633.

［31］ DANICKE S，UEBERSCHAR K H，REESE K，et al.Investigations on the effects of rape oil quality，choline and methionine concentration in diets for laying hens on the trimethylamine content of the eggs，on trimethylamine metabolism and on laying performance［J］.Archives of Animal Nutrition，2006，60(1):57-79.

［32］ KRETZSCHMAR K，DANICKE S，SCHMUTZ M，et al.Interactions of flavin containing monooxygenase 3(FMO3)genotype and feeding of choline and rapeseed cake on the trimethylamine(TMA)content in egg yolks of laying hens［J］.Archives of Animal Nutrition，2009，63(3):173-187.

［33］ PEARSON A W，GREENWOOD N M，BUTLER E J.The involvement of trimethylamine oxide in fish meal in the production of egg taint［J］.Animal Feed Science and Technology，1983，8:119-127.

［34］ FENWICK G R，CURL C L，PEARSON A W，et al.Production of egg taint by fish meal［J］.Veterinary Record，1981，109(13):292.

［35］ LOWIS S，EASTWOOD M A，BRYDON W G.The influence of creatinine，lecithin and choline feeding on aliphatic amine production and excretion in the rat［J］.British Journal of Nutrition，1985，54(1):43-51.

［36］ ZHANG A Q，MITCHELL S C，SMITH R L.Dietary precursors of trimethylamine in man:a pilot study［J］.Food and Chemical Toxicology，1999，37(5):515-520.

［37］ FENWICK G R，PEARSON A W，GREENWOOD N M，et al.Rapeseed meal tannins and egg taint［J］.Animal Feed Science and Technology，1981，6:421-431.

［38］ GOH Y K，ROBBLEE A R，CLANDININ D R.Influence of glucosinolates and free oxazolidinethione in a laying diet containing a constant amount of sinapine on the thyroid size and hepatic trimethylamine oxidase activity of brown-egg layers［J］.Canadian Journal of Animal Science，1985，65:921-927.

［39］ FULLER H L，CHANG SI，POTTER D K.Detoxication of dietary tannic acid by chicks［J］.The Journal of Nutrition，1967，91(4):477-481.

［40］ MCGEE M.Rapeseed meal as a feed ingredient［J/OL］.Livestock Feed Ingredients，1998(6).http://www.rhhall.ie/print/issue6_1998.html.

［41］ HOBSON-FROHOCK A，F(xiàn)ENWICK G R，HEANEY R K，et al.Rapeseed meal and egg taint:association with sinapine［J］.British Poultry Science，1977，18:539-541.

［42］ GOH Y K，CLANDININ D R，ROBBLEE A R，et al.The effect of sinapine in a laying ration on the incidence of fishy odor in eggs from brown-shelled egg layers［J］.Canadian Journal of Animal Science，1979，59:313-316.

［43］ PEARSON A W，GREENWOOD N M，BUTLER E J，et al.Rapeseed meal and egg taint:effects of B.campestris meals，progoitrin and potassium thiocyanate on trimethylamine oxidation［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，1983，34(9):965-972.

［44］ ZENTEK J，KAMPHUES J.Geruchsabweichungen bei eiern brauner hennen—vorkommen auch bei“unkritischer”futterzusammensetzung moglich［J］.Dtsch Tier?rztl Wochenschr，2000，107:355-358.

［45］ CELIUS T，ROBLIN S，HARPER P A，et al.Aryl hydrocarbon receptor-dependent induction of flavin-containing monooxygenase mRNAs in mouse liver［J］.Drug Metabolism and Disposition，2008，36(12):2499-2505.

［46］ CELIUS T，PANSOY A，MATTHEWS J.Flavin-containing monooxygenase-3:induction by 3-methylcholanthrene and complex regulation by xenobiotic chemicals in hepatoma cells and mouse liver［J］.Toxicology and Applied Pharmacology，2010，247:60-69.

［47］ RASOOLY R，KELLEY D S，GREG J，et al.Dietary trans 10，cis 12-conjugated linoleic acid reduces the expression of fatty acid oxidation and drug detoxification enzymes in mouse liver［J］.British Journal of Nutrition，2007，97(1):58-66.

［48］ RYU S D，YI H G，CHA Y N，et al.Flavin-containing monooxygenase activity can be inhibited by nitric oxide-mediated S-nitrosylation［J］.Life Science，2004，75(21):2559-2572.

［49］ BORBAS T.Insulin as a regulator of flavin-containing monooxygenase enzyme in streptozotocin-induced diabetic rats［D］.Ph.D.Thesis.Budapest:Semmelweis University，2008.