胡瑩瑩，王 琦，陳 瑛

(哈爾濱師范大學(xué))

0 引言

1962年，Cohen.S用羧甲基纖維素從雄性小鼠頜下腺腺管分離出純化神經(jīng)生長因子(NGF)后發(fā)現(xiàn)另一類物質(zhì)可使新生小鼠眼瞼早開、牙齒早萌、體重減輕和毛發(fā)生長延遲，他提純了這種由53個氨基酸構(gòu)成的單鏈多肽稱之為表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)［1-3］.

1979年，Carpenter等人報道了人表皮生長因子(hEGF)的氨基酸殘基組成［4］.同年，Gregory從人尿中發(fā)現(xiàn)了能夠抑制胃酸分泌的抑胃素，稱之為尿抑胃素(Urogastrone，UG)，并發(fā)現(xiàn)EGF與UG的化學(xué)結(jié)構(gòu)與生物活性極為相似，于是人們把EGF和UG這兩種多肽看成同一物質(zhì)，一般稱之為上皮生長因子—尿抑胃素(EGF—UG)［5］.隨后，在大白鼠、豬等生物體中均發(fā)現(xiàn)了表皮生長因子mEGF和pEGF.

這之后關(guān)于EGF的生物學(xué)功能開展了大量研究.經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)EGF具有促進(jìn)細(xì)胞分裂、與某些癌性病變密不可分，除此之外，對呼吸系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)也有很重要的作用.尤其是EGF可以促進(jìn)上皮細(xì)胞分裂增殖，Imanish J，Kamiyama K Iguchi等人在2000年發(fā)現(xiàn)應(yīng)用EGF可以明顯增加創(chuàng)面的內(nèi)膠原和細(xì)胞DNA含量，加速創(chuàng)面愈合.隨后EGF不論在臨床應(yīng)用還是美容領(lǐng)域都得到廣泛應(yīng)用.

近年來，對 EGF及其受體(EGF receptor，EGFR)的研究成為生物化學(xué)研究的熱點之一，對于其作用機(jī)制、影響因子和如何提高其生物學(xué)功能進(jìn)行了廣泛的研究.

1 表皮生長因子家族、分子結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)效應(yīng)

1.1 表皮生長因子家族

在發(fā)現(xiàn)EGF后的40多年時間里，又先后發(fā)現(xiàn)了一些與EGF密切相關(guān)的生長因子，大小都在50～80個氨基酸之間，被稱為EGF家族.包括1976年Todaro和Delareo在肉瘤病毒轉(zhuǎn)化的3T3成纖維細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)中發(fā)現(xiàn)一種具有EGF活性的生長因子，命名為轉(zhuǎn)化生長因子 α［6］(transforming growth factor α，TGF α)、之后又發(fā)現(xiàn)了牛痘病毒生長因子［7］(vaccinia growth factor，VGF)、休普氏纖維瘤生長因子［8］(shope fibroma growth factor，MGF)、粘液瘤生長因子［9］(myxoma growthfactor，MGF)、兩性調(diào)節(jié)蛋白［10］(ampiregulin)、雙向調(diào)節(jié)素(arnphireguli，AR)、betacellulin(BTC)、epiregulin(EPl)、結(jié)合肝素的EGF樣生長因子(heparin-bingingEGF-likeg-rowth factor，HB-EGF)、痘苗病毒生長因子(vaccinia virus growth factor，VVGF)等.

1.2 表皮生長因子的分子結(jié)構(gòu)特點

EGF是最早確立結(jié)構(gòu)的生長因子.1986年Bell等人通過基因克隆及重組分析，闡明了EGF的基因位點及其編碼序列，小鼠和人的EGF基因均為單拷貝基因.編碼小鼠和人EGF的基因分別位于第3號和第4號染色體的長臂上［11］.hEGF以hEGF-β和 hEGF-γ兩種形式存在，hEGF-β和hEGF-γ兩者有98%的同源性和相似的分子結(jié)構(gòu)，而且它們作用于同一個受體，并產(chǎn)生相同的生物學(xué)效應(yīng).

EGF的mRNA序列由4871bp組成，編碼一個1217個氨基酸殘基的大分子蛋白前體，有一個長3621bp的開放閱讀框，編碼1207個氨基酸殘基.EGF前體有兩個類似疏水袋的序列，一個位于前體的N末端，作為生物合成時的信號肽，在轉(zhuǎn)錄后很快被除去;另一個在前體的C端附近的成熟EGF序列之后，由于這一疏水序列后又跟有一個含大量堿性氨基酸的短序列，因而這段序列可能是固定在膜上的跨膜蛋白，類似于一個跨膜受體，被廣泛的認(rèn)為EGF就是在膜表面通過蛋白酶水解后由前體加工而來.hEGF前體除具有產(chǎn)生成熟hEGF外，其可能本身也具有生物活性，如hEGF分子的C結(jié)構(gòu)域可能與受體結(jié)合來刺激細(xì)胞增殖，也有人推測它可能作為一種膜蛋白，在離子轉(zhuǎn)運(yùn)及細(xì)胞識別中起識別作用［12］.

EGF家族的成員在一級結(jié)構(gòu)上相差甚大，有30%的同源性，但在空間結(jié)構(gòu)上具有一定的保守性［13］，EGF家族內(nèi)存在著11個保守的氨基酸殘基，其中完全保守的6個半胱氨酸殘基，在分子內(nèi)部形成3對二硫鍵，使得這些分子具有相似的空間構(gòu)象，因而都能夠與EGF受體結(jié)合，并且在生物學(xué)的功能上也表現(xiàn)出一定的相似性［14］，因此把它們歸為一個家族，稱為EGF家族.EGF家族的結(jié)構(gòu)特征可以從兩方面來認(rèn)識:一是它的一級結(jié)構(gòu)，從中人們發(fā)現(xiàn)了多種吸引廣大學(xué)者的序列;二是它的空間結(jié)構(gòu)，借助高分辨率的核磁共振(NMR)分析技術(shù)［15］已對EGF的空間構(gòu)象有了更深刻的了解和認(rèn)識.

成熟的hEGF是具有53個氨基酸殘基的不可透析的單鏈多肽，等電點(PI)為4.6，分子量為6045Da，對熱穩(wěn)定，含 3 個鏈內(nèi)二硫鍵［16］，從而在6～20、14～3l和33～42之間分別形成三個環(huán)，這些環(huán)狀結(jié)構(gòu)使EGF對蛋白酶具有較高的穩(wěn)定性，活性中心位于48～53個氨基酸殘基之間，該二硫鍵對EGF生物學(xué)活性的發(fā)揮起重要作用［17］.

成熟的小鼠表皮生長因子(mEGF)是一種水溶性、低分子量、對酸對熱穩(wěn)定、不可透析的單鏈多肽，由53個氨基酸組成，不含丙氨酸、苯丙氨酸和賴氨酸，含有3個鏈內(nèi)二硫鍵，分子量約為6040Da，等電點為4.6，消光系數(shù)(280nm)為30.9，沉淀常數(shù) 1.25s［18］.早期圓二色譜分析表明，mEGF的二級結(jié)構(gòu)是致密的球狀結(jié)構(gòu)，其中約25%為β-片層結(jié)構(gòu)，75%為無規(guī)則的螺旋卷曲，無α-螺旋.后經(jīng)核磁共振(NMR)研究證實其肽骨架中僅存在反平行的 β-片層［19-20］.mEGF在鹽酸胍中的伸展動力學(xué)研究表明，mEGF是已知的最穩(wěn)定的蛋白之一.

EGF對熱穩(wěn)定，在-20℃中能保持長期穩(wěn)定;在中性溶液中100℃煮沸30 min仍保持穩(wěn)定，但在100℃的0.1NNaOH或0.2NHCI中失活.耐胰蛋白酶、糜蛋白酶和胃蛋白酶的消化.EGF分子中不含丙氨酸、苯丙氨酸和賴氨酸.第53位精氨酸和第52位亮氨酸常被蛋白酶去除，因此EGF氨基端40多個氨基酸即具有該因子的全部活性［21］.EGF分子的空間結(jié)構(gòu)可分為相對獨(dú)立的N段和C段，這兩部分較為剛性，分別由兩對和一對相對柔性的二硫鍵相連，因此兩部分的空間位置相對可變，整個分子較為柔性.

1.3 表皮生長因子的生物學(xué)效應(yīng)

EGF對表皮、間皮、內(nèi)皮細(xì)胞在體內(nèi)外都起作用，還影響組織器官的生長和分化.人們首次發(fā)現(xiàn)的EGF作用是能使乳鼠眼瞼早開6～7 d，牙齒早萌5～6 d，并伴有牙齒體積減小現(xiàn)象.此外，EGF還可促進(jìn)心包膜、腎被膜、膽管和肺的發(fā)育.

(1)促進(jìn)上皮細(xì)胞分裂增殖

EGF具有促進(jìn)細(xì)胞的增殖和上皮再生的功能，可以促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂以及糖、蛋白質(zhì)、DNA、RNA合成，在臨床上與很多疾病，如免疫性皮膚病、創(chuàng)面組織修復(fù)及牙周炎等的治療密切相關(guān)［22］，而在毛發(fā)囊泡細(xì)胞、鱗癌細(xì)胞中EGF卻有抗增殖效應(yīng);EGF可以明顯的增加創(chuàng)面的內(nèi)膠原和細(xì)胞DNA含量，具有促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用，如促進(jìn)外傷、手術(shù)、燒燙傷及各種激光損傷等引起的皮膚創(chuàng)傷愈合中有明顯的效果［23］;促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞的增殖，用來治療角膜損傷.EGF強(qiáng)烈的表達(dá)于角膜上皮的深層細(xì)胞和角膜緣上皮細(xì)胞、部分結(jié)膜上皮細(xì)胞和結(jié)膜下結(jié)締組織內(nèi)成纖維細(xì)胞等眼表層組織.以自分泌或(和)旁分泌的方式與EGFR相結(jié)合，促進(jìn)角膜損傷修復(fù)［24］;EGF是組織修復(fù)和細(xì)胞保護(hù)作用的內(nèi)源性物質(zhì)，在人類胃腸道、十二指腸粘膜潰瘍愈合過程中起著十分重要作用［25］，在治療腫瘤方面，最近國外用大量hEGF與毒素結(jié)合治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤、乳腺瘤、皮膚瘤，已取得一定療效［26］.同時臨床上還可以應(yīng)用EGFR單克隆抗體拮抗EGF對人牙齦上皮細(xì)胞的促增殖作用，為防止牙周炎提出了新的思路及其理論依據(jù).

EGF促進(jìn)組織修復(fù)的功能越來越受人們的重視，已被用于角膜、胃、腸道、肝臟、骨骼、神經(jīng)等多種組織創(chuàng)傷的研究［27］.其研究和技術(shù)的進(jìn)展即將在臨床上廣泛應(yīng)用.

(2)EGF與某些癌性病變密不可分

研究表明EGF與腫瘤有三方面的關(guān)系:①某些腫瘤細(xì)胞可以自分泌EGF［28］直接作用于胞膜上EGF受體，加速其無抑制地異常增殖.②EGF受體的氨基酸排列和組成，與某些癌基因的產(chǎn)物具有高度的同源性，如EGF受體與病毒致癌基因src家族的產(chǎn)物有同源性，因此EGF受體不依賴EGF也能被激活，這種受體的持續(xù)激活可導(dǎo)致細(xì)胞不斷生長，這可能是導(dǎo)致細(xì)胞惡變的原因之一.③多種腫瘤細(xì)胞的EGF受體有過度表達(dá)現(xiàn)象，如鱗癌、多形性腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤、喉乳頭狀瘤等.

(3)EGF調(diào)節(jié)內(nèi)分泌腺

EGF與多種內(nèi)分泌腺之間有密切的相互調(diào)節(jié)的關(guān)系，可直接或間接影響多種內(nèi)分泌腺的分泌.EGF 可以促進(jìn) GnRH、CRF、GH、ACTH、LH、hCG、hCS、PRL、皮質(zhì)醇等的分泌，抑制翠酮、雌二醇、甲狀腺素等的分泌.另外，EGF可刺激人骨肉瘤細(xì)胞分泌甲狀旁腺激素樣肽(PTH-like peptide)，并刺激成骨細(xì)胞合成前列腺素 E2(PGE2)，促進(jìn)胃泌素、膽囊收縮素、促胰酶素等胃腸道激素的分泌，并參與消化機(jī)能的調(diào)節(jié).

(4)對呼吸系統(tǒng)的作用

EGF可經(jīng)自分泌或旁分泌方式對氣道上皮細(xì)胞的功能進(jìn)行調(diào)控.作為一種肺內(nèi)調(diào)節(jié)肽，具有抗氧化保護(hù)作用.它可以上調(diào)γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的表達(dá)、加速外源性谷胱甘肽(GSH)向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)和促進(jìn)GSH合成、提高細(xì)胞的抗氧化能力及清除活性氧等.EGF還可通過細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來調(diào)控原癌基因bcl-2的轉(zhuǎn)導(dǎo)水平.此外，EGF對肺泡Ⅱ型細(xì)胞增生有明顯的調(diào)控作用，如加速肺泡Ⅱ型細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能分化，從而合成表面活性物質(zhì)，促進(jìn)胎肺成熟，進(jìn)而參與肺損傷修復(fù)過程［29］.

(5)EGF在糖尿病及糖尿病腎病(DN)的發(fā)生發(fā)展中起重要作用

其檢測對DN的早期診斷、病情分析及臨床治療有一定的理論價值.對EGF與糖尿病性腺軸的損傷關(guān)系的研究表明，胰島素的作用部分由EGF調(diào)節(jié);胰島素或睪酮不足可導(dǎo)致EGF缺乏，而EGF缺乏可能是直接引起生精障礙的重要原因.

(6)EGF對生殖系統(tǒng)的主要作用

①影響睪丸發(fā)育和精子發(fā)生.②調(diào)節(jié)卵巢的發(fā)育與生殖功能.刺激卵母細(xì)胞發(fā)育、抑制人絨毛膜促性腺激素誘發(fā)的排卵效應(yīng)、刺激顆粒細(xì)胞增殖、影響顆粒細(xì)胞的甾體激素分泌與肽類因子的分泌.③促進(jìn)合子發(fā)育.④ 作為胚胎營養(yǎng)因子調(diào)節(jié)早期胚胎發(fā)育.既可通過EGFR提高早期胚胎卵裂率和囊胚發(fā)育率;又可活化Na/KaATP酶，加快囊胚腔內(nèi)液體的積聚，促進(jìn)囊胚腔的形成與擴(kuò)展;還可間接地使肌動蛋白發(fā)生磷酸化，引起細(xì)胞粘著性以及胚胎卵裂球的分化發(fā)生改變.⑤通過激活胚泡和調(diào)節(jié)子宮接受性等途徑啟動胚泡植入.

(7)EGF作為具有神經(jīng)營養(yǎng)活性的因子，在神經(jīng)損傷后可以保護(hù)相應(yīng)的背根神經(jīng)節(jié)感覺神經(jīng)元.此外，EGF還是一種腦腸肽神經(jīng)遞質(zhì).

2 EGF作用機(jī)制

EGF通過與其細(xì)胞膜受體結(jié)合，在細(xì)胞內(nèi)傳遞中構(gòu)成一個復(fù)雜的代謝網(wǎng)絡(luò)，誘導(dǎo)受體自身磷酸化，激活受體酪氨酸蛋白激酶活性，催化多種底物蛋白酪氨酸殘基(Tvr)磷酸化，啟動、催化、維持與細(xì)胞生長、增殖有關(guān)的一系列生化過程.

2.1 基本作用機(jī)制

Ullrich等人［30-31］提出二聚體學(xué)說，即 EGF與EGFR結(jié)合后相鄰受體相互靠近形成二聚體，聚集的受體相互進(jìn)行催化，使自身酪氨酸磷酸化，從而使受體的激酶區(qū)激活的觀點，該學(xué)說已得到了證實.

EGF首先與EGFR的胞外結(jié)合部位結(jié)合，導(dǎo)致受體分子發(fā)生二聚化，促使EGFR羧基末端的三個酪氨酸殘基(Tyr)自身磷酸化位點發(fā)生磷酸化，使受體酪氨酸激酶活化，從而磷酸化受體本身及下游的信號分子;磷酸化的受體通過其磷酸化酪氨酸殘基可與蛋白質(zhì)的SH2結(jié)構(gòu)域相互作用，結(jié)合胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子.已知EGFR的活化可以使細(xì)胞內(nèi)三磷酸肌醇和二?；视驮龆啵Y(jié)果引起細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子增多，激活磷酸蛋白激酶c和磷酸蛋白激酶A，從而介導(dǎo)各種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，使細(xì)胞增殖和功能發(fā)生改變.誘導(dǎo)EGFR自身磷酸化的位點是在其羧基端1068、148、1173和氨基端一個位點的四個Tyr殘基［32］.

關(guān)于信息傳遞的過程，目前認(rèn)為這種信息傳遞是以逐級放大形式來進(jìn)行的.即被激活的一級信息分子去激活下一級信息分子，以此類推，每一次傳遞都是激活過程.而磷酸化的受體激酶區(qū)一方面能特異地與配體結(jié)合被磷酸化，另一方面又啟動另外的信息分子，依次將信息傳遞到效應(yīng)分子，使細(xì)胞內(nèi)第二信使三磷酸肌醇和二乙酰甘油增多，引起細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+增多，激活蛋白激酶C和腺苷酸環(huán)化酶，改變細(xì)胞的骨架結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞分化、分裂和增殖等.但時至今日，有關(guān)EGF的作用機(jī)理仍有許多問題有待進(jìn)一步闡明.

2.2 三種蛋白酶的激活

(1)酪氨酸蛋白激酶(TPK)的激活:EGF受體的第三結(jié)構(gòu)區(qū)具有特異性的TPK活性.對此酶底物的研究是了解EGF如何刺激細(xì)胞增殖的信號傳導(dǎo)過程的關(guān)鍵所在，EGF與受體結(jié)合誘導(dǎo)受體磷酸化，激活TPK.EGFR不僅能自身磷酸化，而且還使依賴于Ca2+離子的蛋白質(zhì)或磷脂酰肌醇的磷酸化.利用定位突變的方法已經(jīng)證明:TPK磷酸化與否對酶活性有重要調(diào)節(jié)作用，高活性的TPK可促使細(xì)胞增殖或癌變.

(2)C激酶(PKC)的激活:EGF與受體結(jié)合從而誘導(dǎo)受體結(jié)構(gòu)產(chǎn)生變化，通過G蛋白降低受體TPK活性，從而導(dǎo)致EGF與受體復(fù)合物的高親合性結(jié)合快速下降，使受體受到功能上的下降調(diào)節(jié)，說明PKC活性與EGF密切相關(guān)，EGF表現(xiàn)的促細(xì)胞增殖、促癌作用有可能都是通過激活PKC來表現(xiàn)的，也可說明通過下降調(diào)節(jié)的反饋作用抑制了EGF受體促進(jìn)細(xì)胞增殖的力.可能正是由于PKC這種反饋抑制作用才使得正常細(xì)胞中EGF受體不會導(dǎo)致細(xì)胞異常增生.

(3)CAPK的激活:可能核內(nèi)EGF受體或OAG(1-油酰-2-乙酰-消旋甘油)以外的其它第二信使來增強(qiáng)NC3H/10的染色體蛋白激酶(CAPK)的活性，EGF對CAPK的活性的影響有助于說明核內(nèi)EGF的作用過程.

以上三種蛋白激酶的激活，從而保障了EGF受體復(fù)合物的一系列生理功能［33］.

EGF的發(fā)現(xiàn)和研究的歷史十分短暫，但其特殊的生物學(xué)效應(yīng)決定了它的廣泛應(yīng)用.隨著研究的深入和臨床上的廣泛應(yīng)用，一些疑難病癥，如重度燒傷、大面積創(chuàng)傷、消化道潰瘍、角膜嚴(yán)重?fù)p傷等，均有望迅速治愈.甚至目前的一些不治之癥:如神經(jīng)損傷、惡性腫瘤、AIDS病等，也可能通過EGF的使用而有所緩解和恢復(fù).可以預(yù)言，EGF的應(yīng)用必將為今后生命科學(xué)研究帶來重大的飛躍.

［1］ Cohen S.Purification of a nerve-growth promoting protein from the mouse salivarygland and its neuro-cytotoxic antiserum［J］.Proc Natl Acad Sci USA，1960，46:302-311.

［2］ Cohen S.Isolation of a mouse submaxillary gland protein accelerating incisor eruption and eyelid openingC in the newborn animal［J］.J Biol Chem，1962，237:1555-1562.

［3］ 孫衛(wèi)民，王惠琴.細(xì)胞因子研究方法［J］.北京:北京人民衛(wèi)生出版社，1989.

［4］ 席全勝，錢欣國，甘人寶.EGF家族研究進(jìn)展［J］.生命科學(xué)，1999，19(3):135-137.

［5］ Gregory H.Isolation and structure of urogastrone and its relationship to epidermal growth factor［J］.Nature，1975，257:325-327.

［6］ Anzano M A.Sarcoma growth factor conditioned medium of virally transformed cells is composed of both type α and type β transforming growth factor ［J］.Proc NatlAcad Sci USA，1983，80:6264-6268.

［7］ Blomquist M C.Vaccinia virus 19-lilodalton protein:relationship to several mammalian proteins，including two growth factors［J］.Proc Natl Acad Sci USA，1984，84:7363-7367.

［8］ Chang W.The genome of the shope fibroma virus，a tumorigenic poxvirus，contains a growth factor gene with sequence similarity to those encoding epidermal growth factor and transforming growth factor alpha［J］.Mol Cell Biol，1987，7:535-540.

［9］ Upton C.Mapping and sequencing of a gene from myxoma virus that is related to those encoding epidermal growth factor and transforming growth factor alpha［J］.J Virol，1987，61:1271-1275.

［10］ Graeme I Bell，Noel M Fong，Michelle M Stempien，et al.Human epidermal growth factor precursor:cDNA sequence，expression in vitro and gene organization ［J］.Natl Acid Research，1986，14(21):8427-8846.

［11］ Oka T.Synthesis and secretion of human epidermal growth factory by Escherichiacoli［J］.Proc Natl Acad Sci USA.1985，82:7212-7216.

［12］袁宇，張倩，黃培勇，等.hEGF和 hTGF—etN結(jié)構(gòu)域與 C結(jié)構(gòu)域的功能差異［J］.生物化學(xué)與生物物理學(xué)報，1999，31(5):519-522.

［13］ Carpenter G，Wahl MI.The epidermal growth factor family.In:Sporn MB，Robert AB，Eds.Peptide growth factors and their receptors I［J］.Berlin:Springer-Verlag，1990.69-171.

［14］ Greenbaum L E，Cressman D E，Haber B A，et al.Coexistence of C/EBP alpha beta growth-induced proteins and DNA synthesis in hepatocytes during liver regeneration.Implications for maintenance of the differentiated state during liver growth［J］.J Clin Invest，1995，96:1351-1365.

［15］張建中，孫存普.磁共振教程［J］.北京:中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社，1996.

［16］曾嶸，邵曉霞，夏其昌.人表皮生長因子肽譜及一級結(jié)構(gòu)質(zhì)譜法分析［J］.生物化學(xué)與生物物理學(xué)報，1999，31(1):31-36.

［17］王紅.表皮生長因子的研究進(jìn)展［J］.國外醫(yī)學(xué)免疫學(xué)分冊.1995，3:146-148.

［18］ Carpenter G，Cohen S，et al.Epidermal growth factor［J］.Annu Rev biochem，1979，48:193-216.

［19］ Latte M.The effect of epidermal growth factor on granulation tissue formation in the rat［J］.Acta Chir Scand，1988，546(Supply):1-44.

［20］ Savage C R Jr，Choen S.Proliferation of corneal epithelium induced by epidermal growthfactor［J］.Exp Eye Res，1973，15:361-366.

［21］ Wilson SE，Iody SA.Epidermal growth factor and its receptor.basic fibroblast growth factor，transforming growth factor beta-1 and interleukin-1 alpha messenger RNA production in human corneal endothelial cells［J］.Invest Ophthalmol Vis Sci，1991，32:2747-2752.

［22］ Hom D B.Growth factors in wound healing［J］.Otolaryngol Clin North Am，1995，28(5):933-953.

［23］朱淑萍，李天巧，張曼欣.用重組人表皮生長岡子在皮膚激光美窬科的應(yīng)用體會［J］.中國美容醫(yī)學(xué)，2009，18(7):1017-101.

［24］趙靖，謝立信，史偉云，等.表皮生長因子對人角膜內(nèi)皮細(xì)胞損傷修復(fù)的影響［J］.眼科新進(jìn)展，2002，22(3):170-172.

［25］江德龍，燕善軍.表皮生長因子與胃腸道疾病.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2010，19(3):278-280.

［26］童望宇.人表皮生長因子［J］.生物化學(xué)研究與應(yīng)用，1999，4:11-15.

［27］ Matri U，Burwen S J，Jones AL.Biological effects of epidermal growth factor，with emphasis on the gastrointestinal tract and liver:an update［J］.Hepatology，1989，5:81.

［28］ Recves J R.B J Cancer，1991，73:223-226.

［29］ Lesliell，Me—shannor K，Shannor JM，et al.Heparin—binding EGF—like growth factor is mitogen for rat alveolar type lI cell［J］.Am J Respir Cell Mol Biol，1997，16(3):379-387.

［30］ Sixtina G S，Hijazi A，Colombel M.Increased basal cell proliferation and EGF receptor expression in benign hypertrophy compared to normal prostate［J］.J Urol，1993，149:243.

［31］ Hoh S J，Alexander B，Inman CB，et al.(Epiderm al growth factor in-duced tyrosine phosphor)lation of nnclear proteins associated with translocatlon of epidermal gTowth factor receptor into the nucleus［J］.Biochem Pharmaeol，1994，47:117-122.

［32］張建福，郭世燕.上皮生長因子一尿抑胃素［J］.生理科學(xué)進(jìn)展，1984，15:151-155.

［33］ Untergasser G，Rumpold H，Hermann M，et al.Proliferative disorders of the aging human prostate:involvement of protein hormones and their receptors［J］.Exp Gerontol，1999，34(2):275-287.