楊宏靜

（重慶三峽醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，重慶 404020）

黃芩乙醇回流提取工藝研究

楊宏靜

（重慶三峽醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，重慶 404020）

目的：研究優(yōu)選黃芩乙醇回流的提取工藝。方法：采用單因素考察及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以黃芩苷的含量為考察指標(biāo)優(yōu)選黃芩提取工藝。結(jié)果：黃芩提取工藝選擇為加8倍量60%乙醇提取2次，第1次2h，第二次1.5h。結(jié)論：用此方法提取黃芩藥材效率高、結(jié)果穩(wěn)定。

黃芩；黃芩苷；單因素考察；正交設(shè)計(jì)；提取工藝

黃芩為唇形科植物黃芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根［1］。黃芩味苦、性寒。歸肺、膽、脾、大腸、小腸經(jīng)，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎的功效［2］。黃芩中主要含有黃酮類化合物，以黃芩苷為代表的黃酮類成分是黃芩抗菌、抗炎、解熱的主要有效成分［3］。為了充分提取黃芩的有效成分，我們用單因素考察及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對黃芩的提取工藝進(jìn)行了研究，確定了適合黃芩生產(chǎn)提取的工藝。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料

儀器?；亓魈崛⊙b置、高效液相色譜儀（Agilent1100）、色譜柱：Waters Sunfire C184.6×150mm。

試劑與藥品。黃芩藥材（購于安國以嶺中藥飲片有限公司）、黃芩苷（批號110715-200815，購于中國藥品生物制品檢定所）、乙醇為醫(yī)用級、甲醇為色譜純、水為重蒸水。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取溶媒考察

因素水平：參考有關(guān)文獻(xiàn)中黃芩的提取工藝研究［4，5］，選取水、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇為單因素考察水平，進(jìn)行試驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)方法：取黃芩選凈，稱取15g，分別加入6倍量的溶劑，回流提取2次，每次1.5小時(shí)，提取液濾過，合并，定容至200mL量瓶中，備用。

黃芩苷含量測定方法：①對照品溶液的配制：取黃芩苷對照品約10mg，精密稱定，置250mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，即得。②供試品溶液的制備：各精密量取提取液2mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取1mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。③色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇－0.2%磷酸溶液（45：55）為流動相，流速1mL/min；檢測波長280nm。④測定法：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 黃芩提取溶媒考察結(jié)果

結(jié)論：由以上結(jié)果可知，60%乙醇作溶媒時(shí)，黃芩苷含量高于水和其它濃度乙醇作溶媒時(shí)黃芩苷的含量，故選擇60%乙醇為提取溶媒。

2.2 正交試驗(yàn)

正交設(shè)計(jì)：選取影響提取物收率的提取次數(shù)（A）、提取時(shí)間（B）、加醇量（C）為考察因素，以黃芩苷的含量為指標(biāo)，選取如下水平進(jìn)行試驗(yàn)，見表2。

實(shí)驗(yàn)方法：取藥材，凈選干燥，粗碎，按處方配比，稱取葛根15g，以60%乙醇為提取溶媒。在平行操作的條件下，按L9（3）4正交表，回流提取，提取液合并，濾過，減壓回收乙醇，適量濃縮，轉(zhuǎn)移至1000mL量瓶中，放冷至室溫，加60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，備用。

黃芩苷的含量測定方法：同上。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3和表4。

表3 黃芩正交實(shí)驗(yàn)表

表4 方差分析

結(jié)果：由表3可知，3個(gè)因素的影響大小順序?yàn)樘崛〈螖?shù)大于加醇量大于提取時(shí)間。最佳工藝為A3B3C3，即加10倍量60%乙醇提取3次，每次2h。表4中方差分析表明，A因素對黃芩苷的含量有顯著性影響（P＜0.05），B因素和C因素對黃芩苷的含量均無顯著性影響。A因素中，隨著提取次數(shù)的增加，黃芩苷的含量雖有不同程度的增加，但Ⅱ到Ⅲ增幅變小，為了縮短生產(chǎn)周期，采用提取2次。B因素對黃芩苷的含量無顯著性影響，考慮到浸提時(shí)溶媒對藥材組織的浸潤和滲透過程，故將提取時(shí)間選為第1次2h，第2次1.5h。C因素對黃芩苷的含量亦無顯著性影響，考慮到藥材提取的吸收溶劑膨脹，因此將用量選定為8倍量。故經(jīng)優(yōu)選后確定的工藝為A2B（3，2）C2，即加8倍量60%乙醇提取2次，第1次2h，第2次1.5h。

2.3 驗(yàn)證試驗(yàn)

取藥材，凈選干燥，粗碎，按處方配比，稱取黃芩15g，以60%乙醇為提取溶媒，按最佳工藝A3B3C3組合條件和選定工藝A2B（3，2）C2的組合條件進(jìn)行重復(fù)驗(yàn)證對比實(shí)驗(yàn)，測定黃芩苷的含量，測定結(jié)果見表5。

表5 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

由上表可見，以黃芩苷的含量為考察指標(biāo)，最佳工藝A3B3C3和選定工藝A2B（3，2）C2的差距均不大；但選定工藝省工節(jié)能，故選定A2B（3，2）C2為提取工藝，即藥材加8倍量60%乙醇提取提取2次，第1次2h，第2次1.5h。

3 討 論

黃芩中所含黃酮類成分為其主要有效成分，此類成分易溶于乙醇。通過單因素提取溶媒的考察，得出此類成分在60%乙醇中溶解度較大。用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，優(yōu)選了影響提取物收率的3個(gè)因素，得出最佳提取工藝，結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)，對各影響因素進(jìn)行了優(yōu)化，最終確定了黃芩的提取工藝為加8倍量60%乙醇提取2次，第1次提取2h，第2次提取1.5h。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）（2010版）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：283.

［2］高學(xué)敏.中藥學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1998：118.

［3］李欣，魏朔南.黃芩的生物學(xué)研究進(jìn)展［J］.中國野生植物資源，2006，25（6）：11-15.

［4］丁芳林，張雯杰，陳波，等.正交法優(yōu)化超聲醇提黃芩活性成分研究［J］.湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，28（3）：14-16.

［5］宋承富，葉萍.黃芩提取物工藝研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2011，29（3）：641-644.

Objective：To study the best extraction process for Scutellariae Radix.Methods：Using single factor and orthogonal design to determine the content of baicalin as the index of evaluation.Results：The optimum condition for the extraction of Scutellariae Radix was adding 8 times of 60% alcohol，extracting for 2 hours first time and 1.5 hours second time，totally extracting 2 times.Conclusion：The optimum condition was efficient and stable.

Scutellariae Radix；Baicalin；Single factor；Orthogonal design；Extraction technology

R282.710.2

A

1004-2814(2013)06-492-02

2013-02-16