史德勝，李志煥，郭潤葡

(1.天津丹溪國藥研究所，天津 300061； 2.天津中新藥業(yè)集團股份有限公司藥材公司，天津 300040； 3. 天津中新藥業(yè)集團股份有限公司，天津 300193)

雙丹滴丸是由雙丹口服液改劑型而成，后者收載于《中國藥典》2010年版一部，具有活血化淤，通脈止痛的作用，用于瘀血痹阻所致的胸痹，癥見胸悶、心痛。雙丹滴丸由丹參、牡丹皮二藥組成。牡丹皮是雙丹滴丸的主藥，丹皮酚是牡丹皮的重要有效成分，具有止痛、鎮(zhèn)靜、降壓、抗炎和抗氧化作用[1]，因此，丹皮酚的含量與雙丹滴丸的功效密切相關。由于丹皮酚的揮發(fā)性，在放置過程中，雙丹滴丸中丹皮酚含量變化應該考查。為了提高丹皮酚的穩(wěn)定性，在雙丹滴丸的制備工藝中丹皮酚采用包合工藝以減少其揮發(fā)。本文采用HPLC法測定雙丹滴丸中丹皮酚的含量，比較了采用β-環(huán)糊精包合丹皮酚的工藝制備的雙丹滴丸(滴丸Ⅰ)與未包合丹皮酚制備的雙丹滴丸(滴丸Ⅱ)在穩(wěn)定性試驗中丹皮酚的含量變化，證明包合工藝可以提高雙丹滴丸中丹皮酚的穩(wěn)定性。

1 材料和儀器

LC-10A型高效液相色譜儀(日本島津)；SPD-10A紫外檢測器(日本島津)；Anastar色譜工作站；甲醇為分析純，水為蒸餾水。丹皮酚對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號110708-200506)。雙丹滴丸Ⅰ、雙丹滴丸Ⅱ均由天津丹溪國藥研究所制備。

2 方法和結(jié)果

2.1丹皮酚的含量測定

2.1.1色譜分析條件 Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相：甲醇-水(60∶40)；流速：1.0 ml/min；檢測波長：274 nm；柱溫：35 ℃；進樣量：20 μl；理論塔板數(shù)：按丹皮酚峰計算應不低于3000。

2．1．2溶液制備

2.1.2．1對照品溶液的制備 取丹皮酚對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 ml含40 μg的溶液，即得。

2.1.2．2供試品溶液的制備 取本品10丸，研細，取約50 mg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 ml，密塞，稱定重量，超聲處理45 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.1.2．3陰性樣品的制備 取缺牡丹皮的處方藥，按制備工藝制成陰性樣品。取適量，研細，取約50 mg，精密稱定，按“2.1.2.2“項下供試品溶液的制備方法制成陰性樣品溶液。分別吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性樣品溶液，依“2.1.1”項下色譜條件進樣，見圖1。

1.丹皮酚

2.1.3線性關系試驗 精密稱取丹皮酚對照品13.58 mg，置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 ml置10 ml量瓶中，甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別取上述溶液20 μl注入液相色譜儀，記錄峰面積。以對照品的濃度為橫坐標(X)，以相應的峰面積為縱坐標(Y)，進行線性回歸，得回歸方程為Y=60 344X-6130(r=0.9999)。在13.58～67.90 μg/ml范圍內(nèi)丹皮酚濃度與峰面積值呈良好的線性關系。

2.1.4精密度試驗 精密吸取丹皮酚對照品溶液分別進樣6次，測得峰面積值，計算得RSD為0.26%。

2.1.5穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液，分別在0、2、4、6和8 h進樣，測定丹皮酚峰面積，結(jié)果峰面積RSD為0.42%。結(jié)果表明，供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.6重現(xiàn)性試驗 精密稱取雙丹滴丸樣品6份，制備供試品溶液，測定，RSD為1.36%。

2.1.7加樣回收率試驗 精密稱取樣品約25 mg，9份，分別加入相當于該量80%、100%和120%質(zhì)量的丹皮酚對照品，制備供試品溶液，進樣，測定。結(jié)果丹皮酚平均回收率為100.5%，RSD為1.51%(n=9)，見表1。

表1 回收率測定結(jié)果(n=9)

2.1.8樣品測定 取丹皮酚對照品溶液、雙丹滴丸Ⅰ、雙丹滴丸Ⅱ供試品溶液適量，依法操作，測定結(jié)果見表2。

表2 雙丹滴丸中丹皮酚含量測定的結(jié)果(n=3)

2.2穩(wěn)定性研究 根據(jù)中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導原則，將雙丹滴丸Ⅰ、雙丹滴丸Ⅱ樣品進行穩(wěn)定性長期試驗。按市售包裝于(25±2) ℃相對濕度(60±10)%的條件下放置18個月，于0、3、6、9、12和18個月分別取樣，對丹皮酚含量進行測定。試驗結(jié)果見表3。

表3 雙丹滴丸穩(wěn)定性試驗丹皮酚含量測定結(jié)果

3 討論

3.1牡丹皮是雙丹滴丸中的主藥，其主要成分丹皮酚的生物活性對雙丹滴丸的療效起著極其重要的作用。本文建立了丹皮酚含量測定的方法，操作簡單，重現(xiàn)性好，可以作為雙丹滴丸和雙丹口服液等其他劑型質(zhì)量控制的方法。

3.2丹皮酚是一個揮發(fā)性成分，從試驗結(jié)果中可以看出，未包合丹皮酚制備的雙丹滴丸在放置過程中，丹皮酚的含量逐漸下降，而采用β-環(huán)糊精包合丹皮酚的工藝，成功地解決了這一問題。文獻報道[2]β-環(huán)糊精包合丹皮酚，不僅降低其揮發(fā)性，同時增加了丹皮酚的水溶性，提高生物利用度，有利于臨床療效的穩(wěn)定。

1 周家駒，謝桂榮，嚴建新．中藥影響心腦血管系統(tǒng)活性成分[M]．北京：科學出版社，2012：216

2 王錚，任天池，喬淑珍.丹皮酚-β-環(huán)糊精包合物的研究[J]．中國藥學雜志，1989，24(7)：410