宮曉 程增青 李陸梅等

摘要：介紹了雞新城疫病的流行情況及疫苗的應(yīng)用現(xiàn)狀，概述了滅活疫苗、活疫苗及基因工程苗等主要的雞新城疫疫苗研究及應(yīng)用現(xiàn)狀，旨為雞新城疫疫苗的研制和應(yīng)用提供一定的參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：新城疫；疫苗；研制；應(yīng)用

中圖分類號：S858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2013）09-0065-02

1 新城疫流行情況及疫苗應(yīng)用現(xiàn)狀

雞新城疫又叫亞洲雞瘟。它是一種由副粘病毒引起的高度接觸性、急性敗血性傳染病。主要感染禽，也可感染人類。該病流行于很多國家，給世界養(yǎng)殖業(yè)造成很大的威脅，被世界衛(wèi)生組織定為A類疫病[1]。新城疫自1926年被確認(rèn)以來，在世界范圍內(nèi)廣為傳播已有80多年，給養(yǎng)禽業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，迄今仍是禽類最重要的疾病之一。新城疫病毒自1946年在我國首次分離至今已在中國存在了60多年，自20世紀(jì)90年代以來，臨床上非典型新城疫的發(fā)生現(xiàn)象十分普遍，在鵝群及鴨群中均有發(fā)生[2-4]，說明新城疫的易感宿主范圍在進(jìn)一步擴(kuò)大。由于疫苗的廣泛應(yīng)用，目前的NDV流行株基因型已發(fā)生較大改變，流行病學(xué)調(diào)查充分顯示，基因Ⅶd亞型在我國當(dāng)前NDV流行株中占有絕對優(yōu)勢，與經(jīng)典疫苗Lasota 株（基因Ⅱ型）核苷酸同源性不足78%。揚(yáng)州大學(xué)[5]、中國動物疫病流行中心[6，7]、山東農(nóng)科院家禽所[8]等在流行病學(xué)調(diào)查中均顯示我國近幾年基因Ⅶ型NDV流行十分普遍。目前國內(nèi)外企業(yè)生產(chǎn)的新城疫疫苗毒株有10余株，其中Lasota毒株制備的活疫苗、滅活疫苗占據(jù)優(yōu)勢地位。

2 疫苗種類

2.1 滅活疫苗

目前預(yù)防雞新城疫的滅活疫苗使用較多的為油乳劑滅活疫苗，國內(nèi)生物制品廠家多用Lasota株，梅里亞用Ulster2c株、英特威用Clone-30株制備疫苗。評價疫苗質(zhì)量的主要因素在于毒株的免疫原性及病毒含量的高低。目前，疫苗效力均已達(dá)到國際上要求的滅活苗標(biāo)準(zhǔn)，可用于不同日齡的雞，主要通過頸部皮下及肌肉注射途徑免疫。

2.2 活疫苗

目前新城疫弱毒活疫苗有I系、Ⅱ系、Ⅳ系、Clone-30、CS2、VG/GA、HB1、Mukteswar、ZM10、N79、F、Ulsterzc、V4/HB92克隆株、VH株等幾種。

2.2.1 I系苗 為中等毒力，主要由Mukteswar株制備，對雛雞有一定的致病性。60日齡以上雞才可以用。用法為肌肉注射，不能點(diǎn)眼、滴鼻或飲水，接種后產(chǎn)生免疫力很快，7～10 d抗體水平上升到高峰，隨后緩慢下降。同低毒力疫苗相比，免疫期較長。I系苗不能用于產(chǎn)蛋雞，否則可引起產(chǎn)蛋量大幅下降，蛋殼變劣，且恢復(fù)緩慢。

2.2.2 CS株 為中等毒力，免疫效果與普通I系苗相似但毒力稍溫和，安全性較優(yōu)。雞群1月齡以上才可使用，且此前至少接種過1次新城疫低毒力苗，不能用于初生雛雞；產(chǎn)蛋雞不宜接種；在有成雞和雛雞的雞場，應(yīng)注意消毒隔離，避免苗毒的傳播引起雛雞死亡。接種方法只能肌肉注射。

2.2.3 Ⅱ系苗 毒力弱，通常只用于雛雞首免，安全性好，但產(chǎn)生免疫力較慢較弱。用法為點(diǎn)眼、滴鼻，不能飲水。

2.2.4 Ⅳ系苗（Lasota株） 是國內(nèi)外廣泛應(yīng)用的優(yōu)良低毒力苗，其毒力與免疫性能高于Ⅱ系苗，安全性良好。7日齡以上的健康雛雞、青年雞、產(chǎn)蛋雞均可使用。用法可滴眼、滴鼻、飲水或肌肉注射，雛雞首免可點(diǎn)眼、滴鼻。

2.2.5 Clone-30株 該疫苗最早是荷蘭研制者應(yīng)用克隆技術(shù)，由Lasota株優(yōu)化制成。其免疫效果與Ⅳ系苗相似而毒力較溫和，能突破母源抗體障礙，從1日齡雛雞至成年雞均可使用。用法可點(diǎn)眼、滴鼻、飲水或肌注，雛雞首免可點(diǎn)眼、滴鼻。

2.2.6 N79株 是美國應(yīng)用克隆技術(shù)對Ⅳ系苗加以優(yōu)化而制成，滴鼻、點(diǎn)眼、飲水免疫均可。

2.2.7 VH株 是以色列用新城疫病毒自然弱毒株制成的一種低毒力苗，毒力溫和而穩(wěn)定，主要用于雛雞首免。通常應(yīng)用的是該毒與傳支制成的聯(lián)苗，如VH+H120+28/86，用法可點(diǎn)眼、滴鼻。

2.2.8 其他新城疫低毒力苗 有法國的“衛(wèi)雞城”活疫苗與VG/GA株活疫苗、ZM10株活疫苗、V4/HB92克隆株活疫苗、HB1株活疫苗、F株活疫苗等，其主要優(yōu)點(diǎn)是免疫原性好而毒力溫和，呼吸道反應(yīng)輕微，可飲水、點(diǎn)眼、滴鼻。

2.3 基因工程苗

隨著分子生物學(xué)及重組DNA技術(shù)的發(fā)展，基因工程疫苗的研究不斷深入，傳統(tǒng)的全病毒疫苗存在諸多缺陷，利用基因工程技術(shù)開發(fā)疫苗是目前疫苗研究的熱點(diǎn)，但商品化的產(chǎn)品較少。國內(nèi)外一些實(shí)驗(yàn)室從20世紀(jì)80年代末開始利用重組DNA技術(shù)研制ND基因工程疫苗。目前，ND基因工程苗主要有DNA疫苗、亞單位苗、活載體疫苗、多肽苗和轉(zhuǎn)基因植物疫苗等幾種。

2.3.1 亞單位苗 是將NDV保護(hù)性抗原基因在原核或真核系統(tǒng)中表達(dá)所獲得的產(chǎn)品制成的疫苗，具有安全性高，穩(wěn)定性好，便于保存運(yùn)輸，易于批量生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。有研究利用相同系統(tǒng)表達(dá)的NDV長春株的HN蛋白作為亞單位疫苗，雛雞可抵抗NDV強(qiáng)毒攻擊，并可獲得100%的保護(hù)。揚(yáng)州大學(xué)[9]利用反向遺傳操作構(gòu)建的基因Ⅶ型疫苗為經(jīng)過改造的Ⅶ型毒株與大多數(shù)流行株一致，為基因Ⅶd亞型，可有效降低喉氣管和泄殖腔中的排毒率，對鵝、鴨等水禽具有更好的免疫效果，比經(jīng)典疫苗Lasota株產(chǎn)生更高的抗體。

2.3.2 DNA 疫苗 具有能夠激發(fā)機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)、不散毒、便于儲存和運(yùn)輸?shù)葍?yōu)點(diǎn)。DNA疫苗不僅可誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答，而且還可誘導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答，并兼有亞單位苗的安全性和弱毒疫苗的高效性，已經(jīng)成為國際疫苗研究領(lǐng)域最熱門的課題之一。2005年底農(nóng)業(yè)部宣布，中國已成功研制出禽流感-新城疫重組二聯(lián)活疫苗，并正式批準(zhǔn)生產(chǎn)。

2.4 聯(lián)苗

新城疫在我國主要養(yǎng)殖區(qū)域流行相當(dāng)普遍，尤其與其他疾病混合感染的情況也很常見，因此在進(jìn)行新城疫疫苗免疫的同時還要對其他禽病進(jìn)行疫苗免疫。為了減少對雞的免疫次數(shù)和應(yīng)激，多采用聯(lián)苗來防治雞的各種疾病。國內(nèi)外新城疫聯(lián)苗正處于研制及推廣應(yīng)用階段，已顯示出其打一針可防數(shù)病的優(yōu)越性。國內(nèi)滅活疫苗產(chǎn)品有新支二聯(lián)、新流二聯(lián)、新法二聯(lián)、新病二聯(lián)、新支減三聯(lián)、新支流三聯(lián)、新支法三聯(lián)、新流法三聯(lián)、新支法關(guān)四聯(lián)、新支流法四聯(lián)等相關(guān)產(chǎn)品，活疫苗有新支二聯(lián)等，市場應(yīng)用效果較好。

3 應(yīng)用展望

從以上介紹來看，滅活疫苗接種劑量較大，接種后通常需2～3周后才能產(chǎn)生免疫力，不能用作緊急預(yù)防免疫?；钜呙缒艽碳ぎa(chǎn)生局部免疫，免疫后很快得到保護(hù)。亞單位疫苗雖然安全性高，穩(wěn)定性好，便于保存運(yùn)輸，易于批量生產(chǎn)，但是市場應(yīng)用效果一般，故目前市場仍然采用活疫苗加滅活苗的免疫程序進(jìn)行雞新城疫的預(yù)防。

據(jù)市場跟蹤調(diào)查，新城疫活疫苗每個月用一次，滅活苗2～3個月免疫一次，使用頻率如此之高，但新城疫病毒仍不能得到有效控制，有研究者提出，雞新城疫雖然只有一個血清型，但由于疫苗株與當(dāng)前流行株之間的基因型和抗原差異性，免疫雞群中也會不同程度地感染強(qiáng)毒，目前常用新城疫疫苗毒株與當(dāng)前流行毒株基因型不匹配，免疫保護(hù)力不足。新城疫新型疫苗對控制我國新城疫病毒流行有著非常廣闊的應(yīng)用前景，并且實(shí)驗(yàn)室的數(shù)據(jù)表明，使用與流行株同型的基因Ⅶ型疫苗可以有效降低免疫雞群中新城疫強(qiáng)毒的攜帶量及感染率。秦卓明等[10]對國內(nèi)大量新城疫病毒（NDV）血凝素基因F和HN的測序表明，NDV主要免疫原HN和F基因與生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用的經(jīng)典疫苗Lasota 株的核苷酸同源性不足80%，而NDV流行株之間的同源性則高達(dá)94.4%～100%，從分子遺傳學(xué)角度證實(shí)了VIId型NDV是導(dǎo)致新城疫免疫失敗的重要原因。HI交叉抑制試驗(yàn)和雞胚中和試驗(yàn)等則從抗原性的角度證實(shí)了NDV在免疫壓力下抗原性的變化。

新城疫目前沒有特效藥物及疫苗，只能以預(yù)防為主，根據(jù)當(dāng)?shù)氐陌l(fā)病特點(diǎn)、流行趨勢和規(guī)律，用高質(zhì)量的疫苗，科學(xué)的免疫程序，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理與隔離消毒，才是防治ND的關(guān)鍵。因而篩選出優(yōu)質(zhì)高效的VIId型NDV毒株制備滅活疫苗或者活疫苗，有可能在今后的生產(chǎn)上替代現(xiàn)有的疫苗，而被廣泛使用。參考文獻(xiàn)：

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