苗華榮　毛瑞喜　胡曉輝等

摘要：以花育22號(hào)、花育28號(hào)、06B16、P76為試材進(jìn)行不同鹽濃度脅迫，篩選適宜的鹽濃度；以3個(gè)RIL（Recombinant Inbred Lines）群體為試材，分析RIL群體芽期耐鹽性差異以及芽期耐鹽性與脂肪酸的相關(guān)性。結(jié)果表明：隨著鹽濃度的增加，4個(gè)品種發(fā)芽率、相對(duì)發(fā)芽率和相對(duì)鮮重均呈下降趨勢(shì)；0.5%和0.7%鹽濃度下4個(gè)品種的發(fā)芽率發(fā)生分化，1.0%鹽濃度下4個(gè)品種的發(fā)芽率、相對(duì)發(fā)芽率均接近0，因此選擇0.7%作為RIL群體芽期耐鹽性的鑒定濃度。RIL2群體相對(duì)發(fā)芽率的次數(shù)分布呈連續(xù)偏態(tài)分布，變幅為0～56.41%；RIL5、RIL8群體相對(duì)發(fā)芽率的次數(shù)分布呈雙峰分布，變幅分別為0～51.61%、0～57.14%。

關(guān)鍵詞：花生；RIL群體；耐鹽性

中圖分類號(hào)：S565.201 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2013）08-0033-03

土壤鹽堿化和次生鹽堿化問題在世界范圍內(nèi)廣泛存在，特別是干旱、半干旱地區(qū)，問題更為嚴(yán)重。我國(guó)鹽漬化土壤較多，總面積超過3 300×104 hm2，而且還經(jīng)常由于灌溉不當(dāng)產(chǎn)生一些次生鹽漬化土壤_[1]。由于大部分植物在土壤含鹽0.3%時(shí)便受到危害，大于 0.5%時(shí)便無法正常生長(zhǎng)，鹽堿逆境脅迫成為限制植物生長(zhǎng)發(fā)育和作物產(chǎn)量的主要非生物脅迫因素。因此如何提高作物耐鹽性備受關(guān)注。

花生是我國(guó)重要的油料作物和經(jīng)濟(jì)作物，開展花生耐鹽性研究，培育耐鹽花生品種，對(duì)擴(kuò)大花生產(chǎn)區(qū)、提高鹽堿地區(qū)花生產(chǎn)量、增加油脂供給具有重要意義。目前，有關(guān)花生耐鹽性研究的報(bào)道相對(duì)較少，主要集中在種質(zhì)資源篩選鑒定、芽期和全生育期耐鹽性鑒定方面_[2～5]。本研究以花育22號(hào)、花育28號(hào)、06B16、P76為親本構(gòu)建的3個(gè)RIL群體為試材，對(duì)RIL群體芽期耐鹽性差異以及芽期耐鹽性與脂肪酸的相關(guān)性進(jìn)行分析。

1材料與方法

1.1材料

以花育22號(hào)_[6]、花育28號(hào)_[7]、06B16、P76_[8]為親本構(gòu)建的3個(gè)RIL群體—— RIL2群體（花育22號(hào)×06B16）、RIL5群體（花育22號(hào)×P76）和RIL8群體（花育28號(hào)×P76）為試材。其中，花育22號(hào)和花育28號(hào)均由山東省花生研究所育成，通過了山東省農(nóng)作物品種審定委員會(huì)審定；P76為來源于山東省花生研究所的高油酸品系；06B16為來源于美國(guó)的高油酸材料。材料種植于山東省花生研究所試驗(yàn)站，收獲后晾干備用。

1.2方法

1.2.1鹽濃度篩選以4個(gè)親本為材料，設(shè)計(jì)鹽濃度梯度為0、0.30%、0.50%、0.70%、1.00%，以篩選出適合RIL群體芽期耐鹽性鑒定的鹽濃度。

1.2.2耐鹽性鑒定方法選取60粒種子平均放置到直徑12 cm、底部放置2層濾紙的3個(gè)培養(yǎng)皿中，每皿20粒；分別加入0.7%鹽溶液100 ml，置于28℃培養(yǎng)箱吸脹6 h；取出，將溶液倒掉再分別加入0.7%鹽溶液30 ml，仍置于28℃培養(yǎng)箱發(fā)芽；48 h后取出，將溶液倒掉，分別加入0.7%鹽溶液20 ml，觀察記錄種子萌發(fā)情況。對(duì)照各皿中改加蒸餾水，其他操作與鹽處理的相同。

統(tǒng)計(jì)96 h的發(fā)芽數(shù)、萌發(fā)數(shù)以及96 h的新增加鮮重。各指標(biāo)判定標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)芽——胚根長(zhǎng)度等于或大于種子長(zhǎng)度；萌發(fā)——種子露白或胚根長(zhǎng)度低于種子長(zhǎng)度；增加鮮重——測(cè)量長(zhǎng)度超過2 mm的胚根重量（g）。

發(fā)芽率（%）=發(fā)芽種子數(shù)/種子總粒數(shù)×100

相對(duì)發(fā)芽率（%）=脅迫發(fā)芽率/對(duì)照發(fā)芽率×100

相對(duì)鮮重（%）=脅迫鮮重/對(duì)照鮮重×100

1.2.3脂肪酸測(cè)定采用GC法。氣相色譜儀Agllent Technologies 7890A，載氣：氦氣，色譜條件：柱初溫210℃，維持9 min，然后以20℃/min升至230℃，維持8 min；分流比3∶1；檢測(cè)器溫度380℃，氫氣流量40 ml/min；空氣流量：400 ml/min；尾吹高純度氦氣10 ml/min。

1.3數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)處理與分析在Excel中進(jìn)行。

2結(jié)果與分析

2.14個(gè)親本品種的鹽濃度梯度篩選

對(duì)花育22號(hào)、花育28號(hào)、06B16、P76進(jìn)行不同鹽濃度脅迫，結(jié)果（圖1）表明：隨著鹽濃度的增加，4個(gè)品種的發(fā)芽率、相對(duì)發(fā)芽率和相對(duì)鮮重變化趨勢(shì)一致，均呈下降態(tài)勢(shì)；花育22號(hào)和花育28號(hào)的萌發(fā)率呈上升趨勢(shì)，而06B16和P76的萌發(fā)率先升高后降低，分別于0.5%和0.7%時(shí)出現(xiàn)峰值。4個(gè)品種在各鹽濃度脅迫下的表現(xiàn)不盡相同，0.3%鹽濃度下4個(gè)品種的發(fā)芽率、相對(duì)發(fā)芽率均在60%以上，之后大幅下降，以06B16和P76的下降幅度最大；1.0%鹽濃度下，4個(gè)品種的發(fā)芽率、相對(duì)發(fā)芽率均接近0，因此選擇0.7%作為RIL群體芽期耐鹽性的鑒定濃度。相比較而言，4個(gè)品種的耐鹽性水平由高到低依次為花育28號(hào)、花育22號(hào)、06B16、P76。

2.2RIL群體耐鹽性表現(xiàn)

RIL2群體各株系對(duì)照的平均發(fā)芽率為91.98%，鹽脅迫的平均發(fā)芽率為13.43%；RIL5群體各株系對(duì)照的平均發(fā)芽率為89.56%，鹽脅迫的平均發(fā)芽率為13.10%；RIL8群體各株系對(duì)照的平均發(fā)芽率為89.04%，鹽脅迫的平均發(fā)芽率為19.64%。

鹽脅迫下，RIL2群體相對(duì)發(fā)芽率的次數(shù)分布呈連續(xù)偏態(tài)分布，變幅為0～56.41%；RIL5群體相對(duì)發(fā)芽率的次數(shù)分布呈雙峰分布，變幅為0～51.61%；RIL8群體相對(duì)發(fā)芽率的次數(shù)分布也呈雙峰分布，變幅為0～57.14%；RIL2、RIL5和RIL8群體中相對(duì)發(fā)芽率超過40%的株系分別為4、3、15個(gè)（圖2）。

2.3RIL群體芽期耐鹽性與4種主要脂肪酸的相關(guān)性

由表1看出，RIL2群體和RIL5群體的對(duì)照發(fā)芽率、脅迫發(fā)芽率、相對(duì)發(fā)芽率、相對(duì)鮮重與棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸含量間相關(guān)性均不顯著；RIL8群體的對(duì)照發(fā)芽率、脅迫發(fā)芽率、相對(duì)發(fā)芽率與棕櫚酸、亞油酸含量極顯著正相關(guān)，而與油酸極顯著負(fù)相關(guān)。

3結(jié)論與討論

鹽濃度篩選試驗(yàn)結(jié)果表明，0.7%的鹽濃度可以作為RIL群體各株系芽期耐鹽性的鑒定濃度。4個(gè)親本品種的耐鹽性強(qiáng)弱依次為花育28號(hào)、花育22號(hào)、06B16、P76。

不同RIL群體的耐鹽性存在差異，RIL2群體相對(duì)發(fā)芽率的次數(shù)分布呈連續(xù)偏態(tài)分布，而RIL5和RIL8群體相對(duì)發(fā)芽率的次數(shù)分布呈雙峰分布，表現(xiàn)出花生不同RIL群體耐鹽性遺傳的復(fù)雜性。

對(duì)不同類型花生種質(zhì)資源的耐鹽性進(jìn)行鑒定，結(jié)果表明，五大類型花生品種的耐鹽性強(qiáng)弱依次為多粒型、珍珠型、龍生型、普通型、中間型，并認(rèn)為植物的耐鹽性與其體內(nèi)的亞油酸和脯氨酸含量具有相關(guān)性。本研究對(duì)RIL群體芽期耐鹽性與脂肪酸的相關(guān)性分析表明， RIL2群體和RIL5群體的調(diào)查指標(biāo)與棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸含量間均不存在顯著相關(guān)性；而RIL8群體的對(duì)照發(fā)芽率和相對(duì)發(fā)芽率均與棕櫚酸、亞油酸含量極顯著正相關(guān)，與油酸含量極顯著負(fù)相關(guān)?；ㄉ望}性與脂肪酸含量間的關(guān)系仍需進(jìn)一步通過擴(kuò)大材料來源進(jìn)行分析。

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