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鹿茸多肽促進(jìn)皮膚創(chuàng)面愈合的基礎(chǔ)研究

2013-04-29 04:44:53牛瓊劉黎軍
關(guān)鍵詞:皮膚

牛瓊 劉黎軍

【摘 要】目的:探討鹿茸多肽對(duì)皮膚愈合的影響。方法:設(shè)計(jì)將48只大鼠隨機(jī)分成1個(gè)對(duì)照組和3個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每組12只。實(shí)驗(yàn)組1 單純肌肉注射用藥;實(shí)驗(yàn)組2 為單純創(chuàng)口外部用藥;實(shí)驗(yàn)組3 則肌注與外部混合用藥。以大鼠背部以脊柱為中心設(shè)計(jì)5cm*5cm創(chuàng)面,每日給藥1次,分別于2、4、6、8、10、12、14日觀察創(chuàng)面的愈合情況;于第10天測(cè)量創(chuàng)面大小、計(jì)算愈合面積、愈合速度;單位重量組織細(xì)菌計(jì)數(shù);肉芽組織羥脯氨酸含量測(cè)定。結(jié)果:創(chuàng)面愈合面積、愈合速度和肉芽組織羥脯氨酸含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)組3優(yōu)于其它3個(gè)實(shí)驗(yàn)組,而單位重量組織細(xì)菌計(jì)數(shù)低于其它3個(gè)實(shí)驗(yàn)組。 結(jié)論:鹿茸多肽能夠提高皮膚愈合速度,增加組織細(xì)胞間連接,加速上皮化生。

【關(guān)鍵詞】鹿茸多肽;皮膚;愈合

皮膚是全身最大的器官。皮膚愈合情況直接關(guān)系到創(chuàng)口的上皮化生過(guò)程,可以說(shuō)外科學(xué)最早面臨的問(wèn)題就是皮膚修復(fù)。鹿茸多肽屬于生物活性物質(zhì),目前主要應(yīng)用于治療各種類型骨折、骨質(zhì)疏松和股骨頭壞死,對(duì)骨細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的促進(jìn)作用[1-2]。但鹿茸多肽對(duì)于創(chuàng)面的加速愈合和提高創(chuàng)面愈合的質(zhì)量尚未有詳細(xì)的報(bào)道。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)分組及給藥方法:健康大鼠48只雌雄各半,隨機(jī)分成1個(gè)對(duì)照組和3個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每組12只。對(duì)照組采取大鼠背部手術(shù)模擬創(chuàng)傷皮膚缺損;實(shí)驗(yàn)組1:采用后臀部肌肉注射鹿茸多肽;實(shí)驗(yàn)組2:采用創(chuàng)口外用鹿茸多肽;實(shí)驗(yàn)組3:采用后臀部肌肉注射并創(chuàng)口外用鹿茸多肽。

1.2手術(shù)方法:采用3%戊巴比妥鈉靜脈麻醉。每公斤體重1毫升。大鼠背部備皮后,將打孔器調(diào)至直徑5厘米,用龍膽紫液染色觸頭。在大鼠背部頭側(cè)1/3處,以脊柱為中心分別打印手術(shù)標(biāo)記。用強(qiáng)力碘消毒術(shù)區(qū)皮膚,鋪無(wú)菌巾。手術(shù)操作完全在無(wú)菌條件下,沿印跡統(tǒng)一大小完整切除設(shè)計(jì)創(chuàng)面的所有皮膚和淺筋膜組織,直到深筋膜面,徹底止血。自制前端帶有篩孔的無(wú)菌導(dǎo)藥管,埋于外用鹿茸多肽組大鼠背部創(chuàng)面無(wú)菌紗布下,以方便給藥。切口用無(wú)菌紗布包扎。

1.3檢測(cè)指標(biāo)及方法:觀察各組大鼠在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的情緒,活動(dòng),進(jìn)食,精神有無(wú)變化。每次換藥時(shí)觀察創(chuàng)面的顏色,肉芽生長(zhǎng)是否新鮮,滲出物和分泌物的多少及性狀,創(chuàng)面的大小,有無(wú)感染。分別于2、4、6、8、10、12、14日觀察創(chuàng)面的愈合情況;于第10天用游標(biāo)卡尺分別測(cè)量未愈合創(chuàng)口的縱徑和橫徑,按照下述公式計(jì)算愈合面積。

愈合面積=創(chuàng)口總面積-(長(zhǎng)徑*短徑*0.785)[3] 無(wú)菌操作下取組織塊,稱重后將組織制作成勻漿,按系列稀釋法稀釋并培養(yǎng),計(jì)數(shù)細(xì)菌,計(jì)算單位重量組織的細(xì)菌數(shù)。通過(guò)樣品水解,氧化,顯色,用分光光度計(jì)將所測(cè)標(biāo)本與標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行比色,讀出并記錄標(biāo)本羥脯氨酸濃度。

2 結(jié)果

1.1 大體觀察:用藥后各組大鼠的生活習(xí)性無(wú)明顯改變,進(jìn)食情況良好。所有實(shí)驗(yàn)組的創(chuàng)面肉芽組織均優(yōu)于對(duì)照組,創(chuàng)面基本無(wú)滲出,炎癥反應(yīng)小,周圍皮膚腫脹輕,無(wú)分泌物。實(shí)驗(yàn)組3的肉芽組織最為新鮮,顏色鮮紅,輕觸即可出血。

1.2創(chuàng)面愈合面積比較:各實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面均有明顯縮小,對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組均存在差異(P<0.05),其中實(shí)驗(yàn)組3最顯著(P<0.001)。(表1)

1.3細(xì)菌學(xué)檢查比較:實(shí)驗(yàn)組3和實(shí)驗(yàn)組2創(chuàng)面組織塊單位重量細(xì)菌計(jì)數(shù)同實(shí)驗(yàn)組1和對(duì)照組之間存在差異(P<0.05),而實(shí)驗(yàn)組1與對(duì)照組之間、實(shí)驗(yàn)組3與實(shí)驗(yàn)組2之間統(tǒng)計(jì)差異(P>0.05)表(2)。

1.4創(chuàng)面肉芽組織羥脯氨酸含量測(cè)定比較:對(duì)照組創(chuàng)面肉芽組織羥脯氨酸含量低于各實(shí)驗(yàn)組,存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),其中實(shí)驗(yàn)組3羥脯氨酸含量明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。各實(shí)驗(yàn)組間無(wú)明顯差異。表(3)。

3 討論

從先秦以來(lái)的兩千多年歷史中,鹿茸一直被認(rèn)為是滋補(bǔ)和醫(yī)治多種疾患的珍貴藥材。鹿茸能加速創(chuàng)傷愈合,這一藥用最早記載在《神農(nóng)本草經(jīng)》。明代李時(shí)珍《本草綱目》謂:“生精補(bǔ)髓、養(yǎng)血益陽(yáng)、強(qiáng)筋健骨”?!吨兴幋筠o典》關(guān)于鹿茸能加速創(chuàng)傷愈合這一藥用收載:鹿角粉口服,治乳腺炎26 例皆愈合。

近年來(lái),隨著中醫(yī)中藥的發(fā)展,采用先進(jìn)的技術(shù),國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)鹿茸作了大量的研究。結(jié)果表明:鹿茸是哺乳動(dòng)物身體中生長(zhǎng)極為迅速的一種特殊的骨組織,它的生長(zhǎng)速度是每天1-2 cm。日本學(xué)者植本、龍川報(bào)道了鹿茸精注射劑對(duì)頸部外傷、顱骨外傷性骨折及頭頸部外傷癥侯群均有良好的療效。由此推測(cè),鹿茸中必然存在著與一般組織不同的促進(jìn)骨與上皮組織生長(zhǎng)的活性因子。香港中文大學(xué)姜潤(rùn)祥報(bào)告了從鮮鹿茸中分離出上皮生長(zhǎng)因子樣物質(zhì)[4]。新西蘭學(xué)者Suttie[5]等也報(bào)告了鮮鹿茸中存在著大量的胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF1 和IGF2 )及其受體,證明了赤鹿(馬鹿的一個(gè)亞種)的鮮鹿茸尖布存在4 種骨生長(zhǎng)因子的mRNA[6],推測(cè)可能是鹿茸特有的生長(zhǎng)因子。日本學(xué)者峰下鐵雄實(shí)驗(yàn)表明[7],在飼料中加25%或50%的鹿茸,可使小白鼠的體重較快增加,使蝌蚪的生長(zhǎng)與分化加快。

外科手術(shù)中,大約有三分之一的病例需要做皮膚修復(fù),特別是在新鮮的創(chuàng)傷中,有相當(dāng)?shù)牟±即嬖谥つw缺損問(wèn)題。隨著全球工農(nóng)業(yè)的大力發(fā)展,外傷的增多和損傷的嚴(yán)重程度、復(fù)雜性以及患者求醫(yī)標(biāo)準(zhǔn)的提高,使得國(guó)內(nèi)的大量專家和學(xué)者對(duì)此愈來(lái)愈重視。各種皮片(表層皮片、斷層皮片、全層皮片),皮瓣(扁平皮瓣、局部轉(zhuǎn)移皮瓣、局部推進(jìn)皮瓣、V-Y縫和、“Z”字成型術(shù)、管狀皮瓣、袋狀皮瓣、島狀皮瓣、游離狀皮瓣、肌筋膜狀瓣、吻合血管的皮瓣等)移植術(shù)在臨床中得到廣泛開(kāi)展和應(yīng)用,并收到良好的效果。目前已從自體植皮發(fā)展到同種異體植皮,從同種異體植皮發(fā)展到異體植皮,從生物皮膚發(fā)展到人工皮膚,并利用自體條件開(kāi)展了如組織擴(kuò)張術(shù)、皮膚特異性延長(zhǎng)、彈力網(wǎng)氣嚢包堆法、凍干或干燥植皮等等。自從1972年Savage等[8]從小大鼠頜下腺中分離獲得表皮生長(zhǎng)因子(EGF) [9]以來(lái),大量的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)許多物質(zhì)能夠促進(jìn)皮膚的愈合,如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)[10-11]、苯妥英、VitA、生長(zhǎng)素、左旋咪唑、雷公藤甲素、精氨酸、肝素、三七鮮葉、金葡菌軟膏、微量元素鋅等等。

在創(chuàng)面愈合早期肉芽組織形成過(guò)程中,膠原形成是極為重要的環(huán)節(jié),膠原不斷合成、分泌、改構(gòu)、更新,不斷改善修復(fù)組織的結(jié)構(gòu)和強(qiáng)度。即使在創(chuàng)面愈合后的幾周內(nèi)甚至若干年,膠原還在改建,直到受創(chuàng)組織最后恢復(fù)。首先在成纖維細(xì)胞內(nèi)合成前膠原,前膠原內(nèi)富含脯氨酸和賴氨酸殘基,其中一半左右被羥化為羥脯氨酸。肉芽組織中大量的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞本身能產(chǎn)生纖溶酶原激活劑和膠原酶,促進(jìn)膠原的生成。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)量單位組織塊中羥脯氨酸的含量將直接反應(yīng)創(chuàng)面局部膠原的沉積[12-13]。

中醫(yī)學(xué)、中醫(yī)藥的科學(xué)價(jià)值被國(guó)際醫(yī)學(xué)界所公認(rèn),祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在外科的應(yīng)用確實(shí)收到了良好的效果,東北吉林又是地道藥材鹿茸的產(chǎn)地。隨著西醫(yī)外科學(xué)的發(fā)展和對(duì)皮膚創(chuàng)傷研究的深入,如何促進(jìn)皮膚外傷一期愈合或在皮膚創(chuàng)傷的早期,達(dá)到理想的皮膚愈合狀況,是目前需要迫切解決的問(wèn)題。當(dāng)前,中西醫(yī)結(jié)合達(dá)的治療理念已經(jīng)取得了很高的社會(huì)、經(jīng)濟(jì)效益。利用我們國(guó)家的優(yōu)勢(shì),結(jié)合西醫(yī)學(xué)的先進(jìn)手段和理論觀點(diǎn),走自主創(chuàng)新的路是可持續(xù)發(fā)展理論的發(fā)揚(yáng)光大。

參考文獻(xiàn):

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基金項(xiàng)目:

廣東省中醫(yī)藥局立項(xiàng)編號(hào):2010308

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