張慧云，馬朝陽，*，王洪新，2

（1.江南大學食品學院，江蘇無錫214122；2.食品科學與技術國家重點實驗室，江蘇無錫214122）

玫瑰紅景天在中國和東歐國家是一種有名的傳統(tǒng)藥用植物，大量研究表明其具有抗疲勞、耐缺氧、增強學習和記憶、興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)、改善睡眠、預防高原病、抗癌等多種生理功能，是一種很受歡迎的藥食兩用“適應原”植物[1]。主要的活性成分包含紅景天苷（salidroside）及其苷元酪醇（ptyrosol）、酪薩維（rosavin）等。前蘇聯(lián)學者對該種紅景天作了較多的研究，并提出rosavin在紅景天屬植物中只有玫瑰紅景天中含有[2]。文獻報道紅景天屬植物普遍有抗疲勞和抗缺氧作用，但僅有玫瑰紅景天具有雙向調(diào)節(jié)和延緩衰老的藥理活性，并推斷這種特殊活性與所含的rosavin、rosin和rosarin等苯丙素苷類成分有關[3]。目前有關rosavin的研究較少，黎代余等首次探討了含有rosavin的紅景天與不含有rosavin的大花紅景天在藥理作用方面是否存在差異[4]，但僅從力竭游泳實驗進行對比，且給藥時間只有五天。為了更合理科學地評價兩種不同提取物藥理作用的異同，仍需進一步研究。有大量文獻報道了紅景天苷的抗疲勞效果[5-9]，其中，馬莉等[10]報道了紅景天苷抗疲勞作用的最適劑量。本實驗以紅景天苷作為陽性對照，對rosavin的抗疲勞效果進行系統(tǒng)評價，為玫瑰紅景天功能食品的開發(fā)及應用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

紅景天苷、rosavin 由本實驗室經(jīng)過柱層析制備，HPLC檢測純度90%以上；清潔級雄性昆明種小鼠（體重：20±2g）上海斯萊克實驗動物有限責任公司；乳酸（LA）試劑盒、肌糖原及肝糖元測定試劑盒、血尿素氮（urea nitrogen，BUN）測定試劑盒 南京建成生物工程研究所；其余試劑均為分析純。

低溫高速離心機 上海安亭科學儀器廠；超低溫冷凍冰箱 美國INVETRO公司；數(shù)顯恒溫水箱常州榮冠實驗分析儀器廠；UV-2100紫外分光光度計 上海榮豐科學儀器有限公司；游泳箱 80cm×60cm×40cm（L/W/H）。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗動物的分組及飼養(yǎng) 選用健康小鼠150只，預飼一周后，根據(jù)體重隨機分成5組，每組30只。正常對照組每天0.9%生理鹽水灌胃，rosavin低、中、高劑量組（90、180、360mg/kg mbrosavin），紅景天苷組180mg/kg mb。每天上午灌胃給藥，給藥劑量為0.1mL/10g mb，連續(xù)30d。小鼠同室分籠飼養(yǎng)，灌胃期間自由取食和飲水[11]。環(huán)境溫度控制在（23±2℃），濕度60%±5%，光照12/24h。

1.2.2 小鼠負重游泳實驗 末次灌胃30min后，每組取10只小鼠，尾根部負其體重5%的鉛皮，放入水溫為25℃水深35cm的游泳箱中游泳。參照MCARDLE推薦的力竭判斷標準，即小鼠頭部沉入水中，經(jīng)10s仍不能返回水面視為力竭。記錄游泳開始時間至力竭的時間作為小鼠游泳時間。

1.2.3 肌肉乳酸含量測定 末次灌胃30min后，每組隨機選10只小鼠，在其尾根部負小鼠體重4%的鉛皮，放入30℃、水深35cm的游泳箱中游泳，10min后取出。頸椎脫臼處死，解剖取腿部肌肉100mg，加0.9mL生理鹽水，勻漿，4000r/min離心10min，取上清液。用試劑盒測定乳酸含量。

1.2.4 肝糖原、肌糖原含量測定 每組隨機選取10只小鼠，末次灌胃30min后，將小鼠放入30℃的游泳箱中無負重游泳90min，安靜60min，頸椎脫臼處死，解剖取肝臟及股四頭肌，生理鹽水漂洗，濾紙吸干，稱重，然后進行肝糖原、肌糖原測定。

1.2.5 血清尿素氮含量測定 將小鼠放入30℃的游泳箱中無負重游泳90min，休息60min后，摘眼球取血，離心，取血清。具體測定嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.3 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析采用SPSS13.0軟件進行方差分析和多重比較，結(jié)果以±SD表示，顯著水平為p＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 對小鼠力竭游泳時間的影響

由表1可見，rosavin組低中高3個劑量組與對照組相比，均可顯著延長小鼠游泳時間，其中rosavin高劑量組作用效果最顯著，游泳時間是對照組的1.61倍。rosavin高劑量組與紅景天苷組差異無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）。

疲勞的最直接和最客觀的表現(xiàn)是運動耐力的下降，而力竭游泳時間一直以來被作為反映運動耐力的重要指標[12]。rosavin組小鼠游泳時間明顯比對照組小鼠游泳時間長，從宏觀上體現(xiàn)了rosavin有一定的抗疲勞能力。

2.2 對小鼠運動后肌肉乳酸的影響

通過測定動物劇烈運動后肌乳酸含量，可以了解其乳酸的代謝情況，乳酸在肌肉中堆積的越多，疲勞的程度就越嚴重。由此可以推測出機體無氧代謝及有氧代謝能力，對其疲勞程度作出評價。因此可用肌乳酸作為評價抗疲勞功能性食品的一項指標[13-14]。

由表2可知，rosavin三個實驗組肌肉乳酸含量均低于對照組，rosavin劑量組與紅景天苷組對比，差異無顯著性，說明rosavin與紅景天苷均可以通過減少運動中乳酸的生成，達到延緩疲勞的效果，其中rosavin以高劑量組效果最明顯。

2.3 對小鼠運動后肝糖原、肌糖原的影響

糖與耐力運動有密切關系，機體的糖原儲備和血糖水平直接影響運動耐力[15]。有研究表明在中等強度或者長時間的運動中，血糖水平和骨骼肌糖原的減少，造成大腦皮層和骨骼肌工作能力下降，是運動疲勞的直接原因[16]。肝糖原的貯備對于維持運動時的血糖水平有著重要的作用，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)和一些體細胞僅能利用糖作為能源，考察運動后機體中糖原的貯備量可以衡量機體抗疲勞的程度。因此，測定動物機體肝糖原及肌糖原的貯備，也可作為反映疲勞程度的敏感指標[17]。

表1 Rosavin對小鼠力竭游泳時間的影響Table 1 Effect of rosavin on the exhaustive time in swimming mice

表2 Rosavin對運動后小鼠肌乳酸的影響Table 2 Effect of rosavin on muscle lactate in swimming mice

表3 Rosavin對運動后小鼠肝糖原和肌糖原的影響Table 3 Effect of rosavin on liver and muscle glycogen in swimming mice

表4 Rosavin對運動后小鼠血清尿素氮的影響Table 4 Effect of rosavin on serum BUN of mice after swimming

實驗結(jié)果如表3所示，rosavin低中高三劑量組小鼠運動后肝糖原均明顯高于正常對照組，中高劑量組有顯著差異（p＜0.05），而肌糖原含量雖有升高趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義。紅景天苷陽性對照組小鼠肝糖原、肌糖原含量均顯著高于正常對照組（p＜0.01、p＜0.05）。而rosavin高劑量組與紅景天苷肝糖原含量相當，兩者差異無統(tǒng)計學意義。結(jié)果表明rosavin能明顯提高機體肝糖原肌糖原的儲備能力，從而為機體提供更多的能量來達到抗疲勞的目的。

2.4 血清尿素氮含量的測定

尿素氮（BUN）是蛋白質(zhì)的代謝產(chǎn)物，一般在短時間運動時，蛋白質(zhì)不參與機體供能，而較長時間運動后，機體不能通過糖、脂肪代謝獲得足夠的能量時，蛋白質(zhì)與氨基酸就會進入分解代謝，使血清中尿素氮含量增加。通常血清尿素氮含量隨運動負荷增加而升高，身體適應性越差，則尿素氮產(chǎn)生的越多。

表4中，與對照組相比，rosavin低、中、高劑量組血清尿素氮均有降低趨勢，其中以高劑量組降低最明顯，有顯著性差異（p＜0.05）。高劑量組與紅景天苷組相比，兩者無顯著性差異，說明rosavin可以減少蛋白質(zhì)的分解，提高機體對運動負荷的適應能力。

3 結(jié)論

經(jīng)過以上實驗可以看出，rosavin具有延長小鼠力竭游泳時間，維持運動后小鼠肝糖原、肌糖原含量，降低運動后小鼠肌乳酸及血尿素氮水平，其中以高劑量作用效果最明顯。即rosavin可以增加糖原的儲備，清除積累的乳酸，提高機體糖代謝供能水平，減少蛋白質(zhì)供能比例。通過對rosavin與紅景天苷比較，rosavin高劑量組（360mg/kg mb）與紅景天苷（180mg/kg mb）抗疲勞效果相當，兩者在抗疲勞方面的差異性無統(tǒng)計學意義。根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》[18]可以判定rosavin具有緩解體力疲勞的作用，其機制可能與改善機體物質(zhì)代謝及提高機體有氧代謝能力有關，但其具體機制仍需進一步探討。

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