沈永龍,黃金田,戈賢平,王愛(ài)民,呂 富,蔡萬(wàn)存,沈楠楠

(1.鹽城工學(xué)院 江蘇省灘涂底棲生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 鹽城 224051;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 無(wú)錫漁業(yè)學(xué)院,江蘇 無(wú)錫 214081)

瘤背石磺(Onchidium struma)是一種棲息于海濱潮間帶的腹足綱貝類,具有極高的營(yíng)養(yǎng)、藥用和生態(tài)價(jià)值[1-2],主要分布于我國(guó)江蘇、上海等沿海灘涂地區(qū)。近年來(lái),由于環(huán)境污染和人為濫捕等原因,瘤背石磺資源量急劇下降,甚至已經(jīng)瀕臨滅絕。雖然瘤背石磺的室內(nèi)養(yǎng)殖已獲得初步成功[3],但苗種繁育仍存在“瓶頸”,因此,探索瘤背石磺苗種繁育的關(guān)鍵技術(shù)迫在眉睫。

目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)石磺研究主要集中于生理形態(tài)[4-5]、生態(tài)習(xí)性[6]、生殖繁育[7]以及神經(jīng)生物學(xué)[8]等方面,繁育技術(shù)方面的研究也相對(duì)較多,如沈和定等[9-10]研究了不同溫度和鹽度對(duì)石磺胚胎發(fā)育的影響,滕煒鳴等[11]和金春華等[12]分別報(bào)道了瘤背石磺灘涂生態(tài)繁殖和人工繁育的關(guān)鍵技術(shù),王金慶等[13]研究了石磺胚胎和幼蟲(chóng)發(fā)育的過(guò)程及特點(diǎn),Ruthensteiner[14]和Smith 等[15]對(duì)戴氏石磺(Onchidium damelii)、Deshpande等[16-17]和 Nanaware 等[18]對(duì)沃氏石磺(Onchidium verruculatum)的繁殖生物學(xué)進(jìn)行了研究,但迄今為止,對(duì)瘤背石磺的繁育尚未形成穩(wěn)定、成熟的技術(shù)體系。鑒于此,本試驗(yàn)旨在進(jìn)一步探索瘤背石磺受精卵的最佳孵化方式、最適培育密度以及其變態(tài)所需的最適附著基,進(jìn)而提高瘤背石磺受精卵的孵化率和幼蟲(chóng)存活率,為深入開(kāi)展瘤背石磺的人工繁育積累經(jīng)驗(yàn)。

1 材料和方法

1.1 受精卵的采集和處理

在瘤背石磺自然繁殖季節(jié)選擇來(lái)源于鹽城射陽(yáng)灘涂的規(guī)格均一的瘤背石磺性成熟個(gè)體作為親貝,用鹽度 5的海水洗凈后于養(yǎng)殖箱內(nèi)暫養(yǎng)馴化并淘汰品質(zhì)低劣的個(gè)體后,采用鋪設(shè)底泥、搭置瓦片等方式模擬生態(tài)環(huán)境進(jìn)行人工飼養(yǎng)[19],期間飼喂拌有海泥的螺旋藻(m: M/5: 1),并通過(guò)噴灑適量鹽度18海水的方式刺激其交配產(chǎn)卵。每日定時(shí)檢查養(yǎng)殖箱中瘤背石磺的攝食情況和產(chǎn)卵情況并清潔養(yǎng)殖箱,控制箱內(nèi)溫度(25～28℃)、鹽度(10～15)、相對(duì)濕度(80%以上)和光照強(qiáng)度(500 lx左右)。若發(fā)現(xiàn)產(chǎn)有新鮮卵塊,及時(shí)用刀片刮取并洗凈后用每升0.12萬(wàn)國(guó)際單位的慶大霉素浸泡 3 min,再將其置于鹽度 18的海水中進(jìn)行孵化。

1.2 試驗(yàn)材料及處理

孵化框: 取1 cm×1 cm×20 cm的木條若干,每4只木條用釘子制作成正邊形木框,再將與木框一樣大小的篩絹網(wǎng)(300目)粘到木框的一側(cè)并進(jìn)行編號(hào),注意木框和篩絹網(wǎng)之間不要留下縫隙,以免造成受精卵不必要的流失。使用前用150 mg/L KMnO4消毒1～3 h。

孵化池: 孵化池與親貝養(yǎng)殖箱一樣,均為體積150 L的長(zhǎng)方體聚乙烯塑料箱(長(zhǎng)×寬×高為70 cm×50 cm×40 cm),使用前與孵化框一樣消毒。

附著基: 準(zhǔn)備孔徑為1.0～1.2mm和1.2～1.5mm的海綿條,使用前經(jīng)過(guò)煮沸后,再用1～2 mg/L碘海水溶液消毒5～20 min。

藻種培養(yǎng): 選取小球藻(Chlorella vulgaris)、球等鞭金藻(Isochrysis zhanjiangensis.Hu.var.sp.)和牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri Lemmerman)等藻種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。開(kāi)口期投喂小球藻、球等鞭金藻和牟氏角毛藻,餌料密度分別為 22萬(wàn)、4.5萬(wàn)和 4.5萬(wàn)個(gè)/mL;當(dāng)受精卵發(fā)育至 8～15 d時(shí),每天投喂量分別增加至17萬(wàn)、9萬(wàn)和9萬(wàn)個(gè)/mL;以后各期投喂量分別增加至13萬(wàn)、13萬(wàn)和12萬(wàn)個(gè)/mL。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日常管理

1.3.1 不同孵化方式對(duì)孵化速率的影響

采用3種不同的方式(“噴淋”、“露空”和“梯籠”)進(jìn)行受精卵的孵化試驗(yàn)?！皣娏堋狈趸? 將鋪有受精卵的孵化框置于含有鹽度18海水的孵化池中,同時(shí)用水泵抽提海水至水面上方 20 cm處的軟管中,軟管每隔5 cm開(kāi)有小孔,從小孔噴出水流淋于卵塊表面,模擬自然條件下雨水的作用,刺激卵塊發(fā)育;“露空”孵化: 將受精卵置于底部墊有若干紗布的孵化框上孵化;“梯籠”孵化: 將鋪有受精卵的孵化框一層層疊加,每5個(gè)孵化框一組,每組用浸濕的紗布將孵化框包裹好。每天向“露空”孵化組和“梯籠”孵化組噴灑鹽度18的海水,使紗布始終保持濕潤(rùn)。每天定時(shí)觀察各組受精卵的孵化情況,記錄發(fā)育至相應(yīng)時(shí)期所需時(shí)間及形態(tài)變化,并及時(shí)除去死亡的胚胎。

1.3.2 不同培育密度對(duì)存活率的影響

用虹吸法對(duì)孵化出膜的幼蟲(chóng)進(jìn)行選優(yōu),并將選優(yōu)后的幼蟲(chóng)分為兩部分,分別移至A孵化池和B孵化池中進(jìn)行培育。其中A孵化池用于研究培育密度對(duì)存活率的影響試驗(yàn),B孵化池用于研究附著基對(duì)幼蟲(chóng)附著效果和存活率的影響試驗(yàn)。攪動(dòng)A孵化池水體,使幼蟲(chóng)均勻分布,然后分別在5個(gè)不同部位吸取水樣1 mL,對(duì)水樣中的幼蟲(chóng)進(jìn)行鏡檢計(jì)數(shù)。根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果從A孵化池量取一定的溶液并轉(zhuǎn)移至玻璃水族缸中,參照前期探索的結(jié)果,用鹽度 18的海水將其稀釋成不同密度梯度,分別為 30、40、50、60、70、80和90個(gè)/mL,每個(gè)梯度3個(gè)重復(fù)。每日換水兩次(6:00時(shí)和18:00時(shí)),每次換水1/2,換水前后水溫變化幅度低于 1℃,鹽度變化幅度低于 2,換水時(shí)用300目篩絹網(wǎng)過(guò)濾,防止幼蟲(chóng)的流失。換水后適量添加藻液,同時(shí)調(diào)節(jié)水體鹽度,使鹽度維持在 18左右。每天 6:00時(shí)進(jìn)行鏡檢,觀察記錄匍匐期幼蟲(chóng)密度并計(jì)算存活率,存活率 = 匍匐幼蟲(chóng)期密度/初始密度×100%。

1.3.3 不同孔徑海綿附著基對(duì)幼蟲(chóng)附著效果和存活率的影響

從B孵化池中量取適量的溶液,轉(zhuǎn)移至另外的9個(gè)孵化池中,用鹽度18的海水稀釋使其培育密度為50個(gè)/mL,將 9個(gè)孵化池平均分為 3組,每組 3 個(gè)重復(fù),當(dāng)有15%～20%的幼蟲(chóng)出現(xiàn)眼點(diǎn)時(shí),在隨機(jī)兩組孵化池中分別加入兩種不同孔徑的體積為 1 cm3的立方體海綿。經(jīng)前期大量探索發(fā)現(xiàn)海綿孔徑過(guò)低易使其吸水性能差且易浮于水面,因而海綿孔徑分別選取1.0～1.2 mm和1.2～1.5 mm兩種規(guī)格。海綿占孵化池水面的一半,另一組不加海綿。投放海綿后加大換水量,每天換水3次。每天6:00 時(shí)進(jìn)行鏡檢,觀察記錄附著情況并計(jì)算存活率,存活率 = 匍匐幼蟲(chóng)期密度/20%幼蟲(chóng)出現(xiàn)眼點(diǎn)時(shí)密度×100%。

1.3.4 胚胎發(fā)育和幼蟲(chóng)發(fā)育的觀察以及幼蟲(chóng)在各水層分布的變化規(guī)律

從受精卵孵化開(kāi)始至匍匐幼蟲(chóng)期,連續(xù)取樣觀察胚胎發(fā)育和幼蟲(chóng)發(fā)育狀況,記錄發(fā)育至相應(yīng)時(shí)期所需時(shí)間及形態(tài)變化,并進(jìn)行生物拍照。同時(shí),測(cè)定各水層中幼蟲(chóng)的數(shù)量,探索不同發(fā)育時(shí)期幼蟲(chóng)在各水層分布的變化規(guī)律,以便更好地了解瘤背石磺幼蟲(chóng)的總體發(fā)育狀況。具體做法: 待水體靜止后,用膠頭滴管分別吸取孵化池各水層水(表層水、中層水、底層水)1 mL,鏡檢觀察并記錄幼蟲(chóng)數(shù)量,同一水層隨機(jī)選取5個(gè)不同方位進(jìn)行測(cè)定。

1.3.5 日常管理

胚胎發(fā)育和幼蟲(chóng)發(fā)育過(guò)程中,通過(guò)遮光簾調(diào)節(jié)孵化室內(nèi)光照,使之維持在500 lx左右。培育期間所用海水均為鹽度18,溫度25～26 ℃的人工海水,每升水體中添加3 mg EDTA二鈉鹽,以防止重金屬離子在幼蟲(chóng)體內(nèi)的富集。由于代謝產(chǎn)物長(zhǎng)期積累可能影響水質(zhì),因此餌料投喂時(shí)遵循“少量多次”的原則,并定時(shí)對(duì)池底進(jìn)行吸污換水且每5～6 d倒池清底一次,每次換水前仔細(xì)檢查篩絹網(wǎng)是否磨損,發(fā)現(xiàn)破損后及時(shí)用膠布粘緊,以防幼蟲(chóng)漏網(wǎng)。另外,每日水體進(jìn)行連續(xù)微量充氣并攪動(dòng)水體4～5次,同時(shí)測(cè)定水體中的溶解氧(≥ 4.5 mg/L)、氨氮(≤ 0.1 mg/L)和pH(8.0～8.4),保證苗種正常培育。當(dāng)培育后期水質(zhì)較差時(shí),在孵化池中加入 0.08萬(wàn)～0.16萬(wàn)單位硫酸慶大霉素/L,防止水中病原菌的過(guò)度繁殖。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

原始數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2007初步整理后,采用SPSS Statistics V17.0中的單因素方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,并進(jìn)行 LSD多重比較。統(tǒng)計(jì)結(jié)果采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean ± SE)的形式表示,P＜0.05 認(rèn)為差異顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同孵化方式對(duì)孵化速率的影響

采用不同的孵化方式對(duì)瘤背石磺受精卵(圖 1-1)進(jìn)行孵化,并連續(xù)觀察受精卵的孵化狀態(tài)。結(jié)果表明,孵化方式不同,瘤背石磺受精卵的孵化速率相差很大。采用“露空”孵化方式和“噴淋”孵化方式孵化時(shí),發(fā)育至囊胚期(圖1-2)所需的時(shí)間基本一致,均為12 h,但采用“梯籠”孵化方式所需時(shí)間較長(zhǎng),為 20 h。當(dāng)受精卵發(fā)育至出膜面盤(pán)幼蟲(chóng)期(圖1-6)時(shí),采用“露空”孵化方式所需時(shí)間最短,僅需6 d,采用“梯籠”孵化方式時(shí)所需時(shí)間最長(zhǎng),需要9 d。受精卵發(fā)育至原腸期(圖1-3)、“蘑菇幼蟲(chóng)”期(圖1-4)、膜內(nèi)面盤(pán)幼蟲(chóng)期(圖 1-5)的孵化速率由高到低均依次為“露空”孵化方式、“噴淋”孵化方式和“梯籠”孵化方式(表1)。

2.2 不同培育密度對(duì)存活率的影響

由圖2可知,在瘤背石磺幼蟲(chóng)培育過(guò)程中,幼蟲(chóng)密度對(duì)存活率影響顯著(P＜0.05)。隨著孵化池中幼蟲(chóng)密度的升高,幼蟲(chóng)的存活率呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。用二次多項(xiàng)式回歸模型分析存活率與幼蟲(chóng)密度之間的關(guān)系,得到的回歸方程為: Y = ?0.0679X2+7.8214X ? 147.43 (R2= 0.9351)(圖 2),當(dāng) X =57.59時(shí),瘤背石磺的存活率最高,且當(dāng)55≤X≤61時(shí),瘤背石磺的存活率均大于 80%,因此瘤背石磺在幼蟲(chóng)培育過(guò)程中,培育密度為55～61個(gè)/mL時(shí)可最大限度提高存活率。

2.3 不同孔徑海綿附著基對(duì)幼蟲(chóng)附著效果和存活率的影響

由圖 3可知,以海綿作為瘤背石磺的附著基時(shí),附著效果良好,且大孔徑(1.2～1.5 mm)海綿的幼蟲(chóng)附著能力明顯高于小孔徑(1.0～1.2 mm)海綿。由圖4可以看出,大孔徑海綿組的幼蟲(chóng)存活率較高,為 61.8%,顯著高于小孔徑海綿組的幼蟲(chóng)存活率(P＜0.05);同時(shí),添加附著基的兩組孵化池中幼蟲(chóng)的存活率均顯著高于不添加附著基組的存活率(P＜0.05)。

2.4 幼蟲(chóng)在水層分布的變化規(guī)律

由圖5可知,瘤背石磺受精卵發(fā)育至第5天時(shí),表層水中幼蟲(chóng)含量大幅升高,直至第 10天時(shí),幼蟲(chóng)含量顯著下降,而此時(shí)底層水的幼蟲(chóng)含量開(kāi)始顯著升高,但升高幅度較表層水低,且在第 14天時(shí)開(kāi)始呈下降趨勢(shì)。對(duì)于中層水中幼蟲(chóng)的數(shù)量,僅在第5天至第14天時(shí)數(shù)量變化較為明顯,但變動(dòng)幅度仍相對(duì)較小,說(shuō)明瘤背石磺幼蟲(chóng)一般不在中層水活動(dòng)。當(dāng)受精卵發(fā)育至第16天后,表層水和中層水中幾乎觀察不到幼蟲(chóng),僅可見(jiàn)于底層水中。

表1 不同孵化方式對(duì)受精卵孵化速率的影響Tab.1 Effects of different incubation ways on hatching rate of fertilized eggs of O.struma

圖1 瘤背石磺受精卵的孵化Fig.1 Hatching of fertilized eggs of O.struma

3 討論

3.1 不同孵化方式對(duì)孵化速率的影響

瘤背石磺受精卵的孵化速率不僅受孵化期間的溫度、鹽度、濕度以及光照強(qiáng)度等因素影響[20],還與卵群的陰干刺激和新鮮海水刺激密切相關(guān)。Smith等[15]報(bào)道戴氏石磺從卵裂期至囊胚期發(fā)育所需時(shí)間僅為6 h,而瘤背石磺受精卵發(fā)育至相同時(shí)期時(shí)所需時(shí)間比戴氏石磺長(zhǎng)兩倍,這可能是因?yàn)榱霰呈桥c戴氏石磺所處的緯度不同,有一定的溫度差異,從而引起的發(fā)育速率不同。本試驗(yàn)中“噴淋”孵化雖可模擬自然雨水的沖洗作用,但所需時(shí)間較“露空”孵化方式長(zhǎng),其主要原因可能是“露空”孵化方式在孵化過(guò)程中溫度相對(duì)較高,并伴有一定的陰干刺激,因而發(fā)育速率較快,這說(shuō)明新鮮海水刺激方式和陰干刺激方式對(duì)瘤背石磺受精卵的孵化具有協(xié)同作用。另外,滕煒鳴等[11]對(duì)瘤背石磺的灘涂生態(tài)繁殖的研究也表明濕潤(rùn)泥土上的幼蟲(chóng)出膜速度要快于水體中,因此可以推斷,陰干刺激對(duì)促進(jìn)瘤背石磺受精卵的孵化作用相對(duì)較大。對(duì)于“梯籠”孵化方式,其孵化速率從受精卵開(kāi)始分裂時(shí)就顯著低于“露空”孵化和“噴淋”孵化,這可能是因?yàn)榉趸虔B加后,單位空間內(nèi)受精卵的密度相對(duì)較高,從而產(chǎn)生環(huán)境脅迫作用,同時(shí)其釋放的代謝產(chǎn)物不斷累積,污染了孵化環(huán)境,從而使受精卵孵化速率明顯降低。

圖2 不同培育密度對(duì)存活率的影響Fig.2 Effect of different nurture density on the survival rate of larvae hatched

圖3 不同孔徑海綿附著基附著的幼蟲(chóng)數(shù)量Fig.3 The amount of larvae attached to different pore size sponge

圖4 不同附著基對(duì)存活率的影響Fig.4 Effect of different pore size sponge on the survival rate of larvae hatched

圖5 瘤背石磺幼蟲(chóng)在水層中的變化規(guī)律Fig.5 The variation of larvae distribution in the water layer

3.2 不同培育密度對(duì)存活率的影響

眾所周知,密度因子對(duì)幼蟲(chóng)培育產(chǎn)生的影響主要表現(xiàn)在兩個(gè)方面: 一是個(gè)體之間直接對(duì)空間和食物的競(jìng)爭(zhēng);二是影響環(huán)境,環(huán)境因子又反作用于自身[21],從而對(duì)幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速率、存活率、變態(tài)率和存活率等產(chǎn)生影響。趙越等[22]對(duì)四角蛤蜊的研究結(jié)果顯示幼蟲(chóng)的存活率和變態(tài)率隨著培育密度的增大而降低,發(fā)育時(shí)間隨著密度的增加而延長(zhǎng),本試驗(yàn)與此基本一致。周琳等[23]對(duì)青蛤的研究表明其培育密度為6～11個(gè)/mL時(shí)孵化率最高,生長(zhǎng)速率最快;閆喜武等[24-25]對(duì)長(zhǎng)竹蟶和菲律賓蛤仔以及李華林等[26]對(duì)長(zhǎng)牡蠣等的研究結(jié)果顯示,其最適的幼蟲(chóng)培育密度分別為5～10個(gè)/mL、6～10個(gè)/mL和6～12個(gè)/mL,由此可以看出雙殼類幼蟲(chóng)培育的最適密度為 6～10個(gè)/mL左右。但瘤背石磺幼蟲(chóng)存活率最高時(shí)的培育密度與此相差較大,為57.59個(gè)/mL左右,顯著高于其他貝類的幼蟲(chóng)培育密度,這可能是因?yàn)閯偝瞿さ牧霰呈怯紫x(chóng)卵黃粒充滿貝殼,其生物量相對(duì)較低;同時(shí)其幼蟲(chóng)與方斑東風(fēng)螺和糙海參等幼蟲(chóng)相比相對(duì)偏小(瘤背石磺自由生活面盤(pán)幼蟲(chóng)平均殼長(zhǎng)×殼高為180.2 μm×177.2 μm[7];方斑東風(fēng)螺剛出膜幼蟲(chóng)殼長(zhǎng)428.7 μm±10.6 μm[27];糙海參初耳幼體體高 350～420 μm[28]),使其耗氧率降低,且在瘤背石磺幼蟲(chóng)培育過(guò)程中,及時(shí)換水并清除孵化池中的代謝廢物,消除了環(huán)境脅迫對(duì)幼蟲(chóng)影響,從而使培育密度可以達(dá)到較高水平。

3.3 不同孔徑海綿附著基對(duì)幼蟲(chóng)附著效果和存活率的影響

貝類幼蟲(chóng)經(jīng)過(guò)附著變態(tài)后,其外部形態(tài)、內(nèi)部構(gòu)造、生理機(jī)能和生活習(xí)性等方面都發(fā)生了相當(dāng)大的變化。在附著變態(tài)過(guò)程中不僅需要消耗大量的能量、適宜的附著基,更重要的是尋找到附著基的時(shí)機(jī),一般瘤背石磺眼點(diǎn)出現(xiàn)時(shí),幼蟲(chóng)出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)遲緩現(xiàn)象,當(dāng)有 15%～20%眼點(diǎn)出現(xiàn)時(shí)即是附著基投放的最佳時(shí)機(jī)。影響幼蟲(chóng)附著變態(tài)的因素很多,主要有生物因子(如幼蟲(chóng)行為)、物理因子[29-31](溫度、鹽度等)、化學(xué)因子[32](如同種個(gè)體分泌物)以及微生物膜[33]等。金春華等[12]研究了不同附著基對(duì)瘤背石磺幼蟲(chóng)的附著效果,結(jié)果顯示懸浮球和六角蜂窩對(duì)瘤背石磺幼蟲(chóng)的附著效果最好。本試驗(yàn)采用不同孔徑的海綿作為附著基,發(fā)現(xiàn)大孔徑(1.2～1.5 mm)海綿對(duì)瘤背石磺幼蟲(chóng)的附著效果較好,其最終存活率可達(dá)到 61.8%,顯著高于添加小孔徑(1.0～1.2 mm)海綿的孵化池的幼蟲(chóng)存活率。這說(shuō)明大孔徑海綿表面更能使瘤背石磺幼蟲(chóng)產(chǎn)生適應(yīng)性,或者說(shuō)瘤背石磺幼蟲(chóng)對(duì)大孔徑海綿的表面結(jié)構(gòu)更具有敏感性,促使其體內(nèi)分泌有關(guān)激素,誘導(dǎo)幼蟲(chóng)完成變態(tài)過(guò)程。同時(shí),大孔徑海綿附著的幼蟲(chóng)多,其分泌的能夠誘導(dǎo)同種幼蟲(chóng)附著的分泌物也較多,從而產(chǎn)生了“群聚行為”,誘導(dǎo)更多的幼蟲(chóng)附著變態(tài)。另外,大孔徑海綿所具有的有效表面積較大,吸濕性較好,更利于幼蟲(chóng)的附著,從這方面看,大孔徑海綿的附著效果較小孔徑海綿的好。

3.4 幼蟲(chóng)在水層分布的變化規(guī)律

貝類浮游幼蟲(chóng)在水體中的垂直變化規(guī)律主要與趨光性、餌料分布等因素有關(guān)。瘤背石磺同其他腹足綱貝類一致[34],其幼蟲(chóng)具有階段浮游性,面盤(pán)幼蟲(chóng)期貝殼形成開(kāi)始,瘤背石磺幼蟲(chóng)的浮游能力減弱,面盤(pán)開(kāi)始退化,足開(kāi)始發(fā)育,幼蟲(chóng)逐漸由浮游生活轉(zhuǎn)變?yōu)橘橘肷?、正趨光性轉(zhuǎn)變?yōu)樨?fù)趨光性,由此形成幼蟲(chóng)由表層水向底層水轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象。對(duì)于中層水中的幼蟲(chóng)數(shù)量,變動(dòng)幅度相對(duì)較小且無(wú)規(guī)律,這可能是由于中層水中幼蟲(chóng)數(shù)量的變化只是大量幼蟲(chóng)在表層水中活動(dòng)的結(jié)果,當(dāng)幼蟲(chóng)數(shù)量較少時(shí),并不會(huì)出現(xiàn)在中水層。因此,瘤背石磺幼蟲(chóng)在水層中的變化規(guī)律與幼蟲(chóng)的發(fā)育時(shí)期密切相關(guān),掌握瘤背石磺幼蟲(chóng)的水層分布狀況對(duì)瘤背石磺的幼蟲(chóng)發(fā)育狀況、提高瘤背石磺幼蟲(chóng)成活率具有重要輔助作用。

4 結(jié)論

綜上所述,“露空”孵化方式能顯著縮短瘤背石磺受精卵孵化所需時(shí)間,從而驗(yàn)證了陰干刺激和新鮮海水刺激對(duì)瘤背石磺受精卵的孵化具有協(xié)同作用。其次,瘤背石磺幼蟲(chóng)期的最適培育密度與其他貝類相比差別較大,為55～61個(gè)/mL。同時(shí),在幼蟲(chóng)附著變態(tài)時(shí)期,幼蟲(chóng)對(duì)大孔徑海綿附著基敏感性較強(qiáng),附著效果較好,存活率較高。另外,瘤背石磺幼蟲(chóng)在水層中的分布變化與幼蟲(chóng)的發(fā)育時(shí)期具有一致性,觀察幼蟲(chóng)的水層分布情況能夠更準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)幼蟲(chóng)發(fā)育狀況。

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