馬海霞 高景順 (義馬煤業(yè)集團(tuán)公司總醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 義馬 472300)

不穩(wěn)定性心絞痛與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)。以老年患者較為多見(jiàn)，而老年患者往往伴隨其他多種慢性疾病，如高血壓、糖尿病等，其對(duì)疾病的抵抗能力明顯降低。目前臨床研究顯示血鏈球菌感染是除血脂異常外另一項(xiàng)可誘發(fā)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化形成的危險(xiǎn)因素〔1〕。本文通過(guò)對(duì)老年不穩(wěn)定性心絞痛患者口腔內(nèi)的血鏈球菌進(jìn)行檢測(cè)，以期總結(jié)出血鏈球菌與不穩(wěn)定性心絞痛嚴(yán)重程度的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 于2011年1月至2012年1月在我院心內(nèi)科住院行冠狀動(dòng)脈造影后明確診斷為冠心病的不穩(wěn)定性心絞痛患者中隨機(jī)選擇50例，組成不穩(wěn)定性心絞痛組，同時(shí)從我院體檢中心隨機(jī)選取年齡段匹配的體檢者30例，組成對(duì)照組。不穩(wěn)定性心絞痛組中，年齡62～84(平均67.23)歲，其中冠狀動(dòng)脈單支狹窄者19例，兩支狹窄者18例，三支狹窄者13例。對(duì)照組年齡65～83(平均68.15)歲。兩組在性別、年齡、吸煙等基礎(chǔ)因素比較，未見(jiàn)顯著差異。見(jiàn)表1。

1.2 標(biāo)本采集 受檢者知情同意。不穩(wěn)定性心絞痛組行冠狀動(dòng)脈造影術(shù)后，于術(shù)后第2天下午3:00左右，留取非刺激狀態(tài)下的口腔唾液0.5 ml。同時(shí)在患者應(yīng)用清水清潔口腔后，留取患者牙齦下方的菌斑。健康體檢者在體檢當(dāng)日下午3:00左右，引用同樣方法留取口腔唾液和牙齦下菌斑。并立即送入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行接種。

表1 兩組基礎(chǔ)因素分析(n)

1.3 標(biāo)本培養(yǎng) 所有放置標(biāo)本的標(biāo)本瓶均予充分震蕩混勻，后應(yīng)用林格液稀釋?zhuān)僖合♂屩?0-4倍，牙齦下菌斑稀釋至10－2倍，并將稀釋后的標(biāo)本接種至NAYS-B培養(yǎng)基。隨后將培養(yǎng)皿置于混合有90%N2和10%CO2的環(huán)境中，37℃恒溫培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)皿恒溫培養(yǎng)24 h后，從培養(yǎng)皿中提取已嵌入培養(yǎng)基中的菌落轉(zhuǎn)種至血培養(yǎng)基中，再次放入混合有90%N2和10%CO2的37℃恒溫環(huán)境中，再次培養(yǎng)48 h。

1.4 標(biāo)本鑒定 在于NAYS-B培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h后計(jì)算血鏈球菌的總菌數(shù);在血培養(yǎng)基培養(yǎng)72 h后，從培養(yǎng)皿中挑取菌落，應(yīng)用隨機(jī)引物聚合酶鏈反應(yīng)進(jìn)行菌種鑒定。對(duì)照菌種均購(gòu)自上海第二醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)研究所。

1.5 觀察指標(biāo) 首先對(duì)血鏈球菌總菌數(shù)與不穩(wěn)定性心絞痛發(fā)生的相關(guān)性進(jìn)行分析。隨后分析不穩(wěn)定性心絞痛嚴(yán)重程度與各菌種間的相關(guān)性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件，計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)以百分率表示，應(yīng)用 t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)及相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組血鏈球菌數(shù)比較 兩組唾液及牙齦菌斑中培養(yǎng)出的菌數(shù)未見(jiàn)明顯差異(P＞0.05)。見(jiàn)表2。

2.2 兩組各型血鏈球菌比較 兩組在唾液及牙齦菌斑中緩癥鏈球菌和口腔鏈球菌均無(wú)明顯差異(P＞0.05)。而在不穩(wěn)定性心絞痛組唾液和牙齦菌斑中血鏈球菌和高氏鏈球菌檢出率明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。見(jiàn)表3。

2.3 血鏈球菌數(shù)與不穩(wěn)定性心絞痛嚴(yán)重程度 經(jīng)相關(guān)性分析后發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是在唾液中還是在牙齦菌斑中，其菌群數(shù)量與不穩(wěn)定性心絞痛均呈直線相關(guān)關(guān)系(P＜0.05)。見(jiàn)表4。

表2 兩組血鏈球菌數(shù)比較(CFU/L，±s)

表2 兩組血鏈球菌數(shù)比較(CFU/L，±s)

組別 n 唾液中總菌數(shù) 牙齦下菌斑菌數(shù)不穩(wěn)定性心絞痛組50 4 552.88±965.90 414.14±117.99對(duì)照 30 4 361.27±970.65 377.10±118.75 t/P值 0.857/0.3951)0.179/0.793

表3 兩組唾液、牙齦菌斑中鏈球菌陽(yáng)性比較(n)

表4 不穩(wěn)定性心絞痛患者不同嚴(yán)重程度比較(CFU/L，±s)

表4 不穩(wěn)定性心絞痛患者不同嚴(yán)重程度比較(CFU/L，±s)

組別 n 唾液中總菌數(shù) 牙齦下菌斑菌數(shù)單支狹窄19 3 593.89±367.94 318.00±101.90兩支狹窄 18 4 651.00±395.15 436.38±68.52三支狹窄 13 5 818.61±423.31 523.84±78.81 r/P值0.828/0.000 0.704/0.000

3 討論

血鏈球菌屬機(jī)會(huì)致病菌，其定植于口腔內(nèi)，是維持口腔內(nèi)生態(tài)平衡的主要的細(xì)菌之一〔2，3〕。血鏈球菌主要分為血鏈球菌與高氏鏈球菌，口腔鏈球菌與緩癥鏈球菌兩大類(lèi)。目前無(wú)論在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中還是在臨床觀察中均已證實(shí)血鏈球菌可誘發(fā)血液中血小板的聚集〔4，5〕。老年患者由于其對(duì)疾病的抵抗力明顯降低，其感染鏈球菌的可能性更大，因此，及時(shí)監(jiān)測(cè)老年患者的血鏈球菌水平對(duì)改善老年患者的預(yù)后具有十分重要的意義。通過(guò)血液培養(yǎng)的方式來(lái)檢測(cè)血鏈球菌感染的檢出率并不高，所以本研究采取提取口腔唾液及牙齦菌斑部位的血鏈球菌的方式來(lái)分析血鏈球菌與不穩(wěn)定性心絞痛患者的相關(guān)性。

本研究提示老年患者不穩(wěn)定性心絞痛的發(fā)生與唾液及牙齦菌斑中的總菌數(shù)方面未見(jiàn)明顯相關(guān)性，但是與血鏈球菌和高氏鏈球菌存在顯著的相關(guān)性。其原因可能為在所見(jiàn)測(cè)的總菌數(shù)中包含了與不穩(wěn)定性心絞痛發(fā)生無(wú)關(guān)的緩癥鏈球菌和口腔鏈球菌的菌數(shù)，所以導(dǎo)致在總菌數(shù)方面為體現(xiàn)出明顯的相關(guān)性。由此可以看出，血鏈球菌影響著不穩(wěn)定性心絞痛的發(fā)生，而此種影響主要集中在血鏈球菌與高氏鏈球菌上。目前對(duì)于血鏈球菌對(duì)不穩(wěn)定性心絞痛的影響機(jī)制尚未完全明確，但是目前最主要的觀點(diǎn)為促血小板聚集學(xué)說(shuō)及炎性介質(zhì)學(xué)說(shuō)〔6〕。促血小板聚集學(xué)說(shuō)認(rèn)為，在血鏈球菌的表面存在血小板抗原，而體內(nèi)的腎上腺素等激素可促進(jìn)血小板與血鏈球菌表面的抗原相結(jié)合，誘發(fā)血小板聚集的產(chǎn)生。而炎性介質(zhì)學(xué)說(shuō)則認(rèn)為，在血鏈球菌感染時(shí)，機(jī)體可釋放大量的炎性介質(zhì)，同時(shí)位于細(xì)菌細(xì)胞壁上的脂多糖，也隨細(xì)菌感染入血，兩者同時(shí)作用于血管內(nèi)皮，均促進(jìn)血管平滑肌的增殖和脂肪的變性，同時(shí)還對(duì)機(jī)體的凝血功能及血小板的聚集起到一定的刺激作用。而血小板聚集及炎性介質(zhì)均為不穩(wěn)定性心絞痛患者的重要危險(xiǎn)因素〔7，8〕，最終可導(dǎo)致血栓的形成而誘發(fā)不穩(wěn)定性心絞痛的產(chǎn)生。

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