周細根，梁生林，胡存華，顏峰光 ，李慶耀，羅 婷，肖小梅

（井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)院a.藥理學(xué)教研室；b.2008級藥學(xué)本科班，江西 吉安 343000）

樟樹是中國一種常見的經(jīng)濟樹種，其來源廣泛，性溫、味辛；能通竅辟穢、溫中止痛，利濕殺蟲；用于寒濕吐瀉，胃腹疼痛；外用治疥、癬、齲齒作痛。樟樹是提煉化工原料樟腦、樟腦油、芳樟醇最重要的原料樹種［1］。為了探究樟樹更多的藥理作用，本實驗對樟樹子水提液的抗驚厥作用進行了研究。

1 材料

1.1 動物

健康小鼠60只（南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物實驗科學(xué)部提供），雌雄不限，體質(zhì)量18～30 g。

1.2 藥品與試劑

新鮮樟樹子（采自于井岡山大學(xué)校園內(nèi)的樟樹的成熟種子），0.05%地西泮溶液，生理鹽水。

1.3 主要儀器

JTC-1型驚厥與痛覺實驗交流電刺激器（成都儀器廠生產(chǎn)），天平，注射器，常規(guī)玻璃儀器等。

2 實驗方法

2.1 藥物配制

2.1.1 樟樹子水提液的制備

稱取新鮮樟樹子200 g，洗凈，搗碎，置于1000 mL蒸餾器中，加水浸泡2 h；連接索式提取器，加入400 mL蒸餾水直接加熱蒸餾，回流2～3 h，收集水提液，過濾，濃縮至 20 mL（相當于含生藥10 g·mL-1）［2］。再將濃縮液配置成高、中、低（10.0、7.5、5.0 g·mL-1）3個劑量的樟樹子水提液。

2.1.2 地西泮溶液的制備

取0.05%地西泮溶液適量，用蒸餾水配成0.0005 g·mL-1。

2.2 分組與給藥

將60只小鼠，按體質(zhì)量分層、采用隨機數(shù)字表法分為5組，每組12只，即生理鹽水對照組（A組），地西泮溶液組（B組），高、中、低劑量樟樹子水提液組（分別為C、D、E組）。每組小鼠均腹腔注射給予相應(yīng)的實驗藥物，給藥量均為 0.1 mL·（10 g）-1。用藥前及用藥后15、30、60 min測量小鼠驚厥閾值。

2.3 小鼠驚厥閾值的測量

將JTC-1型驚厥與痛覺實驗交流電刺激器輸出線的鱷魚夾尖端用生理鹽水浸濕，2個夾子中的1個夾于小鼠雙耳，另1個夾住下頜部。開啟電源開關(guān)，輸出電壓調(diào)到30 V，刺激時間設(shè)為0.2 s，刺激周期設(shè)為單周期。按動“開始/停止”按鍵通電刺激，通電時觀察小鼠是否發(fā)生驚厥 （小鼠的驚厥發(fā)生過程:僵直屈曲期→后肢伸直期→陣攣期→恢復(fù)期，以后肢強直作為驚厥的指標）。刺激后，若小鼠沒有產(chǎn)生后肢強直驚厥，則應(yīng)適當調(diào)大輸出電壓繼續(xù)刺激，直至產(chǎn)生后肢強直驚厥，記錄實驗電壓參數(shù)作為小鼠的驚厥閾值；對每只小鼠的驚厥閾值各測2次，每次間隔5 min，取其平均值為小鼠的驚厥閾值。

2.4 統(tǒng)計學(xué)方法

3 結(jié)果

與A組比較，給藥前各組驚厥閾值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；B、C、D 組給藥后 15、30、60 min與A組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01或 P＜0.05），E 組給藥后 15、30、60 min 與 A 組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。與自身給藥前比較，A、E組給藥后15、30、60 min差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），B、C、D 組給藥后 15、30、60 min 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01 或 P＜0.05），見表 1。

表1 各組給藥前后驚厥閾值比較 ,U/V

表1 各組給藥前后驚厥閾值比較 ,U/V

*P＜0.01，**P＜0.05 與 A 組比較；△P＜0.01，△△P＜0.05 與同組給藥前比較。

組別 n 給藥前 給藥后15 min 30 min 60 min A 組 12 38.5±5.3 38.1±5.8 39.2±4.6 37.8±4.5 B 組 12 39.7±6.856.75±7.5﹡△ 60.6±6.4﹡△ 53.4±7.3﹡△C 組 12 37.6±4.3 52.1±6.1﹡△ 57.7±5.5﹡△ 59.2±6.6﹡△D 組 12 38.3±2.6 45.7±5.0﹡﹡△△ 48.6±4.4﹡﹡△△ 47.2±4.8﹡﹡△△E 組 12 39.1±3.9 38.7±6.2 40.3±4.1 39.30±5.8

4 討論

為探討樟樹子是否具有抗驚厥作用，本實驗采用電刺激法驚厥模型對樟樹子水提液進行了抗驚厥作用的初步研究，實驗結(jié)果顯示，高劑量樟樹子水提液明顯提高電刺激法所致小鼠的驚厥閾值，與生理鹽水對照組比較和自身給藥前比較差異極顯著，表明樟樹子水提液具有明顯的抗驚厥作用，為其進一步研究提供了初步的實驗依據(jù)。其抗驚厥有效成分及作用機制有待于進一步研究［3］。

［1］肖姍美，羅小會，楊曉東.樟樹葉揮發(fā)油B-環(huán)糊精包合物的制備研究［J］.光譜實驗室，2008，25（4）:735-737.

［2］張炯炯，李功華，李躍軍.樟樹自然脫落葉揮發(fā)油提取工藝的研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2009，28（8）:1651-1653.

［3］王莉，徐寧，孫娟，等.12種中藥乙醇提取物抗驚厥作用和時間-體存生物當量的比較研究［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2010，8（4）:460-462.