雷琳 郭靜霞 任巧華 王欣

視黃醇結(jié)合蛋白4(retinol binding protein，RBP-4)是一種小分子蛋白，分子量為21 kDa。其主要是由肝細(xì)胞合成，并也表達(dá)于在骨骼肌和脂肪組織，RBP-4通過視黃醇和運(yùn)甲狀腺蛋白從而送到組織中去。研究發(fā)現(xiàn)RBP-4和肥胖癥以及2型糖尿病有著密切的關(guān)系，RBP-4在糖尿患者體內(nèi)升高，伴有微量白蛋白尿的糖尿病患者其水平更高，血漿RBP-4的濃度受腎臟疾病影響［1］。糖尿病腎病患者早期就出現(xiàn)腎臟損害，因此血液RBP-4是診斷早期糖尿病腎病的一個較敏感的指標(biāo)［2，3］。本研究通過對糖尿病患者血尿RBP-4含量來進(jìn)一步研究其對于腎臟疾病的早期診斷和病情評估的重要意義。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選取我院2010年6月至2011年10月符合納入標(biāo)準(zhǔn)的糖尿病腎病患者(A組)60例，男30例，女30例;年齡52～75歲，平均年齡(63±12)歲;糖尿病無腎病患者(B組)60例，男36例，女24例;年齡48～77歲，平均年齡(63±14)歲;健康無病者(C組)60例，男29例，女31例;年齡49～78歲，平均年齡(64±14)歲。3組間年齡分配，性別構(gòu)成基本匹配，具有可比性。

1．2 入選與排除標(biāo)準(zhǔn)

1．2．1 入選標(biāo)準(zhǔn):2組糖尿病患者入選標(biāo)準(zhǔn)按1997年美國糖尿病協(xié)會糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn):有糖尿病癥狀，并且1 d中任何時候血漿葡萄糖濃度≥11．1 mmol/L，或空腹至少8 h后血漿葡萄糖濃度≥7．0 mmol/L，或OGTT 2 h 血糖濃度≥11．1 mmol/L，糖尿病腎病以24 h尿白蛋白排泄率分成糖尿病無腎病組(24 h尿白蛋白排泄率＜200 μg/min)，糖尿病腎病組(24 h尿白蛋白排泄率≥200 μg/min)。

1．2．2 排除標(biāo)準(zhǔn):糖尿病患者無糖尿病酮癥酸中毒、高滲性昏迷等急性并發(fā)癥，無肝臟疾患、肺間質(zhì)纖維化、膠原性疾病及腫瘤。

1．3 方法 受試者均清晨空腹抽取靜脈血液5 ml，37℃30 min后離心(3 000 r/min)分離血清用于血液RBP-4的測定。留24 h尿液于干凈容器中，混勻后準(zhǔn)確記錄總尿量(加10 ml甲苯防腐)，各取1 ml測定尿蛋白排泄(UAE)，并計算尿蛋白排泄率(UAER)，同時留取晨尿，離心取上清液，用于尿液RBP-4的測定。血清以及尿液中RBP-4均采用免疫透射比濁法進(jìn)行測定。儀器為日立7600全自動生化分析儀。試劑盒采用人活性結(jié)合型RBP-4酶聯(lián)試劑盒。血RBP-4參考值:(28±8)mg/L。

1．4統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SPSS 15．0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，采用t檢驗或秩和檢驗，多組間比較采用單因素方差分析(F)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

24 h UAER，B組與C組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0．05)，而A組則明顯高于B組和C組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)。糖尿病患者RBP-4都可升高，B組與C組比較升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05);A組與其他2組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0．05)。見表1。

表1 3組血液、尿液中RBP-4含量24 h UAER比較

3 討論

本研究認(rèn)為在糖尿病腎病中，血清及尿RBP-4的濃度有明顯的提高。與對照組相比，糖尿病腎病的RBP-4的濃度是明顯提升的。RBP-4存在于正常人體內(nèi)，在肝臟合成，腎臟代謝排出，其生理功能是維生素A的重要的載體蛋白，起到轉(zhuǎn)載、運(yùn)輸?shù)茸饔?。在肝?xì)胞外，RBP-4主要表達(dá)于骨骼肌和脂肪組織中。腎臟在維護(hù)整個人體內(nèi)環(huán)境的視黃醇的平衡中起著至關(guān)重要的作用。它是通過腎小球濾過和隨后將RBP-4重吸收到鄰近小管的方式來調(diào)節(jié)的。正常情況下，原尿中的 RBP-4約99．98%在腎近曲小管被重吸收，尿中 RBP-4的排出量取決于腎小管的重吸收功能。當(dāng)腎小球濾過膜或腎小管功能受損時，尿中RBP-4水平顯著增加，衰減的GFR會引起全身體循環(huán)中RBP-4的聚積。一個RBP-4復(fù)合物一旦和運(yùn)甲狀腺結(jié)合蛋白在微環(huán)境中結(jié)合成四聚體，就會減少腎臟對RBP-4的清除。在糖尿病腎病早期，尿RBP-4排泄增加先于微白蛋白尿出現(xiàn)，被認(rèn)為是反映早期腎損害的標(biāo)志。

糖尿病腎病患者較無腎臟損傷的糖尿病患者，其血清RBP-4水平明顯升高，提示RBP-4可能參與糖尿病腎病的進(jìn)展過程中，糖尿病患者由于內(nèi)分泌、滲透壓等長期失衡，腎小球濾過屏障以及腎小管的分解功能均受到損傷。腎小球的濾過功能下降，血中RBP-4相對升高［4，5］，相比其他檢測方法血RBP-4更加穩(wěn)定穩(wěn)定，比起易分解的尿微球蛋白等指標(biāo)，其更為可靠。作為靈敏檢測腎臟損傷的手段，其在肝功正常的前提下是理想的生化參考指標(biāo)。但成本相對高于傳統(tǒng)腎功檢測指標(biāo)，限制了其臨床推廣應(yīng)用。聯(lián)合檢測應(yīng)用于臨床可望在相對成本穩(wěn)定的基礎(chǔ)上代替部分腎活檢等有創(chuàng)操作。關(guān)于RBP-4的研究進(jìn)行了多層次多領(lǐng)域的基礎(chǔ)及臨床實踐［6，7］。

總之，本研究顯示2型糖尿病患者血尿RBP-4水平與進(jìn)展性的腎臟損傷有密切關(guān)系，可能成為其診斷及治療的一個特異性標(biāo)志物。

1 Raila J，Henze A，Spranger J，et al．Microalbuminuria is a major determinant of elevated plasma retinol-binding protein4 in type 2 diabetic patients．Kidney Int，2007，72:505-511．

2 Kim SH，Choi HJ，Im JA．Retinol-binding protein 4 responses during an oral glucose tolerance testing in women with gestational diabetes mellitus．Clin Chim Acta，2008，391:123-125．

3 Graham TE，Yang Q，Blüher M，et al．Retinol-binding protein 4 and insulin resistance in lean，obese，and diabetic subjects．N Engl J Med，2006，354:255-263．

4 Choy M，Younb S，Lee H，et al．Plasma rednol-binding protein 24 eoneentraions are elevated in human subjects with impaired glucose tolerance and type 2 diabetes．Diabetes Care，2006，29:2457-2461．

5 Jia W，Wu H，Bao Y，et al．Association of serum retinol-binding protein 4 and visceral adiposity in chinese subjects with and without type 2 diabetes．J Clin Endocrinol Metab，2007，92:3224-3229．

6 Wu H，Jia W，Bao Y，et al．Serum retinol binding protein 4 and nonalcoholic fatty liver disease in patients with type 2 diabetes mellitus．Diabetes Res Clin Pratt，2008，79:185-190．

7 Ziegeflmeier M，Kratzsch JU，Bachmann A，et al．Serum levels of adipokine retinol-binding protein-4 in relation to renal function．Diabetes Care，2007，30:2588-2592．