詹秀蘭

【摘 要】本文基于實(shí)驗(yàn)室水質(zhì)檢測(cè)操作中四個(gè)常規(guī)測(cè)定參數(shù)—微生物、高錳酸鹽指數(shù)、氨氮、總氮，在操作過(guò)程中對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響的注意事項(xiàng)進(jìn)行分析。

【關(guān)鍵詞】實(shí)驗(yàn)室；水質(zhì)檢測(cè)；參數(shù)

0.引言

水是生命之源、生產(chǎn)之要、生態(tài)之基。水質(zhì)檢測(cè)是我國(guó)進(jìn)行水資源管理與保護(hù)的重要基礎(chǔ)和手段，水質(zhì)檢測(cè)提供的水質(zhì)信息十分重要。

1.實(shí)驗(yàn)室微生物、高錳酸鹽指數(shù)、氨氮、總氮的測(cè)定

1.1微生物的檢測(cè)

微生物檢測(cè)是水質(zhì)檢測(cè)中一個(gè)不可忽視的部分，對(duì)于微生物檢測(cè)的精確程度要求也越來(lái)越高。怎樣提高微生物檢測(cè)率，我認(rèn)為可以從以下幾個(gè)方面考慮。

1.1.1嚴(yán)格用具的清洗

保證檢測(cè)用具的真正清潔、無(wú)菌是保證檢測(cè)精度的第一步。因此必須保證用具（包括采樣瓶、平皿、吸管等）清洗符合要求，因此不但清洗時(shí)要及時(shí)更換清洗液，使之達(dá)到一定濃度，而且用具清洗必須徹底，無(wú)殘留。

1.1.2加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌環(huán)境的控制，保持四壁光潔，嚴(yán)禁掛塵

大量細(xì)菌能夠附著在空氣中的粉塵中，濃度可以達(dá)到107個(gè)/L—108個(gè)/L，因此必須保持檢測(cè)室、尤其是無(wú)菌室四壁及地面光潔，無(wú)菌室內(nèi)還要盡量少放置物品，便于消毒殺菌。潮濕也是細(xì)菌滋生的一大因素。

1.1.3合理存放及使用培養(yǎng)基

大家使用的合成培養(yǎng)基，一般為粉末狀，應(yīng)置于5℃-25℃，避光、干燥保存，并在保質(zhì)期內(nèi)使用。若培養(yǎng)基粉末變黃、變粘，則很可能變質(zhì)。已配制好的培養(yǎng)基應(yīng)于4℃冰箱保存，并盡快使用。使用時(shí)，應(yīng)將培養(yǎng)基均勻加熱，使之熔化。若使用電爐加熱，應(yīng)避免熱糊。待其冷卻至60℃左右，方可進(jìn)行接種。培養(yǎng)基以其基體均一，色澤光亮、透明為優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基。

1.1.4定期殺菌、標(biāo)準(zhǔn)接種

每次接種前，將無(wú)菌室紫外燈打開(kāi)30min，打開(kāi)潔凈工作臺(tái)20min后，方可工作。工作完畢后，再將紫外燈打開(kāi)30min殺菌。經(jīng)常用酒精或來(lái)蘇爾進(jìn)行器具滅菌。另外，微生物檢測(cè)室盡量避免外來(lái)人員出入，減少空氣流動(dòng)，避免不潔空氣的帶入。在樣品移至無(wú)菌室前，先將采樣瓶體外壁連同盛裝樣品的容器一同用酒精棉擦拭，然后換上無(wú)菌工作服、拖鞋、手套、口罩等，再將其移至無(wú)菌室內(nèi)。接種時(shí)，動(dòng)作準(zhǔn)確，迅速，不要讓樣品灑落，造成交叉污染。

1.2高錳酸鹽指數(shù)的測(cè)定

1.2.1水浴加熱時(shí)間必須嚴(yán)格控制

采用酸性高錳酸鉀法測(cè)定高錳酸鹽指數(shù)，測(cè)定只是規(guī)定時(shí)間內(nèi)以高錳酸鉀為氧化劑處理水樣時(shí)所消耗的量，反應(yīng)時(shí)間將直接影響測(cè)定的結(jié)果，因此對(duì)樣品進(jìn)行水浴加熱時(shí)，一定要在水浴沸騰后將樣品放入水浴鍋中，水浴沸騰，開(kāi)始計(jì)時(shí)，并嚴(yán)格控制時(shí)間為30min±2min，以提高數(shù)據(jù)的精密性。若水浴加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，樣品測(cè)定值會(huì)增大、反之則減小。

1.2.2 KMnO4溶液的濃度必須準(zhǔn)確標(biāo)定

滴定時(shí)室溫下反應(yīng)慢，溶液加熱至70℃-80℃，但溫度不能高于90℃（酸性條件下，H2C2O4會(huì)部分分解）。滴定剛開(kāi)始的時(shí)候，滴定反應(yīng)速度較慢，當(dāng)?shù)稳氲腒MnO4與H2C2O4反應(yīng)生成Mn2+而起到催化劑的作用后，反應(yīng)速度才逐漸加快，因此高錳酸鉀溶液標(biāo)定時(shí)的滴定速度在開(kāi)始時(shí)不宜太快，應(yīng)等第一滴KMnO4紅色褪去之后再滴入第二滴，否則所加入的KMnO4來(lái)不及反應(yīng)即在酸性溶液中分解，從而影響高錳酸鉀溶液標(biāo)定的準(zhǔn)確度。終點(diǎn)的判斷，用KMnO4溶液滴定至溶液出現(xiàn)粉紅色并維持0.5min～1.0min不褪色時(shí)，即認(rèn)為達(dá)到滴定終點(diǎn)。

1.3氨氮的測(cè)定（HJ535-2009）

1.3.1對(duì)檢測(cè)用水的要求

氨氮的測(cè)定通常采用納氏試劑比色法，實(shí)驗(yàn)過(guò)程對(duì)水的要求很高，應(yīng)嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)用水的質(zhì)量，最好采用進(jìn)行二次加工得到無(wú)氨水，或者采用復(fù)合樹(shù)脂交換柱制得的新鮮去離子水。在實(shí)際操作中，一般控制試劑空白吸光度不超0.030（光程l0mm比色皿），這樣可大大減少因?yàn)闊o(wú)氨水的質(zhì)量控制不好而產(chǎn)生的測(cè)定誤差。另外納氏試劑在配制時(shí)應(yīng)注意，按方法（HJ535-2009）配制時(shí)配制的溶液要靜置過(guò)夜，將上層清液移入聚乙烯瓶中密封保存，然后放入冰箱中低溫冷藏，以防顏色逐漸加深。

1.3.2實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的影響

氨氮的測(cè)定應(yīng)選擇在無(wú)氨氣的環(huán)境中進(jìn)行，不應(yīng)有揚(yáng)塵，按鹽類(lèi)化合物，所使用的試劑、玻璃器皿等實(shí)驗(yàn)用品要單獨(dú)存放，因?yàn)椴Ａ髅髽O易吸附空氣中的氨，因而造成測(cè)定的偏差。而且玻璃器皿的洗滌應(yīng)避免采用重鉻酸鉀洗液，因?yàn)榇讼匆阂赘街谌萜魃?，具有?qiáng)烈的氧化性，影響氨氮的測(cè)定。玻璃器皿在必要時(shí)可用（1+9）的鹽酸浸泡，且清洗、涼干后在空氣中存放時(shí)間不宜太長(zhǎng)即可用來(lái)進(jìn)行樣品的分析測(cè)定。

1.3.3反應(yīng)條件的影響

（1）PH值的影響。

由氨氮顯色反應(yīng)原理可知，顯色溶液的濃度影響反應(yīng)平衡，對(duì)顯色效果有明顯影響。實(shí)驗(yàn)表明：水樣pH值<6，反應(yīng)靈敏度較低，吸光度值隨pH值的減小而降低；pH值在6～8時(shí)，吸光度值較高；pH值>10時(shí)，出現(xiàn)大量的紅棕色沉淀。因此，水樣保存時(shí)如果加入了濃硫酸，在測(cè)定前要用堿中和至pH值為6～8，此外，為保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，水樣與標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值應(yīng)盡量一致，以免造成誤差。

（2）溫度的影響。

溫度會(huì)影響納氏試劑與氨氮的反應(yīng)速度，并影響溶液的顯色效果。實(shí)驗(yàn)表明，反應(yīng)溫度為25℃時(shí)，顯色最安全；20℃時(shí)吸光度無(wú)明顯改變，但顯色不完全；當(dāng)溫度達(dá)到30℃時(shí)，溶液褪色，吸光度出現(xiàn)明顯偏低現(xiàn)象。因此，實(shí)驗(yàn)顯色溫度應(yīng)控制在20℃～25℃，以保證實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果的可靠性。

（3）反應(yīng)時(shí)間的影響。

反應(yīng)時(shí)間小于l0min，溶液顯色不完全；l0min～30min顏色較穩(wěn)定；30min～45min顏色有加深趨勢(shì)；45min～90min顏色逐漸減褪。因而，用納氏試劑光度法測(cè)定水中氨氮時(shí)，顯色時(shí)間應(yīng)控制在l0min～30min，以盡快的速度進(jìn)行比色，達(dá)到分析的精密度和準(zhǔn)確度。

1.3.4總氮的測(cè)定（GB/T11894-1989）

總氮是指水體中所有含氮化合物中的氮含量，反映水體富營(yíng)養(yǎng)化程度的重要指標(biāo)之一。通常采用堿性過(guò)硫酸鉀消解紫外分光光度法（ GB/T11894-1989） 測(cè)定。此法測(cè)定總氮雖然看似簡(jiǎn)單，但是此方法要求空白值的吸光度不得超過(guò)0.030，并不是很容易做到。所以有很多細(xì)節(jié)方而的問(wèn)題需要注意。

（1）玻璃器皿的清潔。

在總氮的高溫消解過(guò)程中，玻璃器皿壁上難以清洗的有機(jī)物和其他物質(zhì)會(huì)混入介質(zhì)中而造成空白值偏大或者平行性較差，所以所有玻璃器皿最好用鹽酸（1+9）或者硫酸（l+35）浸泡，清洗后再用無(wú)氨水沖洗數(shù)次，比色時(shí)用的石英比色皿也要用鹽酸（1+9）清潔干凈。

（2）消解溫度、壓力和時(shí)間的控制。

消解時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照分析方法規(guī)定的消解的溫度為120℃～124℃，（此時(shí)鍋內(nèi)壓力1.1kg/cm2～1.4kg/cm2）控制。消解時(shí)，（GB11894-1989）中要求達(dá)到規(guī)定的溫度和壓力后開(kāi)始計(jì)時(shí)，筆者的經(jīng)驗(yàn)是直接打開(kāi)放氣閥加熱一段時(shí)間，充分排出蒸氣滅菌器內(nèi)的冷空氣、放出熱蒸氣后再關(guān)閉放氣閥消解，并且將消解溫度控制在123℃，消解三十分鐘后，自然降壓至與外界相同時(shí)再打開(kāi)放氣閥放氣，然后打開(kāi)鍋蓋。其目的是為了保證總消解時(shí)間足夠長(zhǎng)，過(guò)硫酸鉀分解完全，這樣測(cè)定結(jié)果更為理想。

2.結(jié)語(yǔ)

實(shí)驗(yàn)室水質(zhì)檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量決定于檢測(cè)過(guò)程完成的質(zhì)量，過(guò)程存在質(zhì)量缺陷，將導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確、不正確和不合理，因此，實(shí)驗(yàn)室操作要在細(xì)節(jié)上下功夫，盡量避免誤差。 [科]

【參考文獻(xiàn)】

[1]生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法（GB/T5750.1-5750.13-2006）.