宋鵬飛，陳華江，姜燕琴，於 虹，戚行江

（1.中國(guó)科學(xué)院植物研究所 南京中山植物園,江蘇 南京 210014；2.浙江藍(lán)美農(nóng)業(yè)有限公司,浙江 諸暨 311812；3.浙江省諸暨市經(jīng)濟(jì)特產(chǎn)站,浙江 諸暨 311800；4.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,浙江 杭州 310021）

兔眼藍(lán)漿果粉藍(lán)嫩枝扦插生根的形態(tài)和解剖研究

宋鵬飛1，陳華江2，3，姜燕琴1，於 虹1，戚行江4

（1.中國(guó)科學(xué)院植物研究所 南京中山植物園,江蘇 南京 210014；2.浙江藍(lán)美農(nóng)業(yè)有限公司,浙江 諸暨 311812；3.浙江省諸暨市經(jīng)濟(jì)特產(chǎn)站,浙江 諸暨 311800；4.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,浙江 杭州 310021）

通過(guò)對(duì)兔眼藍(lán)漿果品種粉藍(lán)嫩枝扦插生根過(guò)程中插條愈傷組織及不定根發(fā)生的形態(tài)和解剖觀(guān)察,研究了粉藍(lán)扦插生根誘導(dǎo)方式、生根部位、愈傷組織形成以及不定根發(fā)生和發(fā)育過(guò)程。結(jié)果表明,在扦插前,粉藍(lán)插條內(nèi)無(wú)潛伏根原基存在,不定根由扦插后形成的誘生根原基發(fā)育而成,屬誘導(dǎo)生根型樹(shù)種；在扦插過(guò)程中,除了在維管形成層及附近薄壁區(qū)域產(chǎn)生根原基外,還可見(jiàn)少量愈傷組織分化成不定根,但維管形成層生根的數(shù)量和質(zhì)量明顯高于愈傷組織生根。

兔眼藍(lán)漿果；嫩枝扦插；維管形成層；愈傷組織

扦插是無(wú)性繁殖中簡(jiǎn)單易行、廣泛應(yīng)用的方法之一［1］,扦插繁殖也是藍(lán)漿果育苗的主要方法之一。目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)一些植物的扦插不定根發(fā)生情況進(jìn)行過(guò)研究［1-14］,但藍(lán)漿果扦插過(guò)程中插條愈傷組織及不定根發(fā)生的解剖學(xué)特征研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究以兔眼藍(lán)漿果品種粉藍(lán)為例,通過(guò)對(duì)其嫩枝扦插過(guò)程中插條愈傷組織及不定根發(fā)生的解剖學(xué)研究,探討了粉藍(lán)生根誘導(dǎo)方式、生根部位、愈傷組織形成以及不定根發(fā)生和發(fā)育過(guò)程,為藍(lán)漿果生根機(jī)理研究提供理論依據(jù)?，F(xiàn)將有關(guān)結(jié)果總結(jié)和報(bào)道如下。

1 材料與方法

l.l 試驗(yàn)材料

兔眼藍(lán)漿果品種粉藍(lán)嫩枝扦插插條。

l.2試驗(yàn)方法

試驗(yàn)于2010年7-8月在南京中山植物園溫室內(nèi)在全光照彌霧條件下進(jìn)行。采用32孔林木穴盤(pán)作容器,扦插基質(zhì)為水苔。扦插前將基質(zhì)噴濕,插條基部在9 000 mg·L-1IBA溶液中速蘸3 s,插入基質(zhì)2～3 cm深,插條與基質(zhì)水平面垂直,通過(guò)間歇噴霧設(shè)施使插條和葉片保持濕潤(rùn)。噴霧間隔由控制器控制,并根據(jù)天氣情況和蒸發(fā)速度進(jìn)行調(diào)整。

扦插當(dāng)天隨機(jī)選取4個(gè)單株插條,剪取插條下端2～3 cm的枝段,用FAA固定液固定,以觀(guān)察莖的解剖結(jié)構(gòu)；7月14日開(kāi)始每隔7 d隨機(jī)選取4個(gè)單株插條,剪取插條下端2～3 cm的枝段,用FAA固定液固定,以觀(guān)察愈傷組織及不定根的發(fā)生［10］。

采用常規(guī)石蠟切片法制片,切片厚度為8μm,番紅-固綠對(duì)染,中性樹(shù)膠封片,在Nikon Eclipse 80i正置生物顯微鏡下觀(guān)察并拍照。

2 結(jié)果與分析

2.l 插條生根過(guò)程外部形態(tài)

對(duì)兔眼藍(lán)漿果粉藍(lán)嫩枝扦插過(guò)程中插條下剪口形態(tài)的觀(guān)察結(jié)果 （圖1）表明,扦插后7 d觀(guān)察,插條基部無(wú)明顯變化,扦插后14 d觀(guān)察,愈傷組織已經(jīng)產(chǎn)生并被氧化成乳白色或者黃色,扦插后21 d觀(guān)察,80%的插條長(zhǎng)出愈傷組織,少量插條開(kāi)始生根。扦插后28 d觀(guān)察,不定根開(kāi)始大量形成并伸長(zhǎng)。

2.2 插條莖的解剖構(gòu)造

粉藍(lán)插條的橫切面由外向內(nèi)依次為表皮、皮層、維管柱3大部分 （圖2中1和2）。表皮上可見(jiàn)少量氣孔分布,皮層由許多長(zhǎng)橢圓形不規(guī)則排列的薄壁細(xì)胞組成。維管柱由外向內(nèi)由韌皮部、維管形成層、木質(zhì)部、髓和徑向系統(tǒng)-射線(xiàn)組成。韌皮部與木質(zhì)部之間是環(huán)狀連續(xù)排列的維管形成層,由幾層細(xì)胞組成。木質(zhì)部由導(dǎo)管、管胞、木射線(xiàn)、木薄壁細(xì)胞共同組成。木質(zhì)部和髓交界處細(xì)胞較小、排列緊密、染色較深形成一條環(huán)髓帶。髓射線(xiàn)起源于環(huán)髓帶,有的可擴(kuò)展到韌皮部且形成V字形稱(chēng)為擴(kuò)展的射線(xiàn)。最中心為近圓形的髓心,由大型薄壁細(xì)胞組成,部分細(xì)胞間隙明顯且較大,內(nèi)含物豐富,胞間連絲發(fā)達(dá)。大量的切片觀(guān)察表明,扦插前在插條木質(zhì)部、韌皮部、皮層、形成層等各部位,均未發(fā)現(xiàn)有潛伏根原基存在。

圖1 兔眼藍(lán)漿果粉藍(lán)嫩枝扦插后的外部形態(tài)

2.3 插條愈傷組織的發(fā)生和解剖特點(diǎn)

粉藍(lán)在扦插后10 d,部分插條切口和刻傷處開(kāi)始出現(xiàn)晶瑩透明的愈傷組織。通過(guò)橫切面的解剖觀(guān)察,可以看到愈傷組織的細(xì)胞來(lái)源于皮層薄壁細(xì)胞和維管形成層,即愈傷組織的起源部位 （圖2）。維管形成層首先產(chǎn)生愈傷組織。皮層細(xì)胞大多為薄壁細(xì)胞,又受毗鄰的維管形成層的影響,也隨之產(chǎn)生愈傷組織。維管形成層和皮層愈傷組織生長(zhǎng)較快,因此位于形成層和皮層的插條切口和刻傷處首先長(zhǎng)出愈傷組織,并逐漸由里向外發(fā)展。扦插后14 d,愈傷組織已被氧化成乳白色或者黃色；21 d,80%的插條長(zhǎng)出愈傷組織。由于愈傷組織發(fā)生部位不同,以及同一發(fā)生部位的不同位點(diǎn)細(xì)胞分裂速度不一致,在愈傷組織外面產(chǎn)生許多瘤狀突起。愈傷薄壁細(xì)胞不斷分裂,愈傷體積不斷變大。愈傷組織的形成可以防止病原菌的入侵,也是不定根發(fā)育的部位。

2.4 不定根的發(fā)生部位及發(fā)育過(guò)程

2.4.1 維管形成層分化的誘生根原基

粉藍(lán)插條在扦插后,維管形成層帶明顯加寬,恢復(fù)分裂能力。在與束中形成層相對(duì)應(yīng)的髓射線(xiàn)處的一團(tuán)細(xì)胞具有很強(qiáng)的分裂能力,這團(tuán)細(xì)胞就是根原基原始細(xì)胞,這些細(xì)胞不斷分裂并伸向皮層,最終發(fā)育成不定根伸出體外 （圖2中9和10）。由于愈傷組織已包住切口處的皮層,所以,大部分不定根穿過(guò)皮層后從愈傷組織中伸出。

2.4.2 愈傷組織內(nèi)分化的誘生根原基

粉藍(lán)插條形成的愈傷組織最初為一團(tuán)薄壁細(xì)胞,細(xì)胞大,近圓形,排列疏松。愈傷組織在細(xì)胞數(shù)量不斷增加的同時(shí),其內(nèi)部的一些細(xì)胞開(kāi)始分化,形成自己的木質(zhì)部和形成層。在其木質(zhì)部外側(cè),有些細(xì)胞特化成具有根原始體特征的細(xì)胞,與周?chē)挠鷤”诩?xì)胞有明顯的界限。在其發(fā)展過(guò)程中,由近圓形的細(xì)胞團(tuán)變成一端較尖的誘發(fā)根原基。以后這些根原基繼續(xù)伸長(zhǎng),突破愈傷表面伸出體外 （圖2中17和18）。不定根原基在發(fā)育的同時(shí)伴隨著內(nèi)部維管系統(tǒng)的發(fā)育,最終與插條內(nèi)的維管系統(tǒng)相連。

圖2 粉藍(lán)嫩枝插條的解剖構(gòu)造及不定根的發(fā)生發(fā)育

3 小結(jié)與討論

根原基有潛伏根原基和誘生根原基2種類(lèi)型［15］。潛伏根原基是指有些樹(shù)種 （如銀白楊、毛白楊等）［16］不定根的根原基原始體在發(fā)育早期未離體時(shí)就已經(jīng)產(chǎn)生,即在扦插前枝條內(nèi)就已經(jīng)存在,但處于休眠狀態(tài),插條離體后在適宜的條件下繼續(xù)發(fā)育成不定根。但另一些樹(shù)種（如雜種鵝掌楸、 椴樹(shù)、 日本晚櫻等）［10-11,17-20］在扦插前不存在根原基,在扦插過(guò)程中通過(guò)誘導(dǎo)而形成根原基。維管形成層、韌皮薄壁組織細(xì)胞、韌皮射線(xiàn)、髓射線(xiàn)等部位都可產(chǎn)生誘發(fā)根原始體, 也可在愈傷組織中產(chǎn)生［19,21］。 從本試驗(yàn)中未經(jīng)處理的插條莖的解剖觀(guān)察可以看出,在扦插前,粉藍(lán)插條內(nèi)無(wú)潛伏根原基存在,不定根由扦插后形成的誘生根原基發(fā)育而成。因此粉藍(lán)屬于誘導(dǎo)生根型樹(shù)種。

不同植物種類(lèi)的不定根,可起源于木射線(xiàn)薄壁細(xì)胞、維管形成層、皮層、髓薄壁組織和愈傷組織等不同部位［22］。一些樹(shù)種根原基起源部位單一如雜種鵝掌楸,只在維管形成層及附近薄壁區(qū)域產(chǎn)生［11］；一些樹(shù)種根原基可在多位點(diǎn)產(chǎn)生,如紅皮云杉可在愈傷組織、維管形成層等處產(chǎn)生［7］。發(fā)根位點(diǎn)的多少與生根的難易沒(méi)有直接聯(lián)系。在粉藍(lán)扦插過(guò)程中,除了在維管形成層及附近薄壁區(qū)域產(chǎn)生根原基外,還可見(jiàn)愈傷組織分化成不定根,這一結(jié)果與劉云強(qiáng)等［10］在糠椴扦插中的結(jié)果一致。但維管形成層生根的數(shù)量和質(zhì)量明顯高于愈傷生根,這與林艷［23］在白樺嫩枝扦插中的結(jié)論一致。

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（責(zé)任編輯：張瑞麟）

S 663

：A

：0528-9017（2014）04-0505-04

文獻(xiàn)著錄格式：宋鵬飛,陳華江,姜燕琴,等.兔眼藍(lán)漿果粉藍(lán)嫩枝扦插生根的形態(tài)和解剖研究 ［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2014（4）：505-508.

2014-01-11

國(guó)家農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè) （農(nóng)業(yè)）科研專(zhuān)項(xiàng) （201103037）；江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新項(xiàng)目 （CX（11）1011）

宋鵬飛 （1986-）,男,山東威海人,碩士研究生,主要從事藍(lán)漿果栽培研究工作。

於 虹。E-mail：njyuhong@vip.sina.com。