張 翔，杜旭東，周 昱，劉益飛（無(wú)錫市第二人民醫(yī)院普外科，江蘇4000；南通大學(xué)附屬醫(yī)院病理科）

胃癌組織中SGTA的表達(dá)及臨床意義

張 翔1*，杜旭東1，周 昱1，劉益飛2
（1無(wú)錫市第二人民醫(yī)院普外科，江蘇214000；2南通大學(xué)附屬醫(yī)院病理科）

目的：研究小谷氨酰胺三角四肽重復(fù)區(qū)蛋白α（small glutamine-rich tetratricopeptide repeat-containing，SGTA）在胃癌組織中的表達(dá)及其與患者臨床病理特征的關(guān)系。方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)152例胃癌組織中SGTA的表達(dá)，并分析其與患者臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果：免疫組織化學(xué)結(jié)果表明，SGTA在胃癌癌旁組織中陰性表達(dá)，而在胃癌組織中陽(yáng)性表達(dá)。胃癌中SGTA的表達(dá)強(qiáng)度與胃癌患者組織學(xué)分級(jí)、臨床分期、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05），而與患者的年齡、性別、腫瘤大小及組織學(xué)分型無(wú)關(guān)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P> 0.05）。結(jié)論：SGTA表達(dá)異?？赡芘c胃癌的發(fā)生與進(jìn)展關(guān)系密切，可作為治療的潛在靶點(diǎn)。

胃癌；小谷氨酰胺三角四肽重復(fù)區(qū)蛋白α；細(xì)胞增殖；免疫組織化學(xué)法

胃癌是我國(guó)最常見(jiàn)惡性腫瘤之一，起病隱匿，早期常無(wú)明顯癥狀和體征，且極易發(fā)生侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，故發(fā)現(xiàn)時(shí)多數(shù)已是晚期。晚期胃癌多失去了手術(shù)完全切除病灶的機(jī)會(huì)，預(yù)后極差[1]。胃癌是一種多基因疾病，許多基因參與了胃癌的發(fā)生發(fā)展。有研究表明SGTA在惡性腫瘤細(xì)胞中表達(dá)異常，并且在介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的增殖中具有重要的意義[2]。本文選擇2004－2007年胃癌手術(shù)切除標(biāo)本152例，檢測(cè)胃癌組織中SGTA的表達(dá)，分析其與胃癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 胃癌石蠟標(biāo)本152例，男116例，女36例，年齡29～88歲。病理診斷明確，并且有完整的臨床病理資料，由南通大學(xué)附屬醫(yī)院病理科提供。胃癌直徑<4cm 39例，≥4cm 113例。組織學(xué)分化等級(jí)∶高中分化56例，低分化96例。有轉(zhuǎn)移（淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移）54例，無(wú)轉(zhuǎn)移98例。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化染色∶SGTA單克隆鼠抗人抗體（Santa cruz公司）；二步法免疫組化檢測(cè)試劑盒（GBI

公司）；對(duì)二甲胺基偶氮苯（DAB）顯色試劑盒（Dako公司）。石蠟包埋組織60℃（于電熱恒溫干燥箱內(nèi)）烤片6～8 h。二甲苯15min×3次（60℃）后用低濃度梯度的乙醇水化，自來(lái)水沖洗片刻。利用0.01mol/L檸檬酸緩沖液（pH 6.0）及高壓鍋進(jìn)行抗原修復(fù)。自然冷卻后用3%H2O2孵育以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，PBS沖洗干凈。滴加鼠抗SGTA 1:500，室溫孵育2 h。使用一抗同型IgG作為陰性對(duì)照。PBS沖洗，擦干后滴加組化二抗，室溫孵育。PBS沖洗后DAB顯色，蘇木素復(fù)染，高濃度梯度的乙醇脫水，中性樹(shù)脂封片。用已知SGTA蛋白染色陽(yáng)性的胃癌組織作為陽(yáng)性對(duì)照，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.2.2 陽(yáng)性結(jié)果判斷∶2名病理科醫(yī)生采用雙盲法光鏡下觀察免疫組化結(jié)果，每片隨機(jī)觀察5個(gè)高倍視野（200×），共1000個(gè)細(xì)胞。SGTA染色按腫瘤陽(yáng)性細(xì)胞百分率進(jìn)行計(jì)分∶≤25%為1分，26%～50%為2分，50%～75%為3分，≥75%為4分。評(píng)分1～2分為低表達(dá)，3～4分為高表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析。對(duì)SGTA蛋白在胃癌中的表達(dá)與相應(yīng)的臨床病理學(xué)特征之間的關(guān)系采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 胃癌石蠟切片組織中SGTA的表達(dá) 免疫組化結(jié)果顯示SGTA在人胃癌組織中高表達(dá)，而在癌旁組織中低表達(dá)或缺失表達(dá)，表達(dá)主要定位于細(xì)胞漿，染色呈棕黃或棕褐色（圖1）。

圖1 免疫組化方法檢測(cè)SGTA蛋白在胃癌中的表達(dá)（200×）

2.2 胃癌SGTA蛋白表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系 根據(jù)SGTA在胃癌中的平均評(píng)分將其分為高表達(dá)組和低表達(dá)組，分析SGTA的表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征之間的關(guān)系。分析顯示胃癌中SGTA的表達(dá)強(qiáng)度與胃癌患者組織學(xué)分級(jí)、臨床分期、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P< 0.05），與患者的年齡、性別、腫瘤大小及組織學(xué)分型無(wú)關(guān)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P>0.05），見(jiàn)表1。

表1 胃癌中SGTA蛋白表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系

3 討 論

胃癌位于全部惡性腫瘤的第3位，占消化道惡性腫瘤的首位，可見(jiàn)胃癌是威脅人類健康的一種常見(jiàn)病[1]。胃癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多因素、多基因、多途徑、多階段有序的過(guò)程[3]。早期癥狀多不明顯，當(dāng)臨床癥狀明顯時(shí)，病變已屬晚期。因此，要十分警惕胃癌的早期癥狀，以免延誤診治。盡管胃癌的治療方法逐漸進(jìn)步，但尋找新的標(biāo)記物對(duì)于判斷胃癌的不良預(yù)后仍至關(guān)重要并具有重要的治療意義。

SGT，又名病毒U-結(jié)合蛋白（UBP），是一種富谷氨酰胺含TPR的小分子蛋白質(zhì)，分子量為35 kDa，參與內(nèi)吞作用，生長(zhǎng)激素受體的相互作用，控制細(xì)胞有絲分裂以及細(xì)胞凋亡等生活過(guò)程[4-5]。細(xì)胞內(nèi)SGT的表達(dá)降低可以使得一些染色體定位錯(cuò)誤，從而導(dǎo)致有絲分裂阻滯在早中期，細(xì)胞將在前中期凋亡[6]。SGTA是SGT家族中的一個(gè)重要成員，與SGT具有60%的氨基酸序列同源性，參與病毒的包裝，細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)[2，7-8]。SGTA作為Hsp70和Hsp90的相關(guān)伴侶，具體管制雄激素受體活性，可以特異性地調(diào)節(jié)雄激素，糖皮質(zhì)激素和孕激素受體活性[9]。實(shí)體瘤細(xì)胞

的增殖、存活和細(xì)胞內(nèi)系統(tǒng)的維護(hù)有賴于Hsp70/ Hsp90分子伴侶[10]。SGTA可以發(fā)揮循環(huán)監(jiān)管作用，提高腫瘤細(xì)胞對(duì)伴侶抑制劑的敏感性，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。敲低SGTA可抑制雄激素和PI3K/ Akt信號(hào)通路及前列腺癌細(xì)胞的增殖[10]。

研究表明，SGTA在非小細(xì)胞肺癌[6]、食管癌[11]、前列腺癌[10]、非霍奇金淋巴瘤[12]和乳腺癌[13]等腫瘤中發(fā)揮著促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的作用，因而研究其在胃癌中的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。本文通過(guò)免疫組化發(fā)現(xiàn)SGTA在人胃癌組織中高表達(dá)，并主要定位于細(xì)胞漿（圖1）。通過(guò)對(duì)152例具有完整隨訪資料的胃癌患者的免疫組化結(jié)果，分析SGTA的表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系，結(jié)果顯示胃癌中SGTA的表達(dá)與患者組織學(xué)分級(jí)（P=0.018）、臨床分期（P<0.001）、浸潤(rùn)深度（P=0.016）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P=0.001）相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與患者的年齡、性別、腫瘤大小及組織學(xué)分型無(wú)關(guān)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

本文結(jié)果表明，SGTA在胃癌的癌組織中高表達(dá)，提示SGTA可能通過(guò)參與調(diào)節(jié)胃癌的發(fā)生發(fā)展。這為胃癌的治療提供了新的依據(jù)，但其機(jī)制及對(duì)患者預(yù)后的影響尚需進(jìn)一步討論。

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SGTA Expression and Clinical Significance in gastric Cancer

ZHANG Xiang1,DU Xudong1,ZHOU Yu1,LIU Yi2
（1Departmnet of General Surgery,the Second Hospital ofWuxi,Jiangsu 214000;2Departmnet of Pathology,the Affiliated Hospital of Nantong University）

Objective:To study the effect of SGTA expression in human gastric cancer and its relationship with clinicopathological features.Methods:The SGTA expression in gastric cancer was detected by immunohistochemistry on 152 parffin-embedded slices,and the relationship of SGTA and clinical parameters was analyzed.Results:SGTA was positively expressed in gastric cancer by Western blot and immunohistochemistry,while negtively expressed in adjacent gastric cancer tissues.Multivariate analysis showed that,SGTA protein in gastric cancer was significantly correlated with histological grade(P=0.018),pTNM staging(P<0.001),depth of invasion(P=0.016)aswell as Ki-67(P=0.021);and had no relationship with other parameters such as age,sex,tumor size and histological type.Conclusions：The abnormal expression of SGTA might be closely related to the initiation and progress of gastric cancer,and thusmight serve as a potential target for gastric cancer therapy.

gastric cancer;small glutamine-rich tetratricopeptide repeat-containing;prognosis;proliferation

R735.2

A

張翔，男，漢族，江蘇泰州人，生于1981年12月，住院醫(yī)師。研究方向∶胃腸腫瘤的發(fā)病機(jī)制和治療。 通信作者∶劉益飛，E-mail∶bluefiime@qq.com。

2014-08-20

1006-2440（2014）05-0439-03