孟海華，何秀英

(青海省第五人民醫(yī)院，西寧810007)

紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體又稱為意外抗體，指血清中除抗-A及抗-B以外的其他血型抗體［1］。紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體多表現(xiàn)為IgG型抗體，異于抗-A及抗-B的IgM型。研究［2］發(fā)現(xiàn)，IgG型抗體在鹽水介質(zhì)中僅與其對(duì)應(yīng)抗原的紅細(xì)胞致敏，但無(wú)法誘導(dǎo)紅細(xì)胞凝結(jié)，這導(dǎo)致傳統(tǒng)的鹽水血型鑒定及交叉配血實(shí)驗(yàn)無(wú)法用于IgG型抗體檢測(cè)。目前，臨床通常選用微柱凝膠抗球蛋白卡來(lái)完成IgG型抗體即紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體檢測(cè)工作［3］。2010年11月～2013年11月，我們采用微柱凝膠抗球蛋白法對(duì)346例腫瘤患者的紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體進(jìn)行了檢測(cè)?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 346例腫瘤患者，男184例、女162例，年齡18～74歲。妊娠患者18例。患者均確診為腫瘤疾病，其中直腸癌27例，結(jié)腸癌31例，骨癌29例，胃癌58例，淋巴癌21例，食管癌34例，肝癌76例，甲狀腺癌27例，肺癌43例?；颊呔枋中g(shù)備血或輸血治療;均簽署知情同意書(shū)。排除合并糖尿病、高血壓患者。

1.2 儀器及試劑 日本KUBOTA久保田KA-200血庫(kù)專用離心機(jī)。紅細(xì)胞及譜紅細(xì)胞(上海市血液生物醫(yī)藥有限公司);多特異性(抗-IgG、抗-C3d)單克隆抗球蛋白試劑(上海市血液生物醫(yī)藥有限公司);聚凝胺介質(zhì)試劑(珠海貝索生物技術(shù)有限公司);單克隆血型抗體試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)。

1.3 紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體檢測(cè)方法 采用微柱凝膠抗球蛋白法篩查紅細(xì)胞抗體，對(duì)抗體陽(yáng)性者進(jìn)行抗體特異性檢測(cè)。取患者3 mL血液樣本，采用KA-200血庫(kù)專用離心機(jī)2 500 r/min離心，5 min后，選用聚凝胺介質(zhì)試劑，取試管3支，各加患者血清2滴，分別加入篩查紅細(xì)胞(3人份，O型)各1滴;各加低離子溶液0.65 mL混勻后，再各加凝聚胺2滴并混勻;3 400 r/min，離心15 s，棄上清，輕輕搖動(dòng)試管，觀察有無(wú)凝集，如無(wú)，則需重做;最后加懸浮液2滴，輕輕搖動(dòng)試管混合，并在1 min內(nèi)判定結(jié)果?；颊哐迮c篩查紅細(xì)胞存在1種或1種以上的凝結(jié)者判定為紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽(yáng)性，與3人份紅細(xì)胞均無(wú)凝結(jié)者為紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陰性。以陽(yáng)性篩查結(jié)果為研究血清，同選用聚凝胺介質(zhì)試劑，促使患者血清與篩查紅細(xì)胞(10人份，O型)及患者自身紅細(xì)胞反應(yīng)。與篩查紅細(xì)胞1人及1人以上凝結(jié)，但與自身紅細(xì)胞不凝結(jié)者判定為特異性抗體;與自身及其他篩查紅細(xì)胞均不存在凝結(jié)情況則判定為非特異性抗體。特異性抗體血清行單克隆血型抗體試劑復(fù)查，用以確認(rèn)抗體檢測(cè)準(zhǔn)確性;對(duì)非特異性抗體血清行紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)，檢測(cè)患者自身紅細(xì)胞在其體內(nèi)的致敏情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用百分比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽(yáng)性18例，抗-Lea者6例、抗-Pl者5例、抗-M者7例、Rh抗體者0例。男、女紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽(yáng)性率分別為2.72%(5/184)、8.02%(13/162)，男女比較，P ＜0.05。其中特異性抗體7例，非特異性抗體11例。5例患者發(fā)生自身紅細(xì)胞致敏。紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽(yáng)性者中13例伴輸血史或妊娠史，有8例患者以Rh抗體為主;其余5例不伴有輸血史或妊娠史，抗體多為抗-Lea、抗-Pl、抗-M，無(wú)抗-Rh。12例需輸血的紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽(yáng)性者均在間接抗球蛋白法操作下配血，并適量給予患者輸入對(duì)應(yīng)紅細(xì)胞血型抗原陰性的紅細(xì)胞。

3 討論

輸血反應(yīng)是臨床常見(jiàn)的一種輸血不良反應(yīng)，患者多表現(xiàn)為發(fā)熱、寒戰(zhàn)、紅細(xì)胞壽命縮短等，嚴(yán)重時(shí)患者將產(chǎn)生溶血性輸血反應(yīng)，危及生命［6］。此外，如孕婦出現(xiàn)輸血反應(yīng)，其幼兒易出現(xiàn)新生兒溶血病，患兒智力、心腎器官發(fā)育將被損傷［7］。輸血反應(yīng)發(fā)病機(jī)制與其他血型紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體介入存在直接聯(lián)系，因此，臨床將紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查工作作為日常輸血、備血工作的重要內(nèi)容［8］。紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查有以下意義:①獻(xiàn)血人員的血清及血漿紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查可有效降低伴不規(guī)則抗體血漿注入患者體內(nèi)的幾率，降低患者因血漿來(lái)源異常而出現(xiàn)的溶血性輸血反應(yīng)幾率。此外，臨床還可將伴不規(guī)則抗體血漿制備成特殊血清，用以匹配稀有血型患者，一定程度上避免血源浪費(fèi)。②可有效確定需輸血治療的患者血液情況，進(jìn)而提示患者需求血液類型，給輸血救治工作提供指導(dǎo)。降低溶血性輸血反應(yīng)發(fā)生率。③可及時(shí)發(fā)現(xiàn)妊娠期女性不規(guī)則抗體分布情況，臨床可根據(jù)該信息在孕期時(shí)對(duì)新生兒溶血病進(jìn)行防治，進(jìn)而降低不規(guī)則抗體對(duì)胎兒發(fā)育情況的影響，提高胎兒身體素質(zhì)，保證胎兒順利生產(chǎn)和健康成長(zhǎng)［9］。

目前，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體生成機(jī)制尚未明確，可能機(jī)制有以下幾種:①新生兒依靠母體上的IgG類抗體，生成紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體，最終誘導(dǎo)并致敏自身紅細(xì)胞生成新生兒溶血病。②因異血型輸血或妊娠，患者受異血型紅細(xì)胞抗原刺激而生成紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體。③部分紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體在無(wú)明顯異血型抗體刺激情況下自動(dòng)生成［10］。國(guó)外有研究顯示，器官移植或干細(xì)胞移植后，患者檢測(cè)出紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體［11］。此外，還有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體檢出率及抗體特異性存在較明顯的地域及人群差異，如白種人紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體檢出率在1.0%～2.5%，其抗體特異性多表現(xiàn)為 Rh抗體、Lewis抗體及抗-K等［12］。本研究中，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體檢測(cè)陽(yáng)性率為5.20%(18/346)，女性患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體檢出率顯著高于男性，這可能與女性患者妊娠現(xiàn)象有關(guān)。此外，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體陽(yáng)性者中有13例伴輸血史或妊娠史，以Rh抗體為主;其余5例不伴輸血史或妊娠史，其檢測(cè)抗體多為抗-Lea、抗-Pl、抗-M，無(wú)抗-Rh。提示紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體是腫瘤患者輸血安全評(píng)估的重要參數(shù)。在實(shí)際輸血、備血工作中，我們建議，ABO血型正反鑒定不相符者、供受者ABO同型但配血不合者、伴妊娠史或輸血史并需輸血的患者均需行紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查操作。在給予不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者輸血時(shí)，需根據(jù)患者具體血漿需求選相應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞，在間接抗球蛋白法操作下配血后輸血。

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