郭翠艷

【摘 要】目的：觀察氨氯地平對(duì)食餌性兔動(dòng)脈粥樣硬化氧化損傷的影響，探求氨氯地平抗動(dòng)脈粥樣硬化（AS）機(jī)制。方法：在高膽固醇飲食基礎(chǔ)上建立兔AS模型，隨機(jī)分組，檢測(cè)各組兔主動(dòng)脈AS面積、全血超氧化物歧化酶（SOD）活力、血清丙二醛含量及血清脂質(zhì)濃度。結(jié)果：氨氯地平組兔主動(dòng)脈AS面積顯著降低（P<0.01），SOD活力明顯升高（P<0.01），丙二醛含量減少（P<0.01）。結(jié)論：氨氯地平通過(guò)改善抗氧化系統(tǒng)而延緩動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程。

【關(guān)鍵詞】氨氯地平；動(dòng)脈粥樣硬化；氧化損傷；辛伐他汀

【文章編號(hào)】1004-7484（2014）02-0717-02

氨氯地平是廣泛用于臨床的第三代新型長(zhǎng)效l，4-二氫吡啶類鈣通道阻滯劑（calcium channel blockers，CCB）。近年來(lái)，許多研究資料提出氨氯地平在不降低血脂及血壓的條件下，可能通過(guò)抗氧化、減少炎性因子及細(xì)胞因子的生成，延緩AS進(jìn)程，但確切機(jī)制仍不清楚。本文通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)觀察食餌性兔SOD-MDA系統(tǒng)的變化及氨氯地平對(duì)SOD-MDA系統(tǒng)的影響。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)分組及造模 健康雄性純種新西蘭白兔24只，體重2.25±0.33kg，3個(gè)月齡。實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)10天。隨機(jī)分為4組：⑴正常對(duì)照組（n=6）：基礎(chǔ)顆粒飼料120～150g/天；⑵AS模型組（n=6）：造膜飼料（基礎(chǔ)顆粒飼料+2%豬油+1%膽固醇）；⑶氨氯地平組（n=6）：造模飼料+氨氯地平；⑷辛伐他汀組（n=6）：造模飼料+辛伐他汀。各組動(dòng)物分別在實(shí)驗(yàn)前經(jīng)耳中央動(dòng)脈和24周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)經(jīng)心腔采血檢驗(yàn)。

1.2血清總膽固醇（TC），甘油三酯（TG），高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測(cè)定 采血后立即分離血清，采用酶比色法檢測(cè)。

1.3血清丙二醛（MDA）測(cè)定 采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒通過(guò)硫代巴比妥酸法檢測(cè)。

1.4 全血超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力測(cè)定 羥胺法檢測(cè)。每毫升反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的SOD量為一個(gè)活力單位。

1.5 兔主動(dòng)脈AS面積測(cè)定 于實(shí)驗(yàn)24周末，在10%水合氯醛麻醉下，取各組動(dòng)物主動(dòng)脈標(biāo)本（由主動(dòng)脈弓至腹主動(dòng)脈分叉處），剝?nèi)ネ饽ぶ炯敖Y(jié)締組織，縱向剖開，生理鹽水沖洗后置于10%中性福爾馬林中固定。標(biāo)本經(jīng)蘇丹IV染色后應(yīng)用圖象分析儀測(cè)定主動(dòng)脈內(nèi)膜脂質(zhì)斑塊面積百分比。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。全部數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ ）表示，用one-way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間比較用Student-Newman-Keuls法檢驗(yàn)，P <0.05為有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 血脂水平測(cè)定結(jié)果 氨氯地平組較對(duì)照組血清TC、LDL-C、TG明顯升高（P <0.01）；氨氯地平組TC、LDL-C、TG與模型組無(wú)明顯差異（P >0.05）；氨氯地平組TC、LDL-C、TG水平高于辛伐他汀組（P <0.01）；（表1）

2.2 全血SOD活性和血清MDA含量的變化（表2） 與對(duì)照組相比，各組SOD活力下降，MDA含量升高（P <0.01）；氨氯地平、辛伐他汀組SOD活力較模型組升高有顯著性差異（P <0.01），而MDA則顯著低于模型組（P <0.01）。

2.3主動(dòng)脈斑塊面積變化 正常對(duì)照組各實(shí)驗(yàn)兔斑塊面積為零。實(shí)驗(yàn)組均出現(xiàn)面積大小不等的不規(guī)則著色區(qū)。氨氯地平組和他汀組AS斑塊面積明顯低于模型組（P <0.01）（表2）。

3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）是多種危險(xiǎn)因素引發(fā)的一種慢性、進(jìn)行性的疾病過(guò)程。大量研究顯示氧化損傷在AS發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。高膽固醇血癥時(shí)，自由基釋放系統(tǒng)激活，超氧陰離子（O2-）等活性氧大量生成[1]，引起局部脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，大量的LDL被氧化，同時(shí)細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激信號(hào)選擇性誘導(dǎo)炎癥相關(guān)基因表達(dá)，推動(dòng)AS發(fā)展[2]?？梢姡纳蒲鼙诘难趸癄顟B(tài)，抗氧化損傷是防治AS的重要環(huán)節(jié)。

氨氯地平是二氫吡啶類鈣通道阻滯劑，近年來(lái)大量研究顯示氨氯地平可能通過(guò)抗炎、改善內(nèi)皮功能、穩(wěn)定斑塊等多種機(jī)制發(fā)揮抗AS作用。其獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和鈣通道阻滯作用，被認(rèn)為具有抗氧化性質(zhì)[3]。超氧化物歧化酶（SOD）是體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)中重要的酶，可以歧化氧離子，并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為水和氧氣，維持機(jī)體正常的生理功能，免受自由基損傷。丙二醛（MDA）則是脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物之一，常用來(lái)反映機(jī)體的脂質(zhì)過(guò)氧化程度，一定情況下代表了體內(nèi)過(guò)氧化損傷的程度。本研究顯示，模型組SOD活力明顯降低，MDA含量顯著升高，表明高膽固醇血癥損傷了動(dòng)脈壁的抗氧化機(jī)能，抗氧化系統(tǒng)酶活性下降，導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化物清除障礙，其分解代謝產(chǎn)物MDA含量增加，加重局部的損傷[4]。氨氯地平組SOD活力較模型組顯著升高（P <0.01），而MDA含量明顯下降（P <0.01）。同時(shí)辛伐他汀組SOD活力升高和MDA水平下降，這一結(jié)果與Chen L研究結(jié)果一致[5]。表明氨氯地平與辛伐他汀改善動(dòng)脈壁的抗氧化能力，具有抗氧化損傷的作用。通過(guò)血脂檢測(cè)顯示辛伐他汀組TC、TG、LDL-C水平下降，而氨氯地平組TC、LDL-C、TG水平與模型組比較無(wú)明顯差異（P >0.05），說(shuō)明其抗氧化損傷作用與血脂水平無(wú)關(guān)。

本研究同時(shí)觀察了藥物對(duì)AS斑塊面積的影響，發(fā)現(xiàn)藥物組斑塊面積較模型組明顯減少（P<0.01），提示氨氯地平延緩AS進(jìn)程。其抗AS作用并非經(jīng)降血脂起作用，抗氧化損傷可能是其抗AS重要機(jī)制。

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