孫何云 薛邦玉 劉宏斌 馬超鋒

中圖分類號(hào)：S858.312.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1673-1085（2014）12-0040-03

禽流感是禽流行性感冒（Avian influenza，AI）的簡(jiǎn)稱。是由正粘病毒科流感病毒屬A型禽流行性感冒病毒引起的一種禽類（家禽和野禽）傳染病。禽流感病毒感染后可以表現(xiàn)為輕度的呼吸道癥狀、消化道癥狀，死亡率較低；或表現(xiàn)為較嚴(yán)重的全身性、出血性、敗血性癥狀，死亡率較高。AIV根據(jù)其對(duì)家禽致病力的不同分為3種，即高致病性、低致病性和無(wú)致病性。其中，高致病性禽流感病毒可以直接感染人類，并造成死亡。高致病性禽流感是由H5和H7亞毒株（以H5N1和H7N7為代表）引起的疾病。高致病性禽流感因其在禽類中傳播快、危害大、病死率高，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病?，F(xiàn)階段，預(yù)防禽流感病毒感染主要依靠H5N1亞型禽流感滅活疫苗免疫。我國(guó)從2004年開始對(duì)高致病性禽流感實(shí)行強(qiáng)制免疫。信陽(yáng)市政府招標(biāo)的禽流感疫苗有H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-4+Re-6）和H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）兩種，為了解這兩種禽流感疫苗免疫效果，信陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心組織相關(guān)人員歷時(shí)3個(gè)月，對(duì)信陽(yáng)地區(qū)高致病性禽流感防疫狀況進(jìn)行了深入的調(diào)查分析，掌握了信陽(yáng)市禽流感免疫狀況的第一手資料，以期為信陽(yáng)市的重大動(dòng)物疫病防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品采集 2014年3月～2014年6月， 各縣區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心從信陽(yáng)地區(qū)七縣兩區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)及散養(yǎng)戶，選取健康家禽，共采集血液樣品3653份，通過(guò)翅靜脈無(wú)菌采集全血2～3ml，冷藏條件下送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。

1.1.2 樣品的制備 將采集的血液樣品于3500r/min條件下離心10min，取上清液于1.5ml滅菌離心管中，-20℃保存?zhèn)溆么龣z。

1.1.3 檢測(cè)試劑盒及儀器設(shè)備

1.1.3.1 檢測(cè)試劑盒 禽流感H5亞型（Re-4株）（批號(hào)：2013005）、（Re-6株）（批號(hào)：2013006）血凝抑制試驗(yàn)診斷抗原和禽流感H5亞型（Re-4株）陰、陽(yáng)性血清（批號(hào)：2013004）及禽流感H5亞型（Re-6株）陰、陽(yáng)性血清（批號(hào)：2013004），購(gòu)自哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司。

1.1.3.2 1%雞紅細(xì)胞懸液 采集2～3只無(wú)禽流感和新城疫等抗體的健康公雞自行配制。

1.1.3.3 儀器設(shè)備 LC-800低速離心機(jī)（科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司）；Eppendorf 10～1000μl單道移液器及25～300μl多道移液器（德國(guó)Eppendorf公司）；303系列電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海樹立儀器儀表有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 禽流感抗體檢測(cè)采用血凝抑制試驗(yàn)（HI），按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/18936-2003進(jìn)行。

血凝試驗(yàn)抗體檢測(cè)方法判定標(biāo)準(zhǔn)：以完全抑制4單位抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI效價(jià)。當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照血清的HI效價(jià)與已知效價(jià)誤差不超過(guò)1個(gè)滴度，陰性對(duì)照血清的HI效價(jià)不高于2log2時(shí)，試驗(yàn)方可成立。被檢血清HI效價(jià)≤3log2判為陰性；=判為4log2可疑（可疑樣品應(yīng)重檢，重檢效價(jià)≥4log2判為陽(yáng)性，≤3log2判為陰性）；≥5log2判為陽(yáng)性。

1.2.2 群體免疫抗體陽(yáng)性率達(dá)到70%判定為群體合格。

1.2.3 疫苗使用情況調(diào)查采取現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查和問(wèn)卷調(diào)查相結(jié)合的方式，根據(jù)各縣區(qū)疫苗調(diào)撥使用情況，對(duì)2014年上半年政府招標(biāo)采購(gòu)每個(gè)中標(biāo)疫苗生產(chǎn)企業(yè)的每種疫苗開展了臨床免疫安全性調(diào)查。主要調(diào)查疫苗免疫注射后3d內(nèi)發(fā)生副反應(yīng)，包括應(yīng)激反應(yīng)、應(yīng)激發(fā)病、應(yīng)激死亡、應(yīng)激流產(chǎn)等。

2 結(jié)果

2.1 信陽(yáng)市H5N1高致病性禽流感滅活疫苗使用情況調(diào)查 見表1、表2、表3。

2.2 高致病性禽流感疫苗應(yīng)用效果調(diào)查結(jié)果 2014年上半年全市共調(diào)查免疫雞只500631只，雞群免疫后3d內(nèi)出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)的雞只70只，應(yīng)激反應(yīng)率為1.40；應(yīng)激發(fā)病雞只數(shù)0只；應(yīng)激死亡0只。詳見表4。

2014年上半年全市共調(diào)查免疫水禽89452只，群體免疫后3d內(nèi)出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)的水禽15只，應(yīng)激反應(yīng)率為1.68；應(yīng)激發(fā)病水禽數(shù)0只；應(yīng)激死亡0只。詳見表5。

3 分析

3.1 雞H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-4+Re-6）檢測(cè)情況分析 從圖1可以看到，各縣區(qū)禽流感抗體合格率均在70%以上，符合國(guó)家的群體合格率標(biāo)準(zhǔn)。H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-4）抗體，息縣、潢川、淮濱、浉河、新縣抗體合格率均為100%，平橋?yàn)?3.33%，其余縣區(qū)均在90%以上；H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）抗體息縣、潢川、淮濱、新縣抗體合格率為100%，平橋?yàn)?6.66%，其余縣區(qū)均在90%以上。

從圖2可以看到，檢測(cè)的各個(gè)疫苗廠家禽流感抗體合格率均在70%以上，符合國(guó)家的群體合格率標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 水禽H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）檢測(cè)情況分析 水禽H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）我市檢測(cè)了遼寧益康和乾元浩兩個(gè)廠家，抗體合格率分別為80%和92%，均在70%以上，免疫效果良好，特別是乾元浩達(dá)到90%以上。

3.3 H5N1高致病性禽流感滅活疫苗免疫的有效性 蛋雞是我市雞群中禽流感疫苗主要的受免對(duì)象。從表4看到，我市政府采購(gòu)的幾個(gè)疫苗生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的疫苗注射蛋雞后安全性較好，應(yīng)激發(fā)病、死亡均較少出現(xiàn)。調(diào)查中雞群出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)率1.40。像哈維科、哈藥集團(tuán)、乾元浩的禽流感疫苗注射后的副反應(yīng)率幾乎為零，蛋雞的產(chǎn)蛋性能受影響較小，在產(chǎn)蛋高峰期之前和之后注射，蛋雞的產(chǎn)蛋率出現(xiàn)短時(shí)期的下降，下降3%左右，一星期后能回到產(chǎn)蛋高峰期。

疫苗免疫后有效性好，保護(hù)率較高，未出現(xiàn)臨床發(fā)病的情況，疫苗保護(hù)力較強(qiáng)，保護(hù)效果良好。

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