章建紅，張海軍，張 恒，王正加*

（1. 浙江省寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 寧波 315040；

2. 浙江農(nóng)林大學(xué) 亞熱帶森林培育國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，浙江 臨安 311300）

DMSO、抗氧化劑與生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)全緣冬青扦插生根的影響

章建紅1，張海軍2，張 恒2，王正加2*

（1. 浙江省寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 寧波 315040；

2. 浙江農(nóng)林大學(xué) 亞熱帶森林培育國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，浙江 臨安 311300）

采用了不同基質(zhì)、不同扦插時(shí)間、不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及其不同濃度的處理，并在生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理的同時(shí)添加活性組分DMSO以及抗氧化劑VC、PVP，研究其對(duì)全緣冬青（Ilex integra）生根的影響。結(jié)果表明：全緣冬青扦插時(shí)間以3月初最適；最適基質(zhì)為泥炭：蛭石：珍珠巖 = 3：5：2（體積比）；NAA對(duì)全緣冬青扦插苗生根作用最為顯著，添加DMSO與VC、PVP對(duì)生根促進(jìn)作用明顯，最好的處理方法是NAA（200mg/L）＋1%DMSO＋Vc（500 mg/L）或NAA（200 mg/L）＋1%DMSO＋PVP（1 000 mg/L）浸泡0.5 h，生根率可達(dá)80%。

全緣冬青；扦插；育苗；生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑

全緣冬青（Ilex integra）系冬青科冬青屬常綠喬木，枝葉濃密緊湊，果球形，熟時(shí)鮮紅色。具有較強(qiáng)的耐鹽堿、耐干旱和抗風(fēng)能力，適生應(yīng)用范圍廣，是一種抗風(fēng)耐瘠的濱海珍貴樹種，十分適合作為長(zhǎng)三角沿海地區(qū)的行道樹、庭院樹、風(fēng)景林與防護(hù)林[1]，同時(shí)，全緣冬青也是建筑、家具、細(xì)木工等的優(yōu)質(zhì)用材。另外，全緣冬青系我國(guó)沿海島嶼與日本共有種，對(duì)研究我國(guó)和日本植物區(qū)系有學(xué)術(shù)意義。因其分布區(qū)狹窄，植株散生，母樹數(shù)量少，天然更新能力差，已處于亟待保護(hù)的境地，現(xiàn)已被列入浙江省珍稀瀕危保護(hù)植物名錄。

全緣冬青種子休眠期長(zhǎng)、具有隔年發(fā)芽的特性，由于貯藏時(shí)間長(zhǎng)，特別在夏季基質(zhì)的濕度難以控制，常使播種繁殖失敗。自然扦插也較難生根，采用一般的激素處理生根率也不到60%，且生根持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，增加了扦插期的管理難度[1]。因此，試驗(yàn)研究一種適宜全緣冬青扦插育苗的技術(shù)方法，對(duì)加快全緣冬青的快速繁殖，促進(jìn)全緣冬青資源的保護(hù)與合理開發(fā)具有十分重要的意義。

1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院高新農(nóng)業(yè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)園區(qū)的連棟大棚，該地域內(nèi)地勢(shì)平坦，土壤為沙壤土，肥力中等。試驗(yàn)地屬亞熱帶季風(fēng)性濕潤(rùn)氣候，因?yàn)l臨東海又帶有海洋性氣候特征，夏季濕熱，冬季干冷，雨水充沛，熱量充足，雨熱同步。年平均溫度16.2℃，最熱7月，平均溫度為28.1℃，最冷1月，平均溫度為4.2℃，極端最低氣溫－8.8℃，≥10℃的年均積溫為5 166.2℃，年均無霜期238 d，年平均相對(duì)濕度82%。

2 材料與方法

2.1 材料

從寧波農(nóng)科業(yè)科學(xué)研究院高新農(nóng)業(yè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)園區(qū)全緣冬青種質(zhì)資源圃中生長(zhǎng)旺盛的全緣冬青母本中剪取半木質(zhì)化的當(dāng)年生枝條或一年生硬枝作為插穗，剪成兩葉兩芽、長(zhǎng)度為4 ~ 6 cm，剪刀在使用前用75%以上酒精擦拭消毒，插穗要求切口平滑，不破皮不劈裂。上切口采用平切口，離芽1 cm左右，下切口采用斜切口，離芽的距離為0.5 cm左右，隨剪隨插。

2.2 方法

2.2.1 不同基質(zhì)配比對(duì)生根的影響 試驗(yàn)于2007年9月28進(jìn)行，以泥炭、蛭石、珍珠巖及其混配的7種基質(zhì)進(jìn)行扦插試驗(yàn)，每處理150個(gè)，不做任何激素處理，于2008年7月15日作調(diào)查，以成活率較高的基質(zhì)作為優(yōu)選基質(zhì)?；|(zhì)配比方案Ⅰ：泥炭；Ⅱ：蛭石；Ⅲ：珍珠巖；Ⅳ：泥炭：蛭石：珍珠巖 = 5：3：2（體積比，下同）；Ⅴ：泥炭：蛭石：珍珠巖 = 4：4：2；Ⅵ：泥炭：蛭石：珍珠巖 = 4：2：4；Ⅶ：泥炭：蛭石：珍珠巖 = 3：5：2。

2.2.2 不同扦插時(shí)間對(duì)生根的影響 使用泥炭：蛭石：珍珠巖 = 3：5：2 的基質(zhì)，以NAA濃度200 mg/L，浸泡0.5 h處理插穗，每組處理100個(gè)插條，選擇2008年3月8日、6月5日、9月4日、9月27日4個(gè)不同的扦插時(shí)間來進(jìn)行對(duì)比，于2009年6月3日統(tǒng)計(jì)生根情況。

2.2.3 不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理對(duì)生根的影響 試驗(yàn)于2008年9月4日進(jìn)行，使用泥炭：蛭石：珍珠巖 = 3：5：2為扦插基質(zhì)，分別以NAA、IAA、IBA、GGR6# 4種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度為100 mg/L和200 mg/L處理浸泡插穗各0.5 h。每組處理100個(gè)插條，于2009年6月3日統(tǒng)計(jì)生根情況。

2.2.4 不同NAA濃度對(duì)扦插生根的影響 于2009年9月4日，分別用100、200、500、1 000、2 000、3 000 mg/L的NAA溶液處理全緣冬青插穗，每組處理100個(gè)穗條，于2010年7月15日統(tǒng)計(jì)其生根情況。

2.2.5 抗氧化劑與細(xì)胞活性組分對(duì)扦插的影響 2011年3月8日，在進(jìn)行生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理的同時(shí)，在生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑中加入一定比例的抗氧化劑VC（抗壞血酸）或PVP（聚乙烯毗咯烷酮）和DMSO（二甲基亞砜），按表1進(jìn)行配比，每組處理100個(gè)插條，于2011年10月12日進(jìn)行每苗調(diào)查，統(tǒng)計(jì)其生根率、根長(zhǎng)和梢長(zhǎng)，分析不同的抗氧化劑和細(xì)胞活性組分對(duì)全緣冬青扦插苗生根及地上部分生長(zhǎng)的影響。

表1 抗氧化劑、細(xì)胞活性組分與生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的配比方案

2.2.6 插后管理 根據(jù)試驗(yàn)要求鋪設(shè)床寬100 cm，高度15 cm的扦插苗床，在苗床中鋪設(shè)經(jīng)消毒處理的扦插基質(zhì)。苗床上搭建拱棚，插后澆透水，在插穗上噴灑800倍液的多菌靈，并在拱棚上蓋薄膜，四周密封。緊貼薄膜覆蓋遮陽率55% ~ 65%的遮蔭網(wǎng)一層，在大棚外再架設(shè)一層遮陽網(wǎng)。在扦插初期保持基質(zhì)含水量為飽和含水量的60% ~ 70%，空氣相對(duì)濕度85% ~ 95%以上，扦插苗發(fā)根后，應(yīng)適當(dāng)降低基質(zhì)含水量，保持在飽和含水量的40%左右，空氣濕度在75%以上，一般每隔20 ~ 30 d補(bǔ)一次水。

拱棚內(nèi)溫度控制在20 ~ 25℃，如發(fā)現(xiàn)溫度過高（超過38℃），則通過遮陰、小拱棚膜上噴水以及加強(qiáng)大棚通風(fēng)來降溫。

2.2.7 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用DPS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各生理指標(biāo)數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，確定顯著性差異。

3 結(jié)果與分析

3.1 不同基質(zhì)配比對(duì)生根的影響

基質(zhì)是影響插條生根效果的重要因子之一，它的透氣透水性都會(huì)影響插條的生根與成活，不同基質(zhì)影響插條生根的效果不一。從表2中可以看出，使用純基質(zhì)作為扦插基質(zhì)時(shí)，泥炭、蛭石、珍珠巖均表現(xiàn)不理想；混合基質(zhì)中，以泥炭：蛭石：珍珠巖 = 3：5：2基質(zhì)最好，其生根率達(dá)19.33%±1.33%。

表2 不同基質(zhì)配比中全緣冬青的生根率比較

3.2 不同扦插時(shí)間對(duì)生根的影響

插穗內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)根原始體的分化具有重要意義[2]。從圖1可以看出，全緣冬青利用NAA處理后生根率明顯提高，平均生根率在50%，平均愈傷率在57%。生根率最高的是3月8日扦插的枝條，達(dá)67%，其次是9月4日；愈傷率最高的是也3月8日，達(dá)76%，最低是9月27日。與9月份扦插的相比，9月初扦插的成活率明顯要高于9月底扦插的，可能是因?yàn)槿壎嘈枰纬捎鷤M織的時(shí)間較長(zhǎng)，一般要在插后35 ~ 55 d，9月底扦插，在愈傷組織形成后，在從愈傷組織膨大向根誘導(dǎo)期發(fā)展的關(guān)鍵階段馬上又進(jìn)入低溫休眠期了，造成插穗內(nèi)的可溶性蛋白總量、總糖含量持續(xù)下降，至下一年，由于所消耗掉的養(yǎng)分過多，對(duì)生根產(chǎn)生了一定的影響。從不同的季節(jié)來看，6月初的生根率要比3月初與9月初的明顯低，這可能也是因?yàn)樵?月初扦插，愈傷組織剛形成后，馬上進(jìn)入高溫休眠期，從而影響了生根率。

圖1 不同扦插時(shí)間對(duì)生根的影響

3.3 不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)生根的影響

不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)扦插生根的影響見表3。

表3 不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)扦插生根的影響

從表3可以看出，不用生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理時(shí)，全緣冬青生根率極低，僅為2%，從4種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑與對(duì)照相比，除GGR6#不明顯外，其它幾種處理都能夠較明顯地提高生根率，尤以NAA處理后的效果最為明顯，平均生根率為36.5%；在生根數(shù)量上，經(jīng)NAA處理的插穗生根量明顯多于其他激素處理，同時(shí)，經(jīng)IBA處理能明顯促進(jìn)根長(zhǎng)生長(zhǎng)。

3.4 不同濃度NAA對(duì)扦插生根的影響

不同濃度NAA處理對(duì)全緣冬青生根的影響見表4。從表4可以看出，不同濃度NAA對(duì)全緣冬青的扦插生根率均達(dá)到顯著差異，以l00 mg/L處理2 h生根率最高達(dá)72%；1 000 ~ 3 000 mg/L的速蘸處理，生根率基本超過60%。平均生根數(shù)量以200 mg/L處理最好，達(dá)顯著水平。據(jù)報(bào)道，高濃度的生長(zhǎng)素可誘導(dǎo)乙烯的產(chǎn)生，而乙烯又對(duì)生根有抑制作用[3]，本試驗(yàn)中，3 000 mg/L的NAA處理可能就是處理產(chǎn)生的乙烯較多，因而對(duì)全緣冬青的生根不利，生根率反而降低。在試驗(yàn)中還觀察到，用NAA 200 mg/L處理，個(gè)別插穗蘸藥部位會(huì)變黑，蘸藥部位以上2 ~ 3 cm部分腫大，甚至開裂，但見到的愈傷組織并不多，插穗僅能維持成活，說明200 mg/L處理時(shí)，2 h的處理時(shí)間已經(jīng)過長(zhǎng)。

表4 不同濃度NAA處理對(duì)全緣冬青生根的影響

3.5 抗氧化劑與細(xì)胞活性組分對(duì)扦插的影響

DMSO對(duì)生物表層有很強(qiáng)的滲透能力，它常用作農(nóng)藥添加劑，以有效發(fā)揮農(nóng)藥的效力[4]；VC與PVP均是抗氧化劑，其在生物組培的防褐化中已有研究應(yīng)用[5~7]，本試驗(yàn)把它們應(yīng)用到扦插試驗(yàn)中。從表5中可以看出，與不作處理的清水相比，各種處理生根率均有明顯的提高。生根率最高的是NAA（200 mg/L）＋1%DMSO＋PVP（1 000 mg/L）處理達(dá)80%，最低的是NAA（100 mg/L），為37.7%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，添加各種抗氧化劑與細(xì)胞活性組分能顯著的提高全緣冬青生根率，尤其是添加DMSO后，其交互作用效果更加明顯。但在500 mg/L的NAA處理0.5 h時(shí)，加入DMSO，生根率反而下降明顯，這可能是因?yàn)镈MSO的強(qiáng)滲透性，加速了插穗對(duì)NAA的吸收效果，0.5h處理時(shí)間太長(zhǎng)，產(chǎn)生了藥害。

表5 加入不同抗氧化劑與細(xì)胞活性組分對(duì)扦插苗的影響

3 小結(jié)與討論

國(guó)內(nèi)外大量研究顯示，植物激素與扦插苗不定根形成之間存在著密切的關(guān)系[8~9]，插穗扦插成活的關(guān)鍵是插穗能否產(chǎn)生不定根，許多試驗(yàn)都證實(shí)了植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)插穗產(chǎn)生不定根具有促進(jìn)作用[10~11]。從本試驗(yàn)結(jié)果來看，用NAA、IAA、IBA、GGR6#四種生長(zhǎng)激素處理均能提高其生根率，尤以NAA對(duì)不定根的誘導(dǎo)作用效果最為明顯。同時(shí)，激素處理時(shí)，添加一定量的活性組分DMSO，并添加抗氧化劑VC、PVP，能有效促進(jìn)生根，其生根率可達(dá)80%，其組合處理方式為NAA（200 mg/L）＋1%DMSO＋VC（500mg/L）或NAA（200 mg/L）＋1%DMSO＋PVP（1 000 mg/L）混配溶液浸泡0.5 h。

試驗(yàn)表明，全緣冬青扦插時(shí)以早春（3月初）扦插最適，扦插時(shí)間宜早不宜遲，使全緣冬青有更充足的生根時(shí)間，基質(zhì)配比以泥炭：蛭石：珍珠巖 = 3：5：2最適。

對(duì)于此類難生根樹種的扦插繁殖，全緣冬青插穗內(nèi)是否存在阻礙生根的物質(zhì)或解剖結(jié)構(gòu)，如有機(jī)酸、單寧或機(jī)械組織等，以及如何來解除或降低這種阻礙物質(zhì)，克服生根時(shí)間過長(zhǎng)，以及插穗生根過程中的活性組分與抗氧化劑添加后，與生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)、碳水化合物和抑制劑的相互作用機(jī)理等方面，還有待于進(jìn)一步研究。

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Effect of DMSO, Antioxidants and Growth Regulators on Rooting of Ilex integra Cuttings

ZHANG Jian-hong1，ZHANG Hai-jun2，ZHANG Heng2，WANG Zheng-jia2*
（1. Ningbo Agriculture Academy of Zhejiang, Ningbo 315040, China; 2. State Key Laboratory Cultivation Base of Subtropical Silviculture, Zhejiang A and F University, Lin’an 311300, China）

Experiments were conducted on effect of different treatment on rooting of Ilex integra cuttings. Treatments had different substrates, different cutting times, different growth regulators and their different concentrations, and growth regulators+ DMSO and VC, PVP. The results showed that the optimal time for cutting was in early March, substrates was peat: vermiculite: perlite =3:5:2, growth regulator was NAA, adding DMSO and VC, PVP. The experiments indicated the best treatment was that cutting soaked 0.5 hour in solution of NAA (200 mg / L) +1% DMSO + VC (500mg / L) or NAA (200mg / L) +1% DMSO + PVP (1000mg / L) had rooting rate of 80%.

Ilex integra; cuttings; seedling cultivation; growth regulator

S723.1

A

1001-3776（2014）01-0042-05

2013-11-07；

2013-12-08

寧波市科技局項(xiàng)目（2006C100003）

章建紅（1976－），男，浙江蘭溪人，高級(jí)工程師，碩士，從事林業(yè)種苗研究；*通訊作者。