傅強

中圖分類號：S858 文獻標識碼：C 文章編號：1001-0769（2014）05-0037-03

1 引言：

毫無疑問，新城疫（ND）是造成養(yǎng)禽業(yè)巨大經(jīng)濟損失的重要疫病之一。盡管該病早在85年前就被人們所認識，病原體為禽副黏病毒1型（AMPV-1）的成員，僅有一個血清型，已有多種類型的商品化疫苗可供使用，但是，新城疫仍持續(xù)在全球范圍內對獸醫(yī)工作者和養(yǎng)禽生產者構成威脅和挑戰(zhàn)。

在養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的初期，養(yǎng)禽業(yè)者的主要目標是防止新城疫給家禽造成高死亡率。隨著與該病防控相關的科技進步，養(yǎng)禽業(yè)開始不僅僅關注ND疫苗的有效性，而且把目光投向疫苗產品的安全性上，只有足夠安全的疫苗才能避免產生與新城疫活苗使用相關的、影響禽生產性能的免疫反應。

本文從大約80年前的首次疫苗技術突破到當今基于分子技術的生物制劑，簡要回顧和概述了新城疫疫苗的發(fā)展歷程。

2 中等毒力毒株

1926年首次報道了在印度尼西亞爪哇島和英格蘭紐卡斯爾（Newcastle）暴發(fā)新城疫，從此以后，業(yè)界開展了大量的新城疫免疫防控技術研究。

起初的研究是采用滅活的病毒材料進行注射，但生產和標準化的問題阻礙了該方法的大規(guī)模推廣。隨后，世界各地開始了減毒疫苗的研制。

上世紀30年代在英格蘭，Lyer和Dobson將Herts 33毒株通過雞胚連續(xù)傳代，獲得了較低毒力的病毒，命名為Hertfordshire （H）株，可用作理想安全的疫苗抗原進行大規(guī)模免疫接種。

之后，Lyer將印度分離株-Ranikhet株進行同樣致弱處理，獲得了中等毒力的Mukteswar株。在巴勒斯坦，Komarov將一株新城疫野毒株在雛鴨腦內連續(xù)傳代，獲得了另一株相似的中等毒力毒株。

在美國，Beaudette篩選了105株新城疫病毒分離株，并從中挑選出一株名為Roakin的毒株，該毒株被認為適合用作疫苗抗原免疫。1948年，Roakin株投入商業(yè)化生產和應用，用于4周齡以上的雞翼翅免疫刺種。

盡管這些疫苗都能誘導產生對野毒感染的良好保護，但問題在于，這些毒株的毒力雖然減弱到了一定程度，但仍然會在敏感雞群引起臨床疾病和高死亡率。而且，這些疫苗只能在4周齡以上的雞群上使用。由于1日齡雛雞的母源免疫力參差不齊，雞群中的部分雞只可能還需要在4周齡前進行免疫接種。這一現(xiàn)狀激發(fā)了業(yè)界對更具安全性的ND疫苗的強烈需求，以便在更早的日齡實施免疫。

3 緩發(fā)性毒株疫苗

在20世紀40年代，研發(fā)預防新城疫的活疫苗是當時美國一些研究機構的首要工作。1947年，弗吉尼亞理工大學的Hitcher對從新澤西農業(yè)實驗站的家禽病理學家Beaudette那獲得的毒株進行了研究，研發(fā)出了疫苗株-B1毒株，該毒株在1950年獲得了商業(yè)化生產許可。

由于市場對溫和性弱毒疫苗的需求強勁，Beaudette對之前篩選的105株毒株的試驗記錄進行了整理，期望找到可以作為低毒力候選疫苗株使用的毒株。最后，他從中選出了3株，經(jīng)過在Vineland家禽實驗室為期數(shù)月的補充實驗后，終于挑選出一株用作疫苗。該毒株分離自一個老板叫Adam La Sota的農場，所以將疫苗毒株命名為LaSota 株。

1952年，在大西洋彼岸，Asplin報道了他多年前分離到的一個ND毒株的研究結果，該毒株分離自英格蘭一個爆發(fā)輕微呼吸道疾病的雛雞群中。該毒株與B1株在毒力和免疫原性上相似，被命名為F株。

然而，隨著世界養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展，疫苗反應開始成為集約化養(yǎng)禽業(yè)面臨的一個重要問題。其中一個降低疫苗接種反應（PVR）的方法是從現(xiàn)用的ND毒株中篩選出亞克隆病毒，并進行同源增殖培養(yǎng)。如此獲得的“新”疫苗病毒引起的疫苗反應小得多，且保留其抗原性。這一方法的很好例子是從La Sota株中篩選的Clone 30株。這些克隆的ND疫苗最初在80年代投向市場，得到了廣大生產者的認可。

4 非致病性腸道疫苗

盡管克隆的緩發(fā)性毒株疫苗相對于原始毒株能減少疫苗反應，但依然會引起家禽呼吸道系統(tǒng)的明顯損害，隨著時間的推移，克隆化疫苗在集約化養(yǎng)禽場逐漸被認為不那么理想了。

最近，不僅能在呼吸道中復制，而且在腸道中也能復制并存留呼吸系統(tǒng)中的ND疫苗株被投放市場，受到了養(yǎng)禽生產者的普遍接受。該類疫苗被歸類為非致病性腸道毒株，最常見的商品化疫苗株有Ulster 2C、PHY.LMV.42和V4。

這些非致病性毒株腦內接種致病指數(shù)（ICPI）很低（表1），因而它們引起的疫苗接種后反應十分輕微。因其安全性較高，可以用于孵化場1日齡雛雞的免疫接種。

研究發(fā)現(xiàn)，一些非致病性腸道毒株的耐熱性要強于低毒力毒株。經(jīng)實驗室篩選和克隆，腸道毒株的這種耐熱特性進一步增強，產生了耐熱性ND病毒疫苗。耐熱性疫苗毒株用于散養(yǎng)雞群的免疫具有明顯的優(yōu)勢，因為該疫苗的運輸不需要特定的冷藏運輸鏈，而且可以添加在飼料中使用。使用最廣泛的耐熱疫苗株是NDV4-HR，率先在馬來西亞使用，隨后在東南亞和非洲一些國家也進行了嘗試，獲得了不同程度的成功。

正因為這些新的非致病性疫苗毒株的應用，疫苗免疫反應的一些弊端得以解決，養(yǎng)禽生產者可以采用安全的噴霧免疫方式來刺激產生最佳局部免疫力。然而，對于孵化場的免疫，由于母源抗體的部分干擾，這類疫苗的使用仍有所不便，因此，建議在存在ND嚴重威脅的情況下，有必要進行重復免疫，有時還聯(lián)合使用滅活疫苗免疫。

5 活疫苗和滅活疫苗在孵化場的聯(lián)合應用

20世紀70年代，對活疫苗和滅活疫苗聯(lián)合使用免疫1日齡雛雞以抵抗ND感染的方案進行了廣泛研究。結果表明，相比于單獨使用活疫苗或滅活疫苗，當活疫苗和滅活疫苗聯(lián)合應用時，血凝抑制（HI）效價越高，保護效力更強，免疫持久性更長。

在強大的野毒感染壓力下，在孵化場聯(lián)合應用活疫苗和滅活疫苗的優(yōu)勢尤為明顯，這是因為兩種疫苗相結合的免疫方案將活疫苗誘導的局部免疫和滅活疫苗誘導的體液免疫（循環(huán)抗體）相結合，能增強和延長疫苗的保護效力。盡管聯(lián)合應用確實能增強對ND感染的保護力，但母源抗體的干擾還是會降低保護效力，因此在ND高感染壓力下的養(yǎng)禽場，建議實施加強免疫。

6 載體疫苗

載體疫苗可以簡單地定義為是來源于一種微生物的一個或多個基因（稱為供體）被插入另一種微生物（稱為載體）的DNA所獲得的產物。通過這種方法，這兩種微生物的免疫相關抗原隨著載體抗原的復制而遞呈給接種動物的免疫系統(tǒng)，從而誘導產生抗載體和供體（病原）的免疫應答反應。

目前，市場上有兩種不同類型的針對新城疫的載體疫苗。第一種是使用禽痘病毒作為載體，編碼HN蛋白的基因被插入禽痘病毒DNA中，已在火雞中廣泛應用。第二種載體疫苗是構建時將F蛋白基因插入到火雞皰疹病毒（HVT）的DNA中，主要用于雞群。

HVT-NDV載體疫苗能誘導針對ND非常好的保護，可顯著減少攻毒后的排毒。由于此類載體疫苗的免疫雞并不接觸活的ND病毒，產品的安全性極高。此外，該疫苗與其他呼吸道活疫苗如傳染性支氣管炎病毒疫苗沒有相互干擾現(xiàn)象。由于HVT的周期性復制，針對ND的免疫力被不斷增強，免疫雞從而能獲得持久保護。更重要的是，當該疫苗應用于雛雞時，可完全克服其它活疫苗和滅活疫苗所要面對的ND母源抗體（MDA）干擾問題。

7 總結

從養(yǎng)禽業(yè)開始發(fā)展以來，預防家禽死亡一直是生產者首要考慮的因素。在ND流行地區(qū)，疫苗接種方案成為該病防控的關鍵措施。已有幾種不同類型的商品化活疫苗可供選擇以應對該病的挑戰(zhàn)。從疫苗反應強的中等毒力毒株到非常安全的ND載體疫苗，這種演變清楚的表明，研究者們始終關注著生產者對疫苗的需求。

然而，即使市場上有非常有效的疫苗，單獨接種疫苗也不足以控制ND。在該病的任何有效預防計劃中，嚴格的生物安全規(guī)范和適當?shù)男l(wèi)生措施是必不可少的。

最后，應重點指出的是，霉菌毒素、環(huán)境因素以及傳染性法氏囊病病毒（IBDV）、馬立克病毒（MDV）和/或雞傳染性貧血病毒（CIAV）等免疫抑制性病毒的并發(fā)感染，都會極大地影響疫苗接種的效果。應將所有這些因素加以綜合考慮，才能使免疫雞群獲得抗ND野毒感染的最佳免疫保護效果?！酢?/p>

原題名：Prevention of Newcastle Disease——past，present and future（英文）