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姜黃素對小鼠離體空腸平滑肌舒縮活動的影響

2014-06-05 09:51:07張秋麗于小玲
關(guān)鍵詞:離體阿托品姜黃

張秋麗,于小玲

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院,山東青島266021)

姜黃素對小鼠離體空腸平滑肌舒縮活動的影響

張秋麗,于小玲

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院,山東青島266021)

目的探討姜黃素對胃腸道蠕動是否有直接影響。方法取小鼠離體空腸平滑肌,放入37℃Krebs液浴槽中,通入95%氧氣和5%二氧化碳混合氣體,進(jìn)行如下實驗:第一組小鼠空腸平滑肌,加入不同濃度的姜黃素,測量記錄空腸平滑肌的自主收縮變化;第二組給予乙酰膽堿收縮平滑肌,然后加入姜黃素,觀察姜黃素對平滑肌收縮的影響;第三組給予阿托品舒張平滑肌,然后加入姜黃素,觀察姜黃素對平滑肌舒張的影響;第四組給予腎上腺素舒張平滑肌,然后加入姜黃素,觀察姜黃素對平滑肌舒張的影響。統(tǒng)計學(xué)處理經(jīng)SPSS19.0軟件,所獲數(shù)據(jù)用方差分析t檢驗。結(jié)果小鼠空腸平滑肌加入姜黃素后,平滑肌自主收縮明顯下降(P<0.01),降低的幅度與姜黃素劑量呈現(xiàn)相關(guān)性;應(yīng)用乙酰膽堿導(dǎo)致空腸收縮后,再加姜黃素,空腸平滑肌的收縮幅度也有明顯的下降(P<0.01);給予阿托品導(dǎo)致小鼠平滑肌舒張后,再給予姜黃素,平滑肌收縮幅度進(jìn)一步降低;給予腎上腺素引起小鼠平滑肌舒張后,再給予姜黃素孵育,平滑肌收縮幅度進(jìn)一步降低。結(jié)論姜黃素對小鼠離體空腸平滑肌具有直接舒張作用。

姜黃素/藥物作用;空腸;平滑??;體外研究

姜黃素是一種天然酚類物質(zhì),來源于植物姜黃的干燥根莖,是從姜黃屬中藥姜黃,郁金等的塊莖中提取出來的一種酚性色素。目前主要用于食品添加劑。國內(nèi)外研究表明姜黃素具有較好的抗炎、抗氧化、抗腫瘤作用,并且研究過程中發(fā)現(xiàn),姜黃素可以廣泛改善胃腸蠕動障礙,并對腸道疾病有良好的治療作用,現(xiàn)已被廣泛用于胃腸道疾病的治療,本實驗室前期研究表明,對注射過順鉑、阿托品的小鼠整體給藥,可以顯著減輕其胃腸蠕動功能的障礙,促進(jìn)小鼠胃排空及其小腸蠕動[1],但姜黃素促進(jìn)胃腸蠕動的作用和具體機(jī)制到目前為止還沒有相關(guān)的報道。本實驗研究用姜黃素直接作用于小鼠離體空腸平滑肌條,目的在于觀察姜黃素是否對胃腸道運(yùn)動有直接刺激作用,以及姜黃素是否對離體的平滑肌有收縮或舒張的影響?,F(xiàn)將實驗結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料選用雄性昆明種小鼠24只,重量大約為20~25 g,購自青島市藥檢所動物中心。姜黃素購自sigma公司,選擇臨床常用乙酰膽堿(Ach)、阿托品、腎上腺素制劑。

1.2 方法將小鼠隨機(jī)分成四組。實驗前給小鼠禁食12 h,然后脫臼處死,分離小鼠空腸,制成平滑肌條,第一組為姜黃素組,第二組為乙酰膽堿+姜黃素組,第三組阿托品+姜黃素組,第四組為腎上腺素+姜黃素組。取小鼠空腸平滑肌條,放入37℃Krebs液浴槽中,在浴槽中通入有95%O2和5%CO2組成的混合氣體,進(jìn)行下列實驗:第一組先測不加藥物時的空腸平滑肌收縮波平均振幅(通過多道生理信號采集處理系統(tǒng)測量記錄空腸平滑肌的張力變化),后加入姜黃素,分別測姜黃素濃度為10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L平滑肌收縮波振幅;第二組給予乙酰膽堿收縮平滑肌,測量記錄空腸平滑肌的張力變化,收縮穩(wěn)定后再加入姜黃素,測量記錄空腸平滑肌的張力變化;第三組給予阿托品舒張平滑肌,測量記錄空腸平滑肌的張力變化,舒張穩(wěn)定后,再加入姜黃素,測量記錄空腸平滑肌的張力變化;第四組給予腎上腺素舒張平滑肌,測量記錄空腸平滑肌的張力變化,舒張穩(wěn)定后,再加入姜黃素,測量記錄空腸平滑肌的張力變化。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析、LSD-t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度姜黃素對小鼠空腸肌條收縮波平均振幅的影響對照組空腸平滑肌自主收縮波振幅為(0.31±0.05)g;加入姜黃素濃度為10μmol/L時,收縮波振幅為(0.27±0.05)g;濃度達(dá)到20μmol/L時,收縮波振幅有所降低,為(0.23±0.05)g;濃度達(dá)到30 μmol/L時,收縮波振幅明顯降低為(0.17±0.04)g,P<0.05;濃度達(dá)到40 μmol/L時,收縮波振幅降低幅度更大(0.15±0.06)g,P<0.01,所以收縮波降低幅度與姜黃素有劑量相關(guān)性。

2.2 姜黃素對Ach或阿托品/腎上腺素(附加藥物)誘導(dǎo)的空腸收縮或舒張振幅的影響(表1)。

表1 姜黃素對Ach/阿托品/腎上腺素誘導(dǎo)的空腸收縮或舒張振幅的影響

表1 姜黃素對Ach/阿托品/腎上腺素誘導(dǎo)的空腸收縮或舒張振幅的影響

*:與對照組相比,P<0.05;**:與加入乙酰膽堿后相比,P<0.01;#:與對照組比,P<0.05;##:與加入阿托品后相比,P<0.01;$:與對照組相比,P<0.01;$$:與加入腎上腺后相比,P<0.05。

組別例數(shù)加藥前加入附加藥物后再加入姜黃素后收縮波振幅(g)收縮波振幅(g)收縮波振幅(g)姜黃素30 μmol/L+乙酰膽堿組60.31±0.050.42±0.07*0.25±0.07**姜黃素30μmol/L+阿托品組60.32±0.060.23±0.05#0.12±0.07##姜黃素30μmol/L+腎上腺組60.31±0.040.17±0.05$0.11±0.07$$

3 討論

研究顯示姜黃素具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等多種作用,姜黃素不良反應(yīng)少,無毒副作用,世界衛(wèi)生組織認(rèn)定為安全藥物[2]。國內(nèi)外研究證明姜黃素具有抗氧化、抗炎、抗癌[3]、抑制細(xì)菌、促進(jìn)傷口愈合、抗凝以及保護(hù)肝臟功能的作用[4]。

多種研究表明,姜黃素可以減輕小鼠腸炎模型、胃潰瘍模型的胃腸損傷[5],改善腸黏膜的通透性,我們先前發(fā)現(xiàn)姜黃素整體灌胃給藥可以改善胃腸運(yùn)動的功能,并且可以改善順鉑導(dǎo)致的小鼠胃腸功能紊亂以及阿托品和一氧化氮導(dǎo)致的胃腸蠕動減慢[1],說明無論胃腸道有無蠕動功能障礙,姜黃素整體給藥都能促進(jìn)其蠕動。

本次研究采用姜黃素直接作用于小鼠離體空腸,觀察姜黃素所起的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn),第一組小鼠空腸加入姜黃素后,隨著濃度增高,收縮波振幅降低幅度依次增大,說明平滑肌收縮波降低幅度與姜黃素有劑量相關(guān)性。當(dāng)先用Ach孵育空腸平滑肌條,發(fā)現(xiàn)收縮興奮,收縮波振幅較之前增大(P<0.05),波幅穩(wěn)定后,加入30 μM姜黃素,發(fā)現(xiàn)空腸離體肌條收縮波振幅有了明顯減小(P<0.01),更換新鮮Krebs液,發(fā)現(xiàn)離體肌條收縮波振幅恢復(fù)原來大小。先用阿托品孵育空腸離體平滑肌條,發(fā)現(xiàn)空腸平滑肌舒張,收縮波振幅明顯減小(P<0.05),振幅穩(wěn)定后再加入30 μM姜黃素,發(fā)現(xiàn)小鼠空腸離體肌條收縮波振幅進(jìn)一步減小(P<0.01),同樣更換新鮮Krebs液,結(jié)果發(fā)現(xiàn)離體肌條收縮波振幅恢復(fù)到原來大小。如果先用腎上腺素孵育空腸離體平滑肌條,空腸平滑肌舒張,收縮波振幅明顯減小(P<0.01),振幅穩(wěn)定后再加入30 μM姜黃素,發(fā)現(xiàn)小鼠空腸離體肌條收縮波振幅進(jìn)一步減小(P<0.05),更換新鮮Krebs液,結(jié)果發(fā)現(xiàn)離體肌條收縮波振幅恢復(fù)到原來大小。由以上實驗結(jié)果,我們判斷姜黃素可以直接抑制平滑肌的自主收縮活動,并且在用乙酰膽堿、阿托品、腎上腺素等藥物收縮或擴(kuò)張空腸平滑肌的基礎(chǔ)上,仍然能起到其抑制腸道蠕動的作用,因此姜黃素對于小鼠腸道的整體給藥及離體情況下用藥,作用恰好相反,由此,說明我們認(rèn)為整體給藥之所以能促進(jìn)胃腸道蠕動,原因是姜黃素在體內(nèi)的代謝物在起作用。因為目前有關(guān)姜黃素對胃腸道作用報道極少,作用機(jī)制研究國內(nèi)外未見報道,到底是姜黃素的哪種代謝產(chǎn)物起到促進(jìn)胃腸蠕動的作用,需要進(jìn)一步研究。

[1]羅霜,于小玲,李紅靜.姜黃素促進(jìn)小鼠胃腸蠕動作用及機(jī)制初步探討[J].齊魯醫(yī)學(xué)雜志,2012,27(10):431-432.

[2]Aggarwal BB,Harikumar KB.Potential therapeutic effects of curcumin,the anti-inflammatory agent,against neurodegenera-tive,cardiovascular,pulmonary,metabolic,autoimmune and neoplastic diseases [J].Int J Biochem Cell Biol,2009,41,40-59.

[3]Ruby AJ,Kuttan G,Babu KD,et al.Anti-tumour and antioxidant activity of natural curcuminoids[J].Cancer Lett,1995,94:79-83.

[4]Subramanian L.Selvam R:Prevention of CCl-induced hepatotoxicity by aqueous extract of turmeric[J].Nutr Res,1999,19:429-441.

[5]Hanai H,Sugimoto K.Curcumin has bright prospects for the treatment of inflammatory bowel disease[J].Curr Pharm Des,2009,15(18): 2087-94.

Effects of Curcumin on the Activity of Isolated Jejunum Smooth Muscle of Mice

Zhang Qiuli,Yu Xiaoling
(Medical of Qingdao University,Qingdao 266021,Shandong)

Objective To investigate whether curcumin has a direct effect on the motility of the gastrointestinal tract. Methods The jejunum smooth muscle of mice were immediately removed and we put it Into the 37℃Krebs liquid bath gassed with 95%O2and 5%CO2.The experiment is following:The first group of mice jejunum,we puted different concen?trations of curcumin,measured voluntary contraction change of jejunal smooth muscle,then record it.The second group,we put the Ach,smooth muscle contracted,adding curcumin,to observe the effects of curcumin on smooth muscle contracted. The third groups,we put the atropine,smooth muscle diastoled,adding curcumin,to observe the effects of curcumin on smooth muscle relaxated.The fourth groups,we put the epinephrine,smooth muscle diastoled,adding curcumin,to observe the effects of curcumin on smooth muscle relaxated.Statistical processing by SPSS19.0 software,data obtained by variance analysis test.Results After curcumin were puted into the jejunum smooth muscle,the average contractile amplitude was significantly reduced(P<0.05).After adding Ach to jejunum smooth muscle,the average contractile amplitude of the jeju?num smooth muscle was enlarged,then added curcumin to it,we observed the average contractile amplitude obviously de?creased(P<0.01).After adding atropine to jejunum smooth muscle,the average contractile amplitude of the jejunum smooth muscle was decreased,then added curcumin to it,we observed the average contractile amplitude more significantly de?creased(P<0.05).After adding epinephrine to jejunum smooth muscle,the average contractile amplitude of the jejunum smooth muscle was decreased,then added curcumin to it,we observed the mean contractile amplitude more significantly de?creased(P<0.05).Conclusion Curcumin directly diastole the jejunum smooth muscle of mice.

curcumin/drug effects;jejunum;smooth muscle;in vitro

R28.55

A

1008-4118(2014)01-0001-03

2014-03-15

10.3969/j.issn.1008-4118.2014.01.01

張秋麗(1981-),女,現(xiàn)在菏澤醫(yī)學(xué)專科學(xué)校工作。

于小玲,Email:xiaoling_yu2004@163.com

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