萬(wàn)景旺等

摘要：為了研究活體生防菌與生物源農(nóng)藥混合使用對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)的防治效果，利用生防菌Jdm2分別與微生物源農(nóng)藥阿維菌素及植物源農(nóng)藥苦參堿、印楝素、藜蘆堿混用對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)進(jìn)行防治。單獨(dú)使用各藥劑時(shí)，生防菌Jdm2、阿維菌素、苦參堿、印楝素及藜蘆堿對(duì)黃瓜南方根結(jié)線蟲(chóng)的防效分別是36%、42%、48%、48%和30%，分別使黃瓜單果增重15%、14%、18%、25%和10%。當(dāng)Jdm2分別與阿維菌素、苦參堿、印楝素、藜蘆堿減量混用時(shí)，防效分別達(dá)到50%、56%、54%、44%，對(duì)黃瓜單果增重分別達(dá)到28%、31%、27%、18%。可見(jiàn)在各自減量的情況下，生防菌與生物源農(nóng)藥混用可對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)的防治起到增效作用。黃瓜平均單果重與黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)防效呈正相關(guān)（r=0.92），說(shuō)明根結(jié)線蟲(chóng)病情與黃瓜產(chǎn)量有著密切聯(lián)系。

關(guān)鍵詞：黃瓜；根結(jié)線蟲(chóng)??；生防菌；生物源農(nóng)藥；混用；增效

中圖分類號(hào)： S432.4+5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）04-0108-03

收稿日期：2014-02-17

基金項(xiàng)目：國(guó)家公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)（編號(hào)：SQ201403032）；江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號(hào)：CX（10）206]。

作者簡(jiǎn)介：萬(wàn)景旺（1987—），男，河南商丘人，碩士研究生，主要從事生物化工與生物技術(shù)研究。E-mail：cumtwan@gmail.com。

通信作者：肖雷（1975—），男，江蘇徐州人，博士，副教授，主要從事生物工程研究。Tel：（0516）83591070；E-mail：lxiao@cumt.edu.cn。根結(jié)線蟲(chóng)（Meloidogyne spp.）是一類重要的植物病原線蟲(chóng)，可寄生2 000～3 000種植物，造成嚴(yán)重危害，產(chǎn)量損失一般為10%～30%，嚴(yán)重者高達(dá)50%以上。根結(jié)線蟲(chóng)主要危害植物根部，使根部形成串球狀根結(jié)，破壞根組織的分化和生理活動(dòng)，影響地上部分生長(zhǎng)發(fā)育[1]。根結(jié)線蟲(chóng)中，以南方根結(jié)線蟲(chóng)（M. incognita）的危害最為普遍[2]。對(duì)于根結(jié)線蟲(chóng)病的防治，歷來(lái)以化學(xué)藥劑為主，但化學(xué)殺線蟲(chóng)劑對(duì)環(huán)境污染嚴(yán)重，使用過(guò)程中對(duì)人、畜不安全，于是越來(lái)越多的研究者致力于安全高效的殺線劑的研究工作[3]。而其中應(yīng)用微生物農(nóng)藥及植物源農(nóng)藥等生物源農(nóng)藥進(jìn)行根結(jié)線蟲(chóng)防治的研究較多。微生物農(nóng)藥是指由微生物及其代謝產(chǎn)物加工而成的具有殺蟲(chóng)、殺菌、除草、殺鼠或調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)的具有農(nóng)藥活性的物質(zhì)，包括農(nóng)用抗生素和活體微生物農(nóng)藥，是生物防治的物質(zhì)基礎(chǔ)和重要手段[4]。目前生產(chǎn)中已有一些芽孢桿菌（Bucillus spp.）用于根結(jié)線蟲(chóng)防治，收到了良好效果[5-6]。阿維菌素是由灰色鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)生的一種新型抗生素，對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)具有良好的防效[7-8]。植物源農(nóng)藥如苦參堿、印楝素和藜蘆堿等也對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)具有較高的防治效果[9-10]。阿維菌素與植物源農(nóng)藥復(fù)配或混用對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)等植物病原表現(xiàn)出了良好的拮抗效果[11-13]?；铙w生防菌與化學(xué)農(nóng)藥混用以及活體生防菌之間的混用在防治植物病害中的應(yīng)用也有報(bào)道[14-15]，但卻很少有利用活體生防菌與生物源農(nóng)藥混用來(lái)防治根結(jié)線蟲(chóng)的研究。本試驗(yàn)利用生防菌Jdm2分別與微生物源農(nóng)藥阿維菌素和植物源農(nóng)藥苦參堿、印楝素、藜蘆堿混用對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)進(jìn)行防治，探討生防菌與生物源農(nóng)藥的混用效果。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)時(shí)間、地點(diǎn)

田間試驗(yàn)于2012年在江蘇省淮安市丁集鎮(zhèn)進(jìn)行，室內(nèi)試驗(yàn)在江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所進(jìn)行。試驗(yàn)土壤類型為沙土兩合土，肥力中等偏上，有機(jī)質(zhì)含量2.0 g/kg，pH值82，有效磷10～15 mg/kg，速效鉀90～100 mg/kg，有效鋅 1.0 mg/kg，有效硼0.4 mg/kg。

1.2試驗(yàn)材料

1.2.1供試作物供試作物為黃瓜，品種為“津研35”，砧木為黑籽南瓜。

1.2.2供試菌株供試菌株Jdm2為江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所分離得到，經(jīng)鑒定枯草芽孢桿菌（Bucillus subtilis）。將該菌株接種到改良PD培養(yǎng)液中培養(yǎng)（30 ℃、150 r/min）[16]，當(dāng)培養(yǎng)至D600 nm為 0.5～0.8 時(shí)，將種子菌液以1 ∶100體積比加入PD培養(yǎng)液中，振蕩培養(yǎng)20～24 h，菌株發(fā)酵液作為接種物。接種后同樣條件搖培至D600 nm 為1.0左右（約108 CFU/mL），發(fā)酵液稀釋后灌根使用。

1.2.3供試藥劑1.8%阿維菌素乳油（陜西上格之路生物科技有限公司），0.3%苦參堿水劑（河南省亞樂(lè)生物科技股份有限公司），0.5%印楝素乳油（云南光明印楝產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)股份有限公司），0.5%藜蘆堿可溶液劑（山東聊城賽德農(nóng)藥有限公司）。

1.3試驗(yàn)方法

于黃瓜移栽時(shí)采用生防菌及各藥劑進(jìn)行灌根處理。每個(gè)處理3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)小區(qū)面積38 m2，定植210株，隨機(jī)排列。采用灌根法施藥，每株灌根500 mL藥劑。處理藥劑濃度參照表1。

2.3黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病情與黃瓜果實(shí)單果重的相關(guān)性分析

由圖3分析可知，黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病情與黃瓜果實(shí)發(fā)育有顯著關(guān)系，不同處理防效越高，其平均單果重也就越高，兩者呈正相關(guān)（r=0.92）。說(shuō)明黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病對(duì)黃瓜果實(shí)發(fā)育有很大的影響，根結(jié)線蟲(chóng)病害嚴(yán)重的黃瓜植株，其果實(shí)發(fā)育遲緩，質(zhì)量明顯減輕。

3討論與結(jié)論

單獨(dú)使用生防菌作為防治因子防治植物病害時(shí)，容易受到自然環(huán)境條件因素的干擾，造成田間防治效果不理想、不穩(wěn)定。本研究利用生防菌Jdm2分別與微生物源農(nóng)藥阿維菌素及植物源農(nóng)藥苦參堿、印楝素、藜蘆堿混用來(lái)防治黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病，結(jié)果表明，混用的田間防效均不同程度高于兩者單獨(dú)使用，表現(xiàn)出不同程度的增效作用。這可能是因?yàn)樯谰蜕镌崔r(nóng)藥對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)的作用機(jī)理不同，即生物源農(nóng)藥具有快速穩(wěn)定的體外殺蟲(chóng)作用，主要作用于生活在土壤中的2齡幼蟲(chóng)；而生防菌株不僅對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)具有抑制作用，還能顯著抑制根結(jié)線蟲(chóng)卵孵化，甚至有可能誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性，抵制根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)的侵入[18-19]。

當(dāng)生防菌Jdm2分別與幾種生物源農(nóng)藥混用防治黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病害時(shí)，防治效果差異與單用生物源農(nóng)藥相似，如單獨(dú)使用時(shí)藜蘆堿防效最低，混用時(shí)，生防菌Jdm2與藜蘆堿的防效也是最低的，說(shuō)明生防菌Jdm2與生物源農(nóng)藥混用時(shí)，防效中生物源農(nóng)藥貢獻(xiàn)比率較大。當(dāng)單獨(dú)使用時(shí)，印楝素防效最高，但與生防菌Jdm2混用后，其防效要低于苦參堿與生防菌Jdm2混用，表明苦參堿與生防菌Jdm2增效作用更為明顯。本研究探討了黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病情指數(shù)與黃瓜重量之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)兩者存在較高的相關(guān)性。由圖3分析可知，各處理對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)防效與黃瓜平均單果重趨勢(shì)相同，表明根結(jié)線蟲(chóng)病可影響黃瓜果實(shí)發(fā)育，造成黃瓜果實(shí)發(fā)育遲緩，這可能是根結(jié)線蟲(chóng)影響了黃瓜植株對(duì)水分及養(yǎng)分的吸收，不能滿足黃瓜果實(shí)發(fā)育需求造成的。

另外，值得一提的是，利用生防菌Jdm2與幾種生物源農(nóng)藥混用后雖然可以提高防效，但總體看，防效并不理想，最高也僅為56%。這可能是所選用田塊發(fā)病較重，在移栽時(shí)進(jìn)行灌根處理，可對(duì)土壤中根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)發(fā)揮作用，抑制其進(jìn)入黃瓜根內(nèi)，初期防效較高（數(shù)據(jù)未列出）；但隨著黃瓜生長(zhǎng)期的延長(zhǎng)，各藥劑藥效逐漸降低，土壤中根結(jié)線蟲(chóng)密度增大，黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病情加重。如果在黃瓜不同生長(zhǎng)期進(jìn)行2次施藥處理，防效也許更加明顯，這需要進(jìn)一步的研究驗(yàn)證。

由于生防菌與生物源農(nóng)藥混用不僅可以發(fā)揮生物源農(nóng)藥安全高效的優(yōu)勢(shì)，同時(shí)還保持了生防菌在植物根周圍定殖、分泌抗生素、誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病性等特點(diǎn)，因此在植物病害防治中具有廣闊的推廣應(yīng)用前景。

參考文獻(xiàn)：

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當(dāng)生防菌Jdm2分別與幾種生物源農(nóng)藥混用防治黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病害時(shí)，防治效果差異與單用生物源農(nóng)藥相似，如單獨(dú)使用時(shí)藜蘆堿防效最低，混用時(shí)，生防菌Jdm2與藜蘆堿的防效也是最低的，說(shuō)明生防菌Jdm2與生物源農(nóng)藥混用時(shí)，防效中生物源農(nóng)藥貢獻(xiàn)比率較大。當(dāng)單獨(dú)使用時(shí)，印楝素防效最高，但與生防菌Jdm2混用后，其防效要低于苦參堿與生防菌Jdm2混用，表明苦參堿與生防菌Jdm2增效作用更為明顯。本研究探討了黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病情指數(shù)與黃瓜重量之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)兩者存在較高的相關(guān)性。由圖3分析可知，各處理對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)防效與黃瓜平均單果重趨勢(shì)相同，表明根結(jié)線蟲(chóng)病可影響黃瓜果實(shí)發(fā)育，造成黃瓜果實(shí)發(fā)育遲緩，這可能是根結(jié)線蟲(chóng)影響了黃瓜植株對(duì)水分及養(yǎng)分的吸收，不能滿足黃瓜果實(shí)發(fā)育需求造成的。

另外，值得一提的是，利用生防菌Jdm2與幾種生物源農(nóng)藥混用后雖然可以提高防效，但總體看，防效并不理想，最高也僅為56%。這可能是所選用田塊發(fā)病較重，在移栽時(shí)進(jìn)行灌根處理，可對(duì)土壤中根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)發(fā)揮作用，抑制其進(jìn)入黃瓜根內(nèi)，初期防效較高（數(shù)據(jù)未列出）；但隨著黃瓜生長(zhǎng)期的延長(zhǎng)，各藥劑藥效逐漸降低，土壤中根結(jié)線蟲(chóng)密度增大，黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病情加重。如果在黃瓜不同生長(zhǎng)期進(jìn)行2次施藥處理，防效也許更加明顯，這需要進(jìn)一步的研究驗(yàn)證。

由于生防菌與生物源農(nóng)藥混用不僅可以發(fā)揮生物源農(nóng)藥安全高效的優(yōu)勢(shì)，同時(shí)還保持了生防菌在植物根周圍定殖、分泌抗生素、誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病性等特點(diǎn)，因此在植物病害防治中具有廣闊的推廣應(yīng)用前景。

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[13]段瑞華，韓方勝，楊波，等. 0.15% 阿維· 印楝素顆粒劑防治番茄根結(jié)線蟲(chóng)病田間藥效試驗(yàn)[J]. 上海蔬菜，2008（3）：50.

[14]王燕鸝，喻國(guó)輝，陳遠(yuǎn)風(fēng). 化學(xué)農(nóng)藥與芽孢桿菌 M3、 S11 菌株對(duì)西芹黃萎病的防治效果[J]. 中國(guó)蔬菜，2010（20）：57-61.

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當(dāng)生防菌Jdm2分別與幾種生物源農(nóng)藥混用防治黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病害時(shí)，防治效果差異與單用生物源農(nóng)藥相似，如單獨(dú)使用時(shí)藜蘆堿防效最低，混用時(shí)，生防菌Jdm2與藜蘆堿的防效也是最低的，說(shuō)明生防菌Jdm2與生物源農(nóng)藥混用時(shí)，防效中生物源農(nóng)藥貢獻(xiàn)比率較大。當(dāng)單獨(dú)使用時(shí)，印楝素防效最高，但與生防菌Jdm2混用后，其防效要低于苦參堿與生防菌Jdm2混用，表明苦參堿與生防菌Jdm2增效作用更為明顯。本研究探討了黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病情指數(shù)與黃瓜重量之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)兩者存在較高的相關(guān)性。由圖3分析可知，各處理對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)防效與黃瓜平均單果重趨勢(shì)相同，表明根結(jié)線蟲(chóng)病可影響黃瓜果實(shí)發(fā)育，造成黃瓜果實(shí)發(fā)育遲緩，這可能是根結(jié)線蟲(chóng)影響了黃瓜植株對(duì)水分及養(yǎng)分的吸收，不能滿足黃瓜果實(shí)發(fā)育需求造成的。

另外，值得一提的是，利用生防菌Jdm2與幾種生物源農(nóng)藥混用后雖然可以提高防效，但總體看，防效并不理想，最高也僅為56%。這可能是所選用田塊發(fā)病較重，在移栽時(shí)進(jìn)行灌根處理，可對(duì)土壤中根結(jié)線蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)發(fā)揮作用，抑制其進(jìn)入黃瓜根內(nèi)，初期防效較高（數(shù)據(jù)未列出）；但隨著黃瓜生長(zhǎng)期的延長(zhǎng)，各藥劑藥效逐漸降低，土壤中根結(jié)線蟲(chóng)密度增大，黃瓜根結(jié)線蟲(chóng)病情加重。如果在黃瓜不同生長(zhǎng)期進(jìn)行2次施藥處理，防效也許更加明顯，這需要進(jìn)一步的研究驗(yàn)證。

由于生防菌與生物源農(nóng)藥混用不僅可以發(fā)揮生物源農(nóng)藥安全高效的優(yōu)勢(shì)，同時(shí)還保持了生防菌在植物根周圍定殖、分泌抗生素、誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病性等特點(diǎn)，因此在植物病害防治中具有廣闊的推廣應(yīng)用前景。

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