陳 爽,呂 闖,李 丹

(1.吉林醫(yī)藥學(xué)院，吉林 吉林 132013;2.吉林市人民醫(yī)院血液風(fēng)濕科,吉林 吉林 132001)

·論 著·

四種抗體配合檢測(cè)在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷中的價(jià)值

陳 爽1,呂 闖1,李 丹2

(1.吉林醫(yī)藥學(xué)院，吉林 吉林 132013;2.吉林市人民醫(yī)院血液風(fēng)濕科,吉林 吉林 132001)

目的 探討抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體、抗突變型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗體、抗RA33抗體和類風(fēng)濕因子(RF)在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 對(duì)103例RA患者、41例其他自身免疫病患者和104例健康人進(jìn)行抗CCP抗體、抗MCV抗體、RF和抗RA33抗體測(cè)定，RF用速率散射免疫比濁法檢測(cè)，其余三種抗體均使用相對(duì)應(yīng)的試劑盒用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定。結(jié)果 RA患者中抗CCP抗體、抗MCV抗體、類風(fēng)濕因子的陽性率分別為74.8%、80.6%、91.3%明顯高于非RA組(P<0.01)?？笴CP抗體、抗MCV抗體和抗RA33抗體的特異性高達(dá)97.2%、97.9%和95.9%。三組(抗CCP抗體、抗MCV抗體、RF聯(lián)合檢測(cè)組和抗MCV抗體、抗RA33抗體、RF聯(lián)合檢測(cè)組和四種抗體共同檢測(cè)組)聯(lián)合檢測(cè)均出現(xiàn)高特異性99.3%，但敏感度較低。結(jié)論 RA相關(guān)抗體抗CCP抗體或抗MCV抗體與RF的聯(lián)合檢測(cè)具有較好敏感性和特異性，此結(jié)果可用于RA的早期診斷預(yù)防不可逆性骨損傷。抗RA33抗體對(duì)早期癥狀不明顯的RA患者可作為一個(gè)較好輔助指標(biāo)。

RA；抗CCP抗體；抗MCV抗體；RF；抗RA33抗體

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種常見的致殘性高的自身免疫性炎性疾病，早期診治對(duì)預(yù)防患者的不可逆性骨質(zhì)破壞極為重要。在1987年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)制定的分類標(biāo)準(zhǔn)中，類風(fēng)濕因子(RF)是唯一的血清學(xué)指標(biāo)，但其特異性不高，早期檢出率低，符合此標(biāo)準(zhǔn)的患者往往已出現(xiàn)骨關(guān)節(jié)損傷，失去最佳治療時(shí)期，并且對(duì)于RF陰性或不典型的RA出現(xiàn)誤診或漏診現(xiàn)象?？筊A33是1989年在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清中發(fā)現(xiàn)的一種自身抗體，本質(zhì)為異質(zhì)性核糖核蛋白的核心蛋白A2[1-2]，其特異性高且對(duì)RA有早期提示作用[3]。另外致使RA滑膜炎持續(xù)存在的主要原因是瓜氨酸相關(guān)的自身抗體在關(guān)節(jié)腔的不斷沉積，檢測(cè)血清中抗突變型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗體和抗環(huán)瓜氨酸多肽(CCP)抗體也可為RA的早期診斷提供有力幫助。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì) 象

RA組103例，其中男28例，女75例，年齡40～76歲，病程6個(gè)月～15年。診斷依據(jù)按2010年美國風(fēng)濕病學(xué)協(xié)會(huì)(ACR)/歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)聯(lián)合提出的RA分類標(biāo)準(zhǔn)[4]，均排除了其他自身免疫性疾??；其他自身免疫病組41例，系統(tǒng)性紅斑狼瘡13例，硬皮癥9例，皮肌炎9例，干燥綜合癥10例，男12例，女29例，年齡22～67歲，均符合相應(yīng)的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；健康對(duì)照組104例，男43例，女61例，年齡35～71歲，無類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的癥狀和體征表現(xiàn)，無自身免疫病家族史，排除感染、腫瘤等疾病。

1.2 方 法

RF檢測(cè)由抽血當(dāng)天完成，采用速率比濁法在日立7180全自動(dòng)生化儀進(jìn)行檢測(cè)，RF>20U/m為陽性。血液樣本-20 ℃保存，復(fù)溶后進(jìn)行其余三項(xiàng)抗體檢測(cè)。抗CCP抗體采用德國歐蒙公司ELISA試劑盒，>5 U/mL為陽性。抗MCV抗體檢測(cè)用德國Orgente公司ELISA試劑盒，>20 U/mL為陽性?？筊A33抗體檢測(cè)采用AMEC公司ELISA試劑盒，>25 RU/mL為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用表格首先計(jì)算出RF、抗CCP抗體、抗MCV抗體和抗RA33抗體對(duì)RA診斷的特異性、敏感度，然后利用SPSS13.0軟件采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行差異性比較，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

4種抗體在RA組和非RA組的陽性例數(shù)比較如表1，RA組4種抗體的陽性數(shù)均明顯高于另2組非RA組。

4種抗體對(duì)RA診斷的敏感性與特異性的比較,單獨(dú)檢測(cè)時(shí)RF的敏感性最高，但特異性不高，而特異性最高的是瓜氨酸相關(guān)的自身抗體抗MCV抗體和抗CCP抗體。4項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)時(shí)任一指標(biāo)陽性即為陽性，敏感性可提高至100%，但以抗CCP抗體陽性或抗MCV抗體陽性與RF聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和特異性的和最大。若4項(xiàng)指標(biāo)均陽性作為陽性的敏感性較低，但特異性極高達(dá)99.3%，如表2。

表 1 血清中4種抗體的陽性率(n/%)

表 2 血清中4種抗體對(duì)RA的敏感性和特異性(%)

3 討 論

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)，X線檢查和自身抗體檢查，由于前兩者早期表現(xiàn)不明顯，極容易造成對(duì)患者的漏診，因此尋找一種敏感度和特異性高的抗體檢測(cè)法，對(duì)診斷早期RA十分必要。臨床診斷RA目前仍以RF為主要指標(biāo)，特異性偏低。在RA以外的結(jié)締組織病中出現(xiàn)，在一些非結(jié)締組織病如感染、腫瘤等患者，甚至部分正常老年人也可成陽性[5]。

1989年Hassfeld等首次報(bào)道RA33抗體，因該抗體是診斷RA較為特異的抗體，而且與分子量33 000的核酸蛋白發(fā)生反應(yīng)，因此定名為抗RA33抗體。RA33抗體有分子量為33 000和36 000兩種成分，目前對(duì)RA診斷的敏感性大多介于20%～40%之間[6]。在各項(xiàng)RA早期診斷指標(biāo)中，抗RA33抗體特異性很高，尤其在RA早期出現(xiàn)，并且抗RA33抗體的消長與病情及用藥無關(guān)。

抗CCP抗體在RA的很早階段即可出現(xiàn)，且抗CCP抗體陽性患者骨破壞更為嚴(yán)重，預(yù)后較差[7]，是侵蝕性關(guān)節(jié)損傷的一個(gè)危險(xiǎn)因素。研究表明RF和抗CCP抗體聯(lián)合檢測(cè)能夠提高RA的診斷水平[8]。國外報(bào)道的抗MCV抗體的敏感度為37%，特異度為98%[9]，本實(shí)驗(yàn)所檢測(cè)的抗MCV抗體的特異性與國外相似，但敏感度差異很大。分析原因可能與使用試劑、疾病的病情和病程、種族不同等多方面原因有關(guān)。

多項(xiàng)抗體指標(biāo)的聯(lián)合檢測(cè)可盡可能的減少單項(xiàng)檢測(cè)某種抗體而造成的漏診現(xiàn)象，從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果來考慮，4種抗體任一陽性敏感度可達(dá)100%，但特異性僅為78.6%，易造成誤診。而后4種組合模式的特異性雖高，但敏感性極低?？笴CP抗體或抗MCV抗體與RF的聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和特異性的和最大，即便單一從敏感性或特異性來看也都高于單一檢測(cè)RF，此模式的組合有利于對(duì)疾病的早期診斷，并能減輕患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[1] Hassfeld W,Steiner G,Studnicka Benbe A,et al.Autoantibody to the nuclear antigen RA33:a marker for early rheumatoid arthritis[J].Br J Rheumatol,1993,32(3):199-203.

[2] Steiner G,Skriner K,Smolen J S.Autoantibodies to the A/B proteins of the heterogeneous nuclear ribonucleoprotein complex:novel tool for the diagnosis of rheumatic disease[J].Int Arch Allergy Immunol,1996,111(4):314-319.

[3] Cordonnier C,Meyer O,Palazzo E,et al.Diagnostic value of anti-RA33 antibody,antikeratin antibody,antiperinuclear factor and antinuclear antibody in early rheumatoid arthritis:comparison with rheumatoid factor[J].Br J Rheumatol,1996,35(7):620-624.

[4] Aletaha D，Neogi T，Silman A J，et al.2010 rheumatoid arthritis classification criteria： an American College of Rheumatology/European League Against Rheumatism collaborative initiative[J].Ann Rheum Dis，2010，69(9)：1580-1588.

[5] 張義東，董宇鴻.IgM、IgG、IgA類類風(fēng)濕因子及抗CCP抗體對(duì)RA的診斷意義[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2006,24(3):205.

[6] Steiner G,Smolen J.Autoantibodies in rheumatoid arthritis and their clinical significance[J].Arthritis Res,2002,4(Suppl 2):S1-5.

[7] Lindqvist E，Eberhardt K，Bendtzen K，et al.Prognostic laboratory markers of joint damage in rheumatoid arthritis[J].Ann Rheum Dis，2005，64(6)：196-201.

[8] Barra L,Pope J,Bessette L,et al.Lack of seroconversion of rheumatoid factor and anti-cyclic citrullinated peptide in patients with early inflammatory arthritis:a systematic literature review[J].Rheumatology(Oxford),2011,50(2):311-316.

[9] Kondo H，Sakai M.Immunological tests:Anti-vimentin antibodies[J].Nippon Rinsho,2005，63(Suppl 7):646-649.

Diagnostic value of selective combining detection with anti- CCP,anti- MCV,RF and anti-RA33 in rheumatoid arthritis

CHEN Shuang1，LV Chuang1，LI Dan2

(1.Jilin Medical College,Jilin City,Jilin Province,132013;2.Department of Rheumatism,People’s Hospital of Jilin City,Jilin City,Jilin Province,132001,China)

Objective To investigate the clinical value of joint detection of anti-cyclic citrullinated peptide(anti-CCP) antibody,anti-mutant citrullinated vimentin ( anti-MCV) antibody，eumatoid factor(RF) and anti-RA33 antibody in rheumatoid arthritis ( RA). Methods The serum samples of 103 patients with RA,41 patients with other autoimmune diseases and 104 healthy person were collected.The levels of RF were measured by the rate scatting immunity methods.The expression of anti-CCP and anti-MCV and RA33 were measured by ELIS methods. Results The positive rate of anti-CCP,anti-MCV and RF in patients with RA was significantly higher than those patients with no RA (P<0.01),the sensitivity were 74.8%,80.6%,91.3%.The three antibodies’s specificity were 97.2%,97.9%,95.9% of antibodies.There were 99.3% specificity in three groups (combination of anti-CCP and anti-MCV and RF,combination of anti-MCV and RA33 and RF,four antbodies combining detection group),but the sensitivity of them were low. Conclusion The joint detection of RA related antibodies such as against CCP antibody or MCV antibody and RF has a good sensitivity and specificity.It can be used for the early diagnosis of RA and preventing irreversible bone injury.Anti RA33 antibodies is a good auxiliary index for RA.patients with no obvious symptoms.

rheumatoid arthritis;anti-cyclic citrullinated peptide antibody,anti-mutant citrullinated vimentin antibody;eumatoid factor;anti-RA33 antibody

1673-2995(2014)01-0007-03

吉林省教育廳“十二五”科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(2011287).

陳 爽(1980-)，女(漢族)，講師，碩士.

R593.22

A

2013-08-14)