馮二靜++郭榮發(fā)
摘 要 采用盆栽試驗(yàn),在不施磷和施磷條件下,對(duì)廣東省廣泛種植的18個(gè)甜糯玉米品種進(jìn)行比較研究,旨在篩選耐低磷的甜糯玉米品種,合理布局甜糯玉米種植,提高土壤中磷利用效率。結(jié)果表明:不同基因型甜糯玉米耐低磷能力存在明顯的差異,根冠比、根干重、冠干重和植物磷積累量可作為甜糯玉米耐低磷篩選的重要指標(biāo)。初步篩選出3個(gè)耐低磷甜糯玉米品種花糯一號(hào)、孺子牛269號(hào)和紅帥。
關(guān)鍵詞 甜糯玉米 ;耐低磷 ;磷利用效率 ;基因型篩選。
分類號(hào) S513
Evaluation on the Low Phosphorus Endurance of Different
Sweet Waxy Maize Genotypes
FENG Erjing GUO Rongfa
(Agricultural College, Guangdong Ocean University,Zhanjiang, Guangdong 524088)
Abstract Under the non-phosphorus and high phosphorus levels, a comparative study of 18 sweet waxy maize genotypes widely planted in Guangdong province was carried out by using pot experiment, aiming to screen sweet glutinous corn genotypes of resisting to phosphorus, for the rational distribution of sweet glutinous corn varieties, improving soil phosphorus utilization and providing experimental evidence. The results showed that there are obvious genotypes differences of different varieties of sweet corn in low phosphate endurance. Root-shoot ratio, root dry weight, coronal dry weight and accumulation of phosphorus were suggested as screening indicators of sweet maize on tolerance to low-phosphorus stress. The experimental results preliminary screened three phosphorus-resistant genotypes of sweet corn, namely the Huanuo NO.1, Ruziniu No.269 and Hongshuai.
Keywords sweet waxy maize ; low-phosphorus resistance ; phosphorus efficiency ;genotype screening
磷是植物生長(zhǎng)發(fā)育中大量營(yíng)養(yǎng)元素之一,是植物體內(nèi)許多重要有機(jī)物的組成成分,并廣泛參與植物體內(nèi)重要代謝過程。土壤中有效磷低是中國(guó)作物栽培中普遍存在的問題[1-2]。雖然增施磷肥能滿足植物的生長(zhǎng)需要,但同時(shí)造成了磷礦危機(jī)、水富營(yíng)養(yǎng)化等系列問題[3]。前人研究表明,不同作物的磷素利用效率存在顯著差異,即使同種作物不同品種間利用磷素的能力也存在很大差異,如Ae等[4]對(duì)多種作物耐低磷特性的研究發(fā)現(xiàn),木豆、高粱、玉米等作物間存在磷素利用效率的差異。玉米有效磷豐缺指標(biāo):土壤有效磷<5 mg/kg為極低,5~7 mg/kg 為低,7~10 mg/kg為較低,10~15 mg/kg為中,15~29 mg/kg為較高,≥29 mg/kg為高,磷肥臨界值為12.08 mg/kg[5],而土壤中的有效磷含量?jī)H為3.85 mg/kg。因此,篩選對(duì)磷吸收利用效率高和耐低磷的基因資源,充分發(fā)掘和利用作物自身的耐低磷能力,對(duì)降低農(nóng)業(yè)生產(chǎn)成本,減少環(huán)境污染,節(jié)約有限的磷礦資源等具有重要意義,為進(jìn)一步探討甜糯玉米耐低磷的遺傳特異性及培育耐低磷新品種提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 供試材料
選用18個(gè)甜糯玉米品種(表1)。
1.2 方法
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
試驗(yàn)基質(zhì)為磚紅壤,基本農(nóng)化性狀為:速效磷3.85 mg/kg;全磷0.93 g/kg;堿解氮66.37 mg/kg,速效鉀41.82 mg/kg,有機(jī)質(zhì)為14.62 g/kg,pH為4.61。試驗(yàn)在廣東海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究所進(jìn)行,設(shè)不施磷,施磷2個(gè)處理,以30 cm×30 cm的白色塑料盆進(jìn)行,每盆均勻裝土10 kg,具體施肥量如下:不施磷肥處理:尿素5 g/盆,氯化鉀2 g/盆;施磷處理:尿素5 g/盆,過磷酸鈣5 g/盆,氯化鉀2 g/盆。
1.2.2 測(cè)定項(xiàng)目和方法
于2012年10月15日種子萌芽后播種,每盆播種5粒,5 d后每盆定植3株。出苗30 d,測(cè)定玉米苗的形態(tài)指標(biāo)株高和莖粗;挖取完整植株,植株用水洗凈泥土后,將植株分成根和冠2部分,并分別烘干稱重,計(jì)算根冠比;用p-NPP法測(cè)定酸性磷酸酶活性[6];將稱量后干物質(zhì)樣品粉碎過60目篩,用H2SO4-H2O2消煮,鉬銻抗比色法測(cè)定全磷[7]。
1.2.3 數(shù)據(jù)處理與分析
采用Excel和SPSS17.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。性狀相對(duì)值(耐低磷指數(shù))=不施磷條件下某性狀的測(cè)定值/其施磷條件下測(cè)定值;磷積累量=生物量×含磷量。endprint
2 結(jié)果與分析
2.1 低磷條件下對(duì)玉米莖粗和株高的影響
低磷條件下對(duì)玉米莖粗和株高的影響見表1。從表1可知,在不施磷處理下,18個(gè)甜糯玉米品種的莖粗和株高較施磷處理有顯著降低,莖粗統(tǒng)計(jì)分析用t檢驗(yàn)得:t=6.66>t0.01,故P<0.01;株高統(tǒng)計(jì)分析用t檢驗(yàn)得:t=5.29>t0.01,故P<0.01,表示施磷和不施磷之間莖粗和株高差異極顯著。不施磷條件下,莖粗平均為8.20 mm,變幅在5.68~10.01 mm,株高平均為62.71 cm,變幅在44.0~77.95 cm;施磷處理下莖粗平均為10.45 mm,變幅為7.87~12.82 mm,株高平均為72.25 cm,變幅為59.70~81.70cm。其中相對(duì)莖粗和相對(duì)株高最大的為紅瑪瑙,相對(duì)莖粗最小的為品彩糯2號(hào),其次為新美夏珍,相對(duì)株高最小的為新美夏珍,其次為佳美一號(hào)和品彩糯2號(hào)。
2.2 低磷脅迫對(duì)苗期根干重、冠干重及根冠比的影響
低磷脅迫對(duì)苗期根干重、冠干重及根冠比的影響見表2。從表2可知,在不施磷處理下,18個(gè)甜糯玉米品種的干物重較施磷處理都有顯著降低,根干重統(tǒng)計(jì)分析用t檢驗(yàn)得:t=4.96>t0.01,故P<0.01;冠干重統(tǒng)計(jì)分析用t檢驗(yàn)得:t=5.71>t0.01,故P<0.01,表示施磷和不施磷之間根干重和冠干重差異極顯著。不施磷處理下,根干量平均為0.17 g/株,變幅在0.09~0.29g/株,冠干重平均為0.94 g/株,變幅在0.54~1.30 g/株,施磷根干重平均為0.42 g/株,變幅在0.17~0.89 g/株,冠干重平均為2.66 g/株,變幅在1.42~4.24 g/株。其中相對(duì)根干重和相對(duì)冠干重最大的為花糯一號(hào),相對(duì)根干重最小的為綠色超人,其次為蘇科花糯2008,相對(duì)冠干重最小的為綠色超人,其次為品彩糯2號(hào)和寶玉3號(hào)。不同甜糯玉米品種的根冠比見表3。由表3可知,低磷脅迫下根冠比增大,這表明,在低磷條件下,同化物轉(zhuǎn)運(yùn)到根的比例大,而地上部分獲得的同化物質(zhì)相對(duì)較少,因而抑制了地上部的生長(zhǎng)。在供試的18個(gè)品種中以東方甜一號(hào)的相對(duì)根冠比最大為1.88,而紅帥的相對(duì)根冠比最小為0.70。
2.3 低磷脅迫對(duì)苗期植株含磷量和磷積累量的影響
對(duì)18個(gè)甜糯玉米品種不施磷和施磷2個(gè)處理的植株地上部分的含磷量和磷積累量進(jìn)行比較分析(表4),結(jié)果顯示,不施磷對(duì)甜糯玉米的含磷量和磷積累量有顯著影響,且不同品種之間差異明顯。相對(duì)磷含量最高的為花糯一號(hào),最低的為品彩糯2號(hào);而相對(duì)磷積累量最高的為川玉糯一號(hào),最低的為新美夏珍和品彩糯2號(hào)。其中花糯一號(hào)的含磷量和磷積累量都很高,屬于耐低磷材料;品彩糯2號(hào)的含磷量和磷積累量都很小,屬于低磷敏感材料。
2.4 低磷脅迫對(duì)苗期酸性磷酸酶活性的影響
酸性磷酸酶是植株體內(nèi)重要的生理活性物質(zhì),對(duì)于磷的吸收、積累及分配具有重要作用[7]。對(duì)18個(gè)甜糯玉米的酸性磷酸酶活性進(jìn)行比較分析(表5),結(jié)果顯示:在低磷脅迫下,甜糯玉米的酸性磷酸酶活性明顯提高。施磷條件下,東方甜一號(hào)酸性磷酸酶活性最大,花糯一號(hào)最?。坏土酌{迫時(shí),孺子牛269號(hào)的最大,珍糯一號(hào)最小。相對(duì)酸性磷酸酶活性較高的有花糯一號(hào),孺子牛269號(hào),京粘一號(hào),較低的有新美夏珍,品彩糯2號(hào)。
2.5 甜糯玉米品種苗期耐低磷能力評(píng)價(jià)指標(biāo)的建立與綜合評(píng)價(jià)
2.5.1 評(píng)價(jià)指標(biāo)的篩選
18個(gè)甜糯玉米品種的各性狀在施磷和不施磷條件下的平均值及其變異系數(shù)見表6。結(jié)果顯示:無(wú)論在不施磷還是施磷條件下,18個(gè)甜糯玉米性狀均表現(xiàn)出一定的差異。結(jié)合前面的分析,甜糯玉米苗期在不施磷條件下生長(zhǎng)差異表現(xiàn)在多個(gè)方面,對(duì)所分析測(cè)定的8個(gè)性狀都有不同程度影響,而且不同品種間的反應(yīng)也不盡相同。性狀相對(duì)值顯示,低磷條件對(duì)該性狀的影響程度,變異系數(shù)反應(yīng)某一性狀在一定條件下的變化離散程度的絕對(duì)值,其值大小不僅受變量值離散程度的影響,而且還受變量值平均水平大小的影響。即變異系數(shù)越大,品種間的差異越大,越能反應(yīng)品種的耐低磷能力,因此可將各性狀相對(duì)值變異系數(shù)的大小作為評(píng)價(jià)耐低磷脅迫能力權(quán)重,也可將相對(duì)值變異系數(shù)大的性狀作為評(píng)價(jià)耐低磷能力大小的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)[9]。從各性狀相對(duì)值的變異系數(shù)可以看出,冠干重、磷積累量、根冠比和根干重對(duì)低磷脅迫最敏感,低磷脅迫后品種間的變異最大,可作為甜糯玉米耐低磷能力評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。
2.5.2 不同玉米品種苗期耐低磷能力的綜合評(píng)價(jià)
結(jié)合前人的研究成果和本實(shí)驗(yàn)的分析(表7),把冠干重、磷積累量、根冠比和根干重作為篩選耐低磷甜糯玉米品種的重要指標(biāo)。利用模糊隸屬函數(shù)法[9](模糊隸屬函數(shù)法可以消除不同耐低磷指標(biāo)的量綱,將各指標(biāo)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化,使得不同指標(biāo)間可以進(jìn)行有意義的加和計(jì)算,能較好地對(duì)玉米品種的耐低氮性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià))。進(jìn)行耐低磷綜合指數(shù)分析,甜糯玉米品種耐低磷能力的綜合指數(shù)(表7)。耐低磷綜合指數(shù)較大的表示該甜糯玉米品種苗期耐低磷性較強(qiáng),相反耐低磷綜合指數(shù)較小的則表示耐低磷性較弱,由表7可以看出,耐低磷綜合指數(shù)大于0.55的耐低磷性較強(qiáng)的品種有珍糯一號(hào)、紅瑪瑙、花糯一號(hào)、孺子牛269號(hào)、紅帥,而耐低磷綜指數(shù)小于0.30的耐低磷性較弱的品種有彩香糯、品彩糯2號(hào)、蘇科花糯2008、新美夏珍、綠色超人,其余品種的耐低磷綜合指數(shù)在0.30~0.55間,確定為中等耐低磷性的品種。
3 結(jié)論與討論
磷是玉米生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)元素,參與玉米組成成分與各種新陳代謝的過程。不同的作物受低磷脅迫的影響程度不同,即使同種作物不同品種的低磷脅迫的影響程度也有一定的差異,如果植物生長(zhǎng)的環(huán)境中缺磷,則會(huì)造成植物的生長(zhǎng)代謝受阻,抗逆性下降[10]。玉米屬于低磷敏感型作物,不同玉米基因型對(duì)低磷脅迫反應(yīng)存在顯著差異[11]。對(duì)不同基因型玉米的苗期和成熟期磷利用效率的篩選結(jié)果基本一致[12],所以要在玉米苗期進(jìn)行耐低磷的篩選。endprint
比較低磷脅迫下的各項(xiàng)指標(biāo)及性狀相對(duì)值,評(píng)價(jià)不同甜糯玉米的耐低磷能力,結(jié)果表明,莖粗、株高、根干重、冠干重、含磷量和磷積累量明顯下降,而根冠比和酸性磷酸酯酶的活性提高。依據(jù)前人的實(shí)驗(yàn)成果[13-15]和本實(shí)驗(yàn)的分析結(jié)果,把冠干重、磷積累量、根冠比和根干重作為甜糯玉米耐低磷能力評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。在低磷條件下,耐低磷的品種能夠吸收相對(duì)較多的營(yíng)養(yǎng)成分,滿足植物生長(zhǎng)發(fā)育所需的養(yǎng)分,使低磷對(duì)其影響較小。低磷條件下,甜糯玉米的根系加快生長(zhǎng),擴(kuò)大根系表面積,以便吸收更多的營(yíng)養(yǎng)成分,而地上部光合作用合成的碳水化合物會(huì)向根運(yùn)輸,地上部的生長(zhǎng)受限,地上部與地下部表現(xiàn)出相對(duì)的變化趨勢(shì),所以分別衡量地上部和地下部比整株生物量評(píng)價(jià)更嚴(yán)謹(jǐn)。因此,以冠干重、根干重、磷積累量和根冠比為篩選指標(biāo),能很好地兼顧其它生物學(xué)性狀。為了提高篩選耐低磷品種的準(zhǔn)確性,還應(yīng)該考慮多年份、多地點(diǎn)的水培篩選、田間篩選以及不同生育期的篩選方法有機(jī)結(jié)合起來(lái),只有在多種篩選條件下都能耐低磷的材料才是真正的耐低磷材料,為甜糯玉米生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
參考文獻(xiàn)
[1] 沈善敏. 論我國(guó)磷肥的生產(chǎn)與應(yīng)用[J]. 土壤通報(bào),1985(3):97-103.
[2] 趙宏儒,郭淑鮮,陶 杰,等. 包頭市固陽(yáng)縣玉米測(cè)土配方施肥田間肥效試驗(yàn)[J]. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技,2010(4):59-60.
[3] 魯如昆,時(shí)正元. 土壤積累態(tài)磷研究Ⅱ-磷肥的表觀積累利用率[J]. 土壤,1995,27(6):286-289.
[4] Ae N, A rihara J. U p take mechanism of iron-associated phosphorus in pigeonpean growing on Indian A lfisol and its significance to phosphorus availability in cropping systems[C]. Proc of 4th Int Conf of Soil Sci Society, 1990, 2: 35-38
[5] 劉佛曉,劉聽報(bào). 夏玉米有效磷豐缺指標(biāo)研究[J]. 河南農(nóng)業(yè),2013(7):20-21.
[6] 林啟美,黃德明. 應(yīng)用酸性磷酸酶進(jìn)行番茄磷素診斷[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào),1995,6(2):78-93.
[7] 鮑士旦. 土壤農(nóng)化分析[M].3版. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1999:76-79.
[8] 梁秀蘭,林英春,年 海,等. 低磷脅迫對(duì)不同基因型玉米主要生理生化特性的影響[J]. 作物學(xué)報(bào),2005,31(5):667-669.
[9] 羅延宏. 玉米苗期耐低氮品種的蹄選及其生理機(jī)制的初步研究[D]. 雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文,2012(3):34-39.endprint
比較低磷脅迫下的各項(xiàng)指標(biāo)及性狀相對(duì)值,評(píng)價(jià)不同甜糯玉米的耐低磷能力,結(jié)果表明,莖粗、株高、根干重、冠干重、含磷量和磷積累量明顯下降,而根冠比和酸性磷酸酯酶的活性提高。依據(jù)前人的實(shí)驗(yàn)成果[13-15]和本實(shí)驗(yàn)的分析結(jié)果,把冠干重、磷積累量、根冠比和根干重作為甜糯玉米耐低磷能力評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。在低磷條件下,耐低磷的品種能夠吸收相對(duì)較多的營(yíng)養(yǎng)成分,滿足植物生長(zhǎng)發(fā)育所需的養(yǎng)分,使低磷對(duì)其影響較小。低磷條件下,甜糯玉米的根系加快生長(zhǎng),擴(kuò)大根系表面積,以便吸收更多的營(yíng)養(yǎng)成分,而地上部光合作用合成的碳水化合物會(huì)向根運(yùn)輸,地上部的生長(zhǎng)受限,地上部與地下部表現(xiàn)出相對(duì)的變化趨勢(shì),所以分別衡量地上部和地下部比整株生物量評(píng)價(jià)更嚴(yán)謹(jǐn)。因此,以冠干重、根干重、磷積累量和根冠比為篩選指標(biāo),能很好地兼顧其它生物學(xué)性狀。為了提高篩選耐低磷品種的準(zhǔn)確性,還應(yīng)該考慮多年份、多地點(diǎn)的水培篩選、田間篩選以及不同生育期的篩選方法有機(jī)結(jié)合起來(lái),只有在多種篩選條件下都能耐低磷的材料才是真正的耐低磷材料,為甜糯玉米生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
參考文獻(xiàn)
[1] 沈善敏. 論我國(guó)磷肥的生產(chǎn)與應(yīng)用[J]. 土壤通報(bào),1985(3):97-103.
[2] 趙宏儒,郭淑鮮,陶 杰,等. 包頭市固陽(yáng)縣玉米測(cè)土配方施肥田間肥效試驗(yàn)[J]. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技,2010(4):59-60.
[3] 魯如昆,時(shí)正元. 土壤積累態(tài)磷研究Ⅱ-磷肥的表觀積累利用率[J]. 土壤,1995,27(6):286-289.
[4] Ae N, A rihara J. U p take mechanism of iron-associated phosphorus in pigeonpean growing on Indian A lfisol and its significance to phosphorus availability in cropping systems[C]. Proc of 4th Int Conf of Soil Sci Society, 1990, 2: 35-38
[5] 劉佛曉,劉聽報(bào). 夏玉米有效磷豐缺指標(biāo)研究[J]. 河南農(nóng)業(yè),2013(7):20-21.
[6] 林啟美,黃德明. 應(yīng)用酸性磷酸酶進(jìn)行番茄磷素診斷[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào),1995,6(2):78-93.
[7] 鮑士旦. 土壤農(nóng)化分析[M].3版. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1999:76-79.
[8] 梁秀蘭,林英春,年 海,等. 低磷脅迫對(duì)不同基因型玉米主要生理生化特性的影響[J]. 作物學(xué)報(bào),2005,31(5):667-669.
[9] 羅延宏. 玉米苗期耐低氮品種的蹄選及其生理機(jī)制的初步研究[D]. 雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文,2012(3):34-39.endprint
比較低磷脅迫下的各項(xiàng)指標(biāo)及性狀相對(duì)值,評(píng)價(jià)不同甜糯玉米的耐低磷能力,結(jié)果表明,莖粗、株高、根干重、冠干重、含磷量和磷積累量明顯下降,而根冠比和酸性磷酸酯酶的活性提高。依據(jù)前人的實(shí)驗(yàn)成果[13-15]和本實(shí)驗(yàn)的分析結(jié)果,把冠干重、磷積累量、根冠比和根干重作為甜糯玉米耐低磷能力評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。在低磷條件下,耐低磷的品種能夠吸收相對(duì)較多的營(yíng)養(yǎng)成分,滿足植物生長(zhǎng)發(fā)育所需的養(yǎng)分,使低磷對(duì)其影響較小。低磷條件下,甜糯玉米的根系加快生長(zhǎng),擴(kuò)大根系表面積,以便吸收更多的營(yíng)養(yǎng)成分,而地上部光合作用合成的碳水化合物會(huì)向根運(yùn)輸,地上部的生長(zhǎng)受限,地上部與地下部表現(xiàn)出相對(duì)的變化趨勢(shì),所以分別衡量地上部和地下部比整株生物量評(píng)價(jià)更嚴(yán)謹(jǐn)。因此,以冠干重、根干重、磷積累量和根冠比為篩選指標(biāo),能很好地兼顧其它生物學(xué)性狀。為了提高篩選耐低磷品種的準(zhǔn)確性,還應(yīng)該考慮多年份、多地點(diǎn)的水培篩選、田間篩選以及不同生育期的篩選方法有機(jī)結(jié)合起來(lái),只有在多種篩選條件下都能耐低磷的材料才是真正的耐低磷材料,為甜糯玉米生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
參考文獻(xiàn)
[1] 沈善敏. 論我國(guó)磷肥的生產(chǎn)與應(yīng)用[J]. 土壤通報(bào),1985(3):97-103.
[2] 趙宏儒,郭淑鮮,陶 杰,等. 包頭市固陽(yáng)縣玉米測(cè)土配方施肥田間肥效試驗(yàn)[J]. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技,2010(4):59-60.
[3] 魯如昆,時(shí)正元. 土壤積累態(tài)磷研究Ⅱ-磷肥的表觀積累利用率[J]. 土壤,1995,27(6):286-289.
[4] Ae N, A rihara J. U p take mechanism of iron-associated phosphorus in pigeonpean growing on Indian A lfisol and its significance to phosphorus availability in cropping systems[C]. Proc of 4th Int Conf of Soil Sci Society, 1990, 2: 35-38
[5] 劉佛曉,劉聽報(bào). 夏玉米有效磷豐缺指標(biāo)研究[J]. 河南農(nóng)業(yè),2013(7):20-21.
[6] 林啟美,黃德明. 應(yīng)用酸性磷酸酶進(jìn)行番茄磷素診斷[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào),1995,6(2):78-93.
[7] 鮑士旦. 土壤農(nóng)化分析[M].3版. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1999:76-79.
[8] 梁秀蘭,林英春,年 海,等. 低磷脅迫對(duì)不同基因型玉米主要生理生化特性的影響[J]. 作物學(xué)報(bào),2005,31(5):667-669.
[9] 羅延宏. 玉米苗期耐低氮品種的蹄選及其生理機(jī)制的初步研究[D]. 雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文,2012(3):34-39.endprint