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南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)農(nóng)場土壤真菌種類的調(diào)查與鑒定

2014-08-15 01:34馬文清常月立郭強(qiáng)李恒銳邱文武
關(guān)鍵詞:鑒定農(nóng)場土壤

馬文清+常月立+郭強(qiáng)+李恒銳+邱文武

摘 要:對南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)農(nóng)場4種土壤中真菌種類及其分布情況進(jìn)行調(diào)查研究,共分離鑒定出8屬12種,其中毛霉屬(Mucor Fresen)2種;沙氏毛霉屬(Saksenaea Saksena)1種;小克銀漢霉屬(Cunninghamella Matruchot)1種;犁頭霉(Absidia Van Tiegh.)1種;曲霉屬(Aspergillus (Mich)Link)3種;絲核菌屬(Rhizoctonia de Candolle)1種;地霉屬(Geotrichum Link)1種;青霉屬(Penicillium Link)2種。

關(guān)鍵詞:土壤 真菌種類 農(nóng)場 鑒定

土壤作為微生物生活的大本營,蘊(yùn)含著種類繁多的真菌。到目前為止,已經(jīng)鑒定出幾萬個種,分屬170個屬,還有上百萬個種有待分離鑒定。土壤真菌多分布于耕作層中,在潮濕、通氣良好條件下生長旺盛,干旱條件下生長受抑制[1 ]。

真菌在生態(tài)系統(tǒng)中具有重要作用,比如降解有機(jī)質(zhì),釋放營養(yǎng)和微量元素。同時一些真菌做為植物病原真菌、菌根真菌和代謝物生產(chǎn)菌的經(jīng)濟(jì)重要性也是非常巨大的。

多數(shù)生防菌都屬于腐生真菌,且都可以從土壤中分離得到;同時,不少植物病害是由土壤中的病原真菌侵入植物根部引起的。因此,土壤真菌的分離鑒定,可以確定土壤病原真菌種類,有助于植物真菌病害的診斷和防治,也有利于生防真菌的開發(fā)利用,更有利于減少種植成本,提高農(nóng)場的耕地效益,對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有重要的意義。另外,土壤真菌種類的分離鑒定,可以了解真菌的區(qū)域性分布特征,確定地區(qū)優(yōu)勢種或發(fā)現(xiàn)新種[2 ],有利于真菌資源的進(jìn)一步開發(fā)利用。

1 材料與方法

1.1 采樣地點(diǎn)

土壤樣品采自南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)農(nóng)場的芥菜地、玉米地、南瓜地和水稻田等4個點(diǎn)。

1.2 試驗方法

采用5點(diǎn)采樣法分別在玉米地、水田、南瓜地、芥菜地等4個點(diǎn)2~10 cm深度范圍內(nèi)的土壤樣品. 采用平板稀釋法在PDA、PSA2種培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。每個處理4次重復(fù),做好標(biāo)記后放入恒溫培養(yǎng)箱,在25 ℃恒溫條件下倒置培養(yǎng)2~3 d。觀察平板上真菌出現(xiàn)情況。然后進(jìn)行單孢分離,觀察菌落特征,記錄各真菌種類的培養(yǎng)性狀,鏡檢菌絲結(jié)構(gòu)\產(chǎn)孢器結(jié)構(gòu)以及孢子形態(tài),并進(jìn)行相關(guān)測量(如菌絲直徑\長度,孢囊大小,孢子大?。?,鑒定出真菌。

1.3 數(shù)據(jù)分析

依據(jù)菌落形態(tài)顏色、產(chǎn)孢器結(jié)構(gòu)、孢子著生方式、孢子大小形狀、分枝方式、菌絲有隔與否,結(jié)合測量獲得的數(shù)據(jù),參考文獻(xiàn)[3-4 ],對土壤真菌的種類做出鑒定。

2 結(jié)果與分析

從南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)農(nóng)場的水稻田、玉米地、南瓜地、芥菜地等4個點(diǎn)的土壤樣品中,共鑒定出8屬12種真菌,包括植物病原真菌、腐生真菌、工業(yè)資源真菌等。

2.1 分離鑒定出的真菌種類的分布情況

由表1可以看出,研究所分離鑒定出的真菌多為芥菜地土壤中的,說明經(jīng)常有施肥、澆水等農(nóng)事活動的土壤真菌種類比較豐富。其中青霉屬、曲霉屬、毛霉屬等屬為土壤中的常見菌,這與黃昌勇[5 ]的表述是一致的。

2.2 分離鑒定出的各菌種的特征

2.2.1 沙氏毛霉屬的1種[Saksenaea Saksena sp.]

PDA上25 ℃培養(yǎng)4 d菌落直徑2.6~3.2 cm。菌落白色,絨毛狀,反面無色。有假根,菌絲無隔,有分枝。孢囊梗單生或假軸壯分枝,分枝處典型的有橫隔,一般(65~13)μm×5.3 μm。孢子囊燒瓶狀,底圓而上有長頸,(10~27.5)μm×(15~45)μm,壁平滑,成熟后孢囊壁消解。囊軸梨形,(5.3~10.6)μm×(10~20)μm。孢囊孢子球形,少數(shù)卵形,(5.2~15)μm。

2.2.2 多形毛霉[M.varians Povah]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑4.3~4.7 cm。菌落羊毛狀,邊緣黃色,中間白色,氣生菌絲發(fā)達(dá),直立,上結(jié)褐色孢子囊,無滲出液,反面呈黃色至米黃色。菌絲無假根,孢囊梗不成束,單生,直立,大小(5~20)μm×(10~230)μm,假單軸分枝,全部頂生孢子囊。孢子囊大,球形,直徑25~55 μm,囊壁易破裂,含孢子甚多。有球狀囊軸,直徑10~20 μm,光滑透明。孢囊孢子壁薄,平滑,形狀多樣,(4~14)μm×(4~10)μm,呈黃色。

2.2.3 緊密毛霉[M.strictus Hagem]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑5.9~7.2 cm。菌落白色絨毛狀,菌絲直立,結(jié)褐色孢子囊,反面暗黃色。孢囊梗假軸狀分枝,大小10~17.5 μm,全部頂生孢子囊。孢子囊大,球形,黃褐色,直徑25~100 μm,含孢子甚多。囊軸球狀,直徑15~40 μm,光滑。孢囊孢子壁薄,平滑,卵形,(7.5~10)μm×(5~7.5)μm,光滑。

2.2.4 刺孢小克銀漢霉[Cunninghamella echinulata Thaxter]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑達(dá)6.5~8.7 cm,菌落棉花狀,呈白色,表面因孢子數(shù)量多而呈粉狀,菌絲生長迅速,高約1.0 cm。菌絲分枝繁茂。分生孢子柄有少數(shù)擬雙叉分枝,每1分枝20~120 μm,頂端膨大成近球形泡囊。泡囊大小10~30 μm,其上有小突起,側(cè)生小泡囊形狀相同。分生孢子球形,10~20 μm,成熟后有密生小刺。

2.2.5 輪枝梨頭霉[A.cylindrospora Hagem]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑3.7~4.4 cm。菌落初白色,后中間轉(zhuǎn)為淡灰色,羊毛狀,氣生菌絲發(fā)達(dá),菌絲生長迅速,反面無色。有假根,菌絲無隔。孢囊梗單生,輪狀分枝1~2次,每次3~6根,(15~20)μm×5 μm。孢子囊洋梨形,(25~40)μm×(22.5~30)μm,含甚多孢子,有明顯中軸基,囊壁不角質(zhì)化。囊軸球形或近球形,(10~15)μm或(20~25)μm×(15~20)μm,光滑,無色,1/2至全面可育。孢子矩圓形,極少數(shù)卵形,一般長1.5~2.5 μm。endprint

2.2.6 日本曲霉原變種[A.japonicus var. japonisus]

PDA上25 ℃培養(yǎng)4 d菌落直徑4.5~5.0 cm。菌落絲絨狀,具輻射溝紋,邊緣白色,中間黑色,無滲出液,反面淡黃色。分生孢子頭幼齡為球形至輻射狀,直徑40~50.1 μm,老后呈黑褐色球形。分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì),孢梗莖(250~600)μm×(10~15)μm,近頂囊部分帶淡黃褐色,壁平滑。頂囊幼時稍長形,老后呈球形或近球形,直徑20~51 μm,大頂囊全面可育。產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)單層。分生孢子球形,直徑3~4.4 μm,壁顯著粗糙,具刺。

2.2.7 泡盛曲霉[A.awamori]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑3.5~4.1 cm。菌落平坦,絲絨狀,邊緣白色,中間黑褐色,反面淡黃色。分生孢子頭幼時呈輻射狀,直徑75~125 μm,老時呈黑色,球形。分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì),孢梗莖(250~1000)μm×(10~20)μm,頂囊部分稍收縮,壁平滑,上部帶黃褐色。頂囊球形,黃褐色,直徑35~70 μm,全面可育。產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)雙層。孢子球形或近球形,直徑3.5~4.5 μm,近于光滑。

2.2.8 黑曲霉[Aspergillus niger van Tieghem]

PSA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑2.0~3.5 cm。菌落初白色,厚絨狀,黑色,反面無色,中央部分略帶黃褐色。分生孢子頭幼時球形,漸變?yōu)榉派湫?,褐黑色,一?00~700 μm。分生孢子梗自基質(zhì)生出,長短不一,一般1~3 mm,直徑5.3~15 μm,壁厚,光滑。頂囊球形,一般直徑為45~65 μm。產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)雙層,自頂囊全面著生,黃褐色。分生孢子球形,直徑大多4~5 μm,褐色色素積于內(nèi)壁和外壁間成為塊狀而顯現(xiàn)粗糙。

2.2.9 枯青霉[Penicillium citrinum Thom]

PSA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑1.0~2.2 cm。菌落絨毛狀,有放射狀溝紋,艾綠色,反面黃色至橙色。分生孢子梗大多自基質(zhì)生出,一般(40~69)μm×(2.5~3)μm,壁光滑,極少分枝。帚狀枝有3~4個輪生而略散開的?;鶚?gòu)成,(10.6~21.2)μm×(2.5~5)μm,每個?;洗厣?~8個略開而平行的小梗,(9~10.6) μm×(2.2~3)μm。分生孢子球形或近球形,2.2~4 μm,光滑或近于光滑。

2.2.10 黃青霉[P.chrysogenus Thom]

PDA上25 ℃培養(yǎng)4 d菌落直徑1.6~2.1 cm。菌落絨毛狀,邊緣白色,中間藍(lán)綠色至亮綠色,背面黃色,中間有突起。分生孢子梗從菌絲垂直生出,無足細(xì)胞,有橫膈膜,一般(15~37)μm×(3~3.5)μm,壁光滑。帚狀枝長,由2個近于平行排列的梗基構(gòu)成,(20~30.8)μm×(2.6~3.2)μm,常不對稱,每個?;洗厣? ~4個小梗,(6.7~10)μm×(2~2.5)μm。分生孢子橢圓形為主,長徑3~4 μm,壁平滑。此菌能產(chǎn)青霉素。

2.2.11 白地霉[Geotrichum candidum Link]

異名:乳卵孢霉[Oidium lactis Fresenius 或Oospora lactis(Fr.)Sacc]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑1.4~1.6 cm。菌落氈狀,白色,中間有突起,反面黃色。真菌絲,有的有二叉分枝,橫隔多或少,菌絲寬4.2~6.3 μm。裂殖。節(jié)孢子單個或連接成鏈,長筒形、方形、也有橢圓形或圓形,末端圓鈍。節(jié)孢子絕大多數(shù)為(4.2~5.9)μm×(5.4~17.5)μm。

2.2.12 立枯絲核菌[R.solani Kuhn]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑5.4~5.7 cm。菌落棉花狀,白色,中間有黃色突起,反面無色。菌絲初無色,后漸變褐色,直徑12~14 μm,分枝處呈直角,基部稍縊縮,有隔膜。該病菌侵染馬鈴薯得黑痣病,侵染水稻得立枯病。

3 討論

土壤是真菌生活的大本營,其中生存看各種各樣的真菌。本研究鑒定出9個種,另有3個屬的真菌未鑒定至種,涉及2個亞門,即接合菌亞門和半知菌亞門,其中以半知菌亞門為多。本研究分離出了土壤中的常見真菌,如:青霉屬(Penicillium)、曲霉屬(Aspergillus)和毛霉屬(Mucor)。其中多形毛霉和日本曲霉原變種在各個取樣點(diǎn)都出現(xiàn)了,可見它們?yōu)楸镜貐^(qū)的優(yōu)勢種之一。值得一提的是,本研究分離鑒定出了不常見的種:沙氏毛霉屬的1種[Saksenaea Saksena sp.]。

實(shí)驗只取了南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)農(nóng)場的4種土樣,因此并不具有完全的代表性,只可作為研究的參考。同時由于實(shí)驗過程中在芥菜地土壤上花費(fèi)的精力較多,因此鑒定出的真菌種類以芥菜地為多。而在水稻田上采用10-1土壤懸浮液涂布培養(yǎng),由于部分毛霉在2 d內(nèi)迅速長滿整個平板,對分離其他真菌造成了相當(dāng)大的困難,所以在水稻田的真菌種類鑒定出的比較少。

此外,南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)菜地和水稻田表層土壤微生物構(gòu)成中細(xì)菌種類豐富,而且大部分適合在PDA和PSA培養(yǎng)基上生長,即使使用添加0.03 %的鏈霉素的培養(yǎng)基分離真菌時,仍然有許多細(xì)菌在平板上長出,一定程度上抑制了真菌的生長,對有效地分離出真菌造成了相當(dāng)?shù)睦щy。

總之,土壤真菌種類構(gòu)成復(fù)雜,生存方式多樣,還有待植物病理學(xué)及真菌學(xué)工作者們付出辛勤的勞動,進(jìn)行進(jìn)一步的研究,為人類做出貢獻(xiàn)。

參考文獻(xiàn)

[1] 吳禮樹.土壤肥料學(xué)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2004:28.

[2] 胡開輝.微生物學(xué)實(shí)驗[M]. 北京:中國林業(yè)出版社,2004:10-189.

[3] 中國科學(xué)院微生物研究所. 常見與常用真菌[M]. 北京:科學(xué)出版社,1978:182-202.

[4] 齊祖同. 中國真菌志(第五卷)曲霉屬及其相關(guān)有性型[M]. 北京:科學(xué)出版社,1997:98-100.

[5] 黃昌勇. 土壤學(xué)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005:51,53-58.endprint

2.2.6 日本曲霉原變種[A.japonicus var. japonisus]

PDA上25 ℃培養(yǎng)4 d菌落直徑4.5~5.0 cm。菌落絲絨狀,具輻射溝紋,邊緣白色,中間黑色,無滲出液,反面淡黃色。分生孢子頭幼齡為球形至輻射狀,直徑40~50.1 μm,老后呈黑褐色球形。分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì),孢梗莖(250~600)μm×(10~15)μm,近頂囊部分帶淡黃褐色,壁平滑。頂囊幼時稍長形,老后呈球形或近球形,直徑20~51 μm,大頂囊全面可育。產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)單層。分生孢子球形,直徑3~4.4 μm,壁顯著粗糙,具刺。

2.2.7 泡盛曲霉[A.awamori]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑3.5~4.1 cm。菌落平坦,絲絨狀,邊緣白色,中間黑褐色,反面淡黃色。分生孢子頭幼時呈輻射狀,直徑75~125 μm,老時呈黑色,球形。分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì),孢梗莖(250~1000)μm×(10~20)μm,頂囊部分稍收縮,壁平滑,上部帶黃褐色。頂囊球形,黃褐色,直徑35~70 μm,全面可育。產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)雙層。孢子球形或近球形,直徑3.5~4.5 μm,近于光滑。

2.2.8 黑曲霉[Aspergillus niger van Tieghem]

PSA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑2.0~3.5 cm。菌落初白色,厚絨狀,黑色,反面無色,中央部分略帶黃褐色。分生孢子頭幼時球形,漸變?yōu)榉派湫?,褐黑色,一?00~700 μm。分生孢子梗自基質(zhì)生出,長短不一,一般1~3 mm,直徑5.3~15 μm,壁厚,光滑。頂囊球形,一般直徑為45~65 μm。產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)雙層,自頂囊全面著生,黃褐色。分生孢子球形,直徑大多4~5 μm,褐色色素積于內(nèi)壁和外壁間成為塊狀而顯現(xiàn)粗糙。

2.2.9 枯青霉[Penicillium citrinum Thom]

PSA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑1.0~2.2 cm。菌落絨毛狀,有放射狀溝紋,艾綠色,反面黃色至橙色。分生孢子梗大多自基質(zhì)生出,一般(40~69)μm×(2.5~3)μm,壁光滑,極少分枝。帚狀枝有3~4個輪生而略散開的?;鶚?gòu)成,(10.6~21.2)μm×(2.5~5)μm,每個?;洗厣?~8個略開而平行的小梗,(9~10.6) μm×(2.2~3)μm。分生孢子球形或近球形,2.2~4 μm,光滑或近于光滑。

2.2.10 黃青霉[P.chrysogenus Thom]

PDA上25 ℃培養(yǎng)4 d菌落直徑1.6~2.1 cm。菌落絨毛狀,邊緣白色,中間藍(lán)綠色至亮綠色,背面黃色,中間有突起。分生孢子梗從菌絲垂直生出,無足細(xì)胞,有橫膈膜,一般(15~37)μm×(3~3.5)μm,壁光滑。帚狀枝長,由2個近于平行排列的梗基構(gòu)成,(20~30.8)μm×(2.6~3.2)μm,常不對稱,每個梗基上簇生2 ~4個小梗,(6.7~10)μm×(2~2.5)μm。分生孢子橢圓形為主,長徑3~4 μm,壁平滑。此菌能產(chǎn)青霉素。

2.2.11 白地霉[Geotrichum candidum Link]

異名:乳卵孢霉[Oidium lactis Fresenius 或Oospora lactis(Fr.)Sacc]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑1.4~1.6 cm。菌落氈狀,白色,中間有突起,反面黃色。真菌絲,有的有二叉分枝,橫隔多或少,菌絲寬4.2~6.3 μm。裂殖。節(jié)孢子單個或連接成鏈,長筒形、方形、也有橢圓形或圓形,末端圓鈍。節(jié)孢子絕大多數(shù)為(4.2~5.9)μm×(5.4~17.5)μm。

2.2.12 立枯絲核菌[R.solani Kuhn]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑5.4~5.7 cm。菌落棉花狀,白色,中間有黃色突起,反面無色。菌絲初無色,后漸變褐色,直徑12~14 μm,分枝處呈直角,基部稍縊縮,有隔膜。該病菌侵染馬鈴薯得黑痣病,侵染水稻得立枯病。

3 討論

土壤是真菌生活的大本營,其中生存看各種各樣的真菌。本研究鑒定出9個種,另有3個屬的真菌未鑒定至種,涉及2個亞門,即接合菌亞門和半知菌亞門,其中以半知菌亞門為多。本研究分離出了土壤中的常見真菌,如:青霉屬(Penicillium)、曲霉屬(Aspergillus)和毛霉屬(Mucor)。其中多形毛霉和日本曲霉原變種在各個取樣點(diǎn)都出現(xiàn)了,可見它們?yōu)楸镜貐^(qū)的優(yōu)勢種之一。值得一提的是,本研究分離鑒定出了不常見的種:沙氏毛霉屬的1種[Saksenaea Saksena sp.]。

實(shí)驗只取了南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)農(nóng)場的4種土樣,因此并不具有完全的代表性,只可作為研究的參考。同時由于實(shí)驗過程中在芥菜地土壤上花費(fèi)的精力較多,因此鑒定出的真菌種類以芥菜地為多。而在水稻田上采用10-1土壤懸浮液涂布培養(yǎng),由于部分毛霉在2 d內(nèi)迅速長滿整個平板,對分離其他真菌造成了相當(dāng)大的困難,所以在水稻田的真菌種類鑒定出的比較少。

此外,南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)菜地和水稻田表層土壤微生物構(gòu)成中細(xì)菌種類豐富,而且大部分適合在PDA和PSA培養(yǎng)基上生長,即使使用添加0.03 %的鏈霉素的培養(yǎng)基分離真菌時,仍然有許多細(xì)菌在平板上長出,一定程度上抑制了真菌的生長,對有效地分離出真菌造成了相當(dāng)?shù)睦щy。

總之,土壤真菌種類構(gòu)成復(fù)雜,生存方式多樣,還有待植物病理學(xué)及真菌學(xué)工作者們付出辛勤的勞動,進(jìn)行進(jìn)一步的研究,為人類做出貢獻(xiàn)。

參考文獻(xiàn)

[1] 吳禮樹.土壤肥料學(xué)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2004:28.

[2] 胡開輝.微生物學(xué)實(shí)驗[M]. 北京:中國林業(yè)出版社,2004:10-189.

[3] 中國科學(xué)院微生物研究所. 常見與常用真菌[M]. 北京:科學(xué)出版社,1978:182-202.

[4] 齊祖同. 中國真菌志(第五卷)曲霉屬及其相關(guān)有性型[M]. 北京:科學(xué)出版社,1997:98-100.

[5] 黃昌勇. 土壤學(xué)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2005:51,53-58.endprint

2.2.6 日本曲霉原變種[A.japonicus var. japonisus]

PDA上25 ℃培養(yǎng)4 d菌落直徑4.5~5.0 cm。菌落絲絨狀,具輻射溝紋,邊緣白色,中間黑色,無滲出液,反面淡黃色。分生孢子頭幼齡為球形至輻射狀,直徑40~50.1 μm,老后呈黑褐色球形。分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì),孢梗莖(250~600)μm×(10~15)μm,近頂囊部分帶淡黃褐色,壁平滑。頂囊幼時稍長形,老后呈球形或近球形,直徑20~51 μm,大頂囊全面可育。產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)單層。分生孢子球形,直徑3~4.4 μm,壁顯著粗糙,具刺。

2.2.7 泡盛曲霉[A.awamori]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑3.5~4.1 cm。菌落平坦,絲絨狀,邊緣白色,中間黑褐色,反面淡黃色。分生孢子頭幼時呈輻射狀,直徑75~125 μm,老時呈黑色,球形。分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì),孢梗莖(250~1000)μm×(10~20)μm,頂囊部分稍收縮,壁平滑,上部帶黃褐色。頂囊球形,黃褐色,直徑35~70 μm,全面可育。產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)雙層。孢子球形或近球形,直徑3.5~4.5 μm,近于光滑。

2.2.8 黑曲霉[Aspergillus niger van Tieghem]

PSA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑2.0~3.5 cm。菌落初白色,厚絨狀,黑色,反面無色,中央部分略帶黃褐色。分生孢子頭幼時球形,漸變?yōu)榉派湫?,褐黑色,一?00~700 μm。分生孢子梗自基質(zhì)生出,長短不一,一般1~3 mm,直徑5.3~15 μm,壁厚,光滑。頂囊球形,一般直徑為45~65 μm。產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)雙層,自頂囊全面著生,黃褐色。分生孢子球形,直徑大多4~5 μm,褐色色素積于內(nèi)壁和外壁間成為塊狀而顯現(xiàn)粗糙。

2.2.9 枯青霉[Penicillium citrinum Thom]

PSA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑1.0~2.2 cm。菌落絨毛狀,有放射狀溝紋,艾綠色,反面黃色至橙色。分生孢子梗大多自基質(zhì)生出,一般(40~69)μm×(2.5~3)μm,壁光滑,極少分枝。帚狀枝有3~4個輪生而略散開的?;鶚?gòu)成,(10.6~21.2)μm×(2.5~5)μm,每個?;洗厣?~8個略開而平行的小梗,(9~10.6) μm×(2.2~3)μm。分生孢子球形或近球形,2.2~4 μm,光滑或近于光滑。

2.2.10 黃青霉[P.chrysogenus Thom]

PDA上25 ℃培養(yǎng)4 d菌落直徑1.6~2.1 cm。菌落絨毛狀,邊緣白色,中間藍(lán)綠色至亮綠色,背面黃色,中間有突起。分生孢子梗從菌絲垂直生出,無足細(xì)胞,有橫膈膜,一般(15~37)μm×(3~3.5)μm,壁光滑。帚狀枝長,由2個近于平行排列的?;鶚?gòu)成,(20~30.8)μm×(2.6~3.2)μm,常不對稱,每個?;洗厣? ~4個小梗,(6.7~10)μm×(2~2.5)μm。分生孢子橢圓形為主,長徑3~4 μm,壁平滑。此菌能產(chǎn)青霉素。

2.2.11 白地霉[Geotrichum candidum Link]

異名:乳卵孢霉[Oidium lactis Fresenius 或Oospora lactis(Fr.)Sacc]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑1.4~1.6 cm。菌落氈狀,白色,中間有突起,反面黃色。真菌絲,有的有二叉分枝,橫隔多或少,菌絲寬4.2~6.3 μm。裂殖。節(jié)孢子單個或連接成鏈,長筒形、方形、也有橢圓形或圓形,末端圓鈍。節(jié)孢子絕大多數(shù)為(4.2~5.9)μm×(5.4~17.5)μm。

2.2.12 立枯絲核菌[R.solani Kuhn]

PDA上25 ℃培養(yǎng)3 d菌落直徑5.4~5.7 cm。菌落棉花狀,白色,中間有黃色突起,反面無色。菌絲初無色,后漸變褐色,直徑12~14 μm,分枝處呈直角,基部稍縊縮,有隔膜。該病菌侵染馬鈴薯得黑痣病,侵染水稻得立枯病。

3 討論

土壤是真菌生活的大本營,其中生存看各種各樣的真菌。本研究鑒定出9個種,另有3個屬的真菌未鑒定至種,涉及2個亞門,即接合菌亞門和半知菌亞門,其中以半知菌亞門為多。本研究分離出了土壤中的常見真菌,如:青霉屬(Penicillium)、曲霉屬(Aspergillus)和毛霉屬(Mucor)。其中多形毛霉和日本曲霉原變種在各個取樣點(diǎn)都出現(xiàn)了,可見它們?yōu)楸镜貐^(qū)的優(yōu)勢種之一。值得一提的是,本研究分離鑒定出了不常見的種:沙氏毛霉屬的1種[Saksenaea Saksena sp.]。

實(shí)驗只取了南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)農(nóng)場的4種土樣,因此并不具有完全的代表性,只可作為研究的參考。同時由于實(shí)驗過程中在芥菜地土壤上花費(fèi)的精力較多,因此鑒定出的真菌種類以芥菜地為多。而在水稻田上采用10-1土壤懸浮液涂布培養(yǎng),由于部分毛霉在2 d內(nèi)迅速長滿整個平板,對分離其他真菌造成了相當(dāng)大的困難,所以在水稻田的真菌種類鑒定出的比較少。

此外,南寧市西鄉(xiāng)塘區(qū)菜地和水稻田表層土壤微生物構(gòu)成中細(xì)菌種類豐富,而且大部分適合在PDA和PSA培養(yǎng)基上生長,即使使用添加0.03 %的鏈霉素的培養(yǎng)基分離真菌時,仍然有許多細(xì)菌在平板上長出,一定程度上抑制了真菌的生長,對有效地分離出真菌造成了相當(dāng)?shù)睦щy。

總之,土壤真菌種類構(gòu)成復(fù)雜,生存方式多樣,還有待植物病理學(xué)及真菌學(xué)工作者們付出辛勤的勞動,進(jìn)行進(jìn)一步的研究,為人類做出貢獻(xiàn)。

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