鐘蘭香，馮霞

(江蘇省蘇北人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)中心，江蘇 揚(yáng)州225001)

尿沉渣檢查是尿液常規(guī)分析的重要組成部分，對(duì)腎臟、泌尿道及循環(huán)系統(tǒng)疾病有重要的診斷價(jià)值和鑒別診斷價(jià)值，其中尿紅細(xì)胞是最重要也是最常見(jiàn)的病理指標(biāo)之一，其檢測(cè)方法有干化學(xué)法、尿有形成分分析儀法及顯微鏡檢查(鏡檢)等。iQTM-200尿液分析工作站是由AUTION MAX AX-4280尿液干化學(xué)分析儀聯(lián)合iQ-200全自動(dòng)尿有形成分分析儀(iQ-200)構(gòu)成，實(shí)現(xiàn)了尿干化和有形成分分析的一體化和全自動(dòng)化，本文通過(guò)分析人工鏡檢方法測(cè)定的尿紅細(xì)胞結(jié)果和iQTM-200尿液分析工作站檢測(cè)尿紅細(xì)胞結(jié)果的差異，探討iQTM-200尿液分析工作站在尿紅細(xì)胞檢測(cè)中的價(jià)值，并為尿紅細(xì)胞的復(fù)檢提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 隨機(jī)選取本院門診、住院患者尿液2012例，男943例，女1069例，年齡1~87歲。

1.2 儀器與試劑 AUTION MAX AX-4280及配套試劑 (日本ARKRAY有限公司生產(chǎn))；iQ-200及配套試劑 (美國(guó)IRIS公司生產(chǎn))；離心機(jī)；Leica顯微鏡；10ml刻度尿沉渣離心管。

1.3 方法 AX-4280進(jìn)行日常質(zhì)控，iQ-200按照儀器操作規(guī)程進(jìn)行日常的焦距(FOCUS)調(diào)焦操作和質(zhì)控(陰性和陽(yáng)性質(zhì)控)，質(zhì)控均在控后將留取的尿液標(biāo)本先按照iQTM-200尿液分析工作站操作說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)，再按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[1]進(jìn)行顯微鏡檢，由熟練操作者在2h內(nèi)完成。

1.4 結(jié)果判讀 AX-4280尿干化學(xué)分析儀參考值由日本ARKRAY有限公司提供，尿紅細(xì)胞(BLD)以1+及以上為陽(yáng)性 (1+相當(dāng)于20/μl個(gè)紅細(xì)胞)，iQ-200全自動(dòng)尿有形成分分析儀參考值由IRIS公司提供，紅細(xì)胞(RBC)≤17/μl，超出為陽(yáng)性，顯微鏡檢按RBC≤3/HP，超出為陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法 統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)3種方法的檢測(cè)結(jié)果用χ2檢驗(yàn)比較,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三種方法的RBC檢出率 2012份標(biāo)本中儀器法尿干化、iQ-200尿有形成分檢測(cè)(儀器法)及顯微鏡法對(duì)尿紅細(xì)胞的檢出率分別是29.3%、23.5%、24.2%，以顯微鏡檢法為標(biāo)準(zhǔn)，尿干化與鏡檢紅細(xì)胞陽(yáng)性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，儀器法與鏡檢紅細(xì)胞陽(yáng)性檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)。

2.2 不同條件下RBC檢測(cè)的假陰性率、假陽(yáng)性率以顯微鏡檢法為標(biāo)準(zhǔn),儀器法檢測(cè)紅細(xì)胞的假陰性率為10.5%，假陽(yáng)性率為2.4%，AX-4280尿干化檢測(cè)紅細(xì)胞的假陰性率為13.3%，假陽(yáng)性率為11.0%，尿干化學(xué)和顯微鏡檢尿紅細(xì)胞結(jié)果符合率是85.0%，儀器法尿紅細(xì)胞檢測(cè)和顯微鏡檢尿紅細(xì)胞結(jié)果符合率是90.7%。比較不同尿比重(SG)、BLD及不同性別條件下,儀器法與鏡檢紅細(xì)胞結(jié)果差異見(jiàn)表1。

表1 儀器法與鏡檢法在不同SG、BLD及不同性別時(shí)檢測(cè)尿紅細(xì)胞結(jié)果比較

2.3 綜合SG、BLD和性別三因素，RBC檢測(cè)的假陰性率、假陽(yáng)性率 以顯微鏡檢法為標(biāo)準(zhǔn),比較相同SG、BLD不同性別條件下，儀器法與鏡檢紅細(xì)胞結(jié)果差異見(jiàn)表2。

表2 相同SG、BLD不同性別時(shí)儀器法與鏡檢尿紅細(xì)胞結(jié)果比較

3 討論

AX-4280尿液干化分析儀采用血紅蛋白類過(guò)氧化酶法，測(cè)定尿液中游離的血紅蛋白，但如果尿中含有肌紅蛋白、對(duì)熱不穩(wěn)定酶、氧化劑或細(xì)菌均可導(dǎo)致假陽(yáng)性的出現(xiàn)，如果尿液中存在大量維生素C或其他還原性物質(zhì)，可競(jìng)爭(zhēng)性抑制氧化反應(yīng)而產(chǎn)生假陰性，這使尿液紅細(xì)胞沉渣和干化檢查結(jié)果出現(xiàn)一定程度的不一致，符合率僅85.0%。本次數(shù)據(jù)收集中尿干化出現(xiàn)較高的假陰性率與判斷標(biāo)準(zhǔn)也有一定關(guān)系，BLD為1+時(shí)紅細(xì)胞約為20/μl，接近尿沉渣的紅細(xì)胞正常值 (17/μl)，所以以BLD1+及以上為陽(yáng)性，而部分BLD±未計(jì)在內(nèi)，如果將其計(jì)在陽(yáng)性范圍內(nèi)，假陰性率降低，假陽(yáng)性率會(huì)增高，如尿液中的紅細(xì)胞新鮮完整，試紙上BLD區(qū)顯示斑點(diǎn)樣，AX-4280尿儀會(huì)判讀為±或-，引起假陰性。Hoffmann P等也報(bào)道尿干化紅細(xì)胞檢測(cè)出現(xiàn)一定的假陰性率和假陽(yáng)性率[2]，這是受反應(yīng)原理所限。

iQ-200尿有形成分分析儀采用了美國(guó)國(guó)際遙感圖像系統(tǒng) (IRIS)公司創(chuàng)建的尿沉渣分析最新技術(shù),它主要特點(diǎn)是應(yīng)用高速頻閃光源和電視攝像的光學(xué)系統(tǒng),根據(jù)動(dòng)力學(xué)原理,在與CCD攝像機(jī)相連的顯微鏡下,對(duì)每個(gè)待測(cè)標(biāo)本進(jìn)行流動(dòng)檢測(cè),攝像機(jī)對(duì)每個(gè)樣品捕捉500幀,并送到分析處理器,通過(guò)自動(dòng)微粒識(shí)別軟件對(duì)每幀中的各個(gè)微粒影像加以區(qū)別[3]。由于尿液成分的復(fù)雜，儀器法檢測(cè)紅細(xì)胞易受尿液中的結(jié)晶、霉菌[4，5]的影響而出現(xiàn)假陽(yáng)性，但其軟件的優(yōu)點(diǎn)是提供定量結(jié)果的同時(shí)將圖像儲(chǔ)存在屏幕上以供觀察，對(duì)可疑成分可任意選取進(jìn)行人工復(fù)核，這大大降低紅細(xì)胞檢測(cè)的假陽(yáng)性率，使儀器檢測(cè)與顯微鏡檢紅細(xì)胞的符合率從高淑芳等報(bào)道的73.6%[6]增高到90.7%，謝文鋒等[7]也報(bào)道iQ-200修正后的RBC與人工鏡檢結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

顯微鏡檢雖是尿液沉渣分析的金標(biāo)準(zhǔn)，也有其無(wú)法克服的缺點(diǎn)，如離心使細(xì)胞破壞、變形，不能檢測(cè)已溶解破壞的紅細(xì)胞,不同操作人員識(shí)別水平及判別標(biāo)準(zhǔn)的差異，可能造成診斷的假陰性,當(dāng)鏡檢紅細(xì)胞正常，與干化不符且臨床懷疑有出血時(shí)可用單克隆抗體免疫法檢查尿液紅細(xì)胞[8]，以確保不漏檢。本文以SG(因低比重尿RBC會(huì)溶解)、BLD(與RBC有很大的相關(guān)性)、性別(生理解剖特征不同)三因素探討iQTM-200尿液分析工作站和手工鏡檢尿RBC的差異。結(jié)果顯示，在不同的SG時(shí)，儀器法檢測(cè)結(jié)果的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；男性尿RBC儀器法與鏡檢結(jié)果的一致性高于女性；在鏡檢陰性、BLD陰性時(shí)，儀器法的尿RBC假陽(yáng)性率女性大于男性(P<0.05)，而鏡檢陰性、BLD陽(yáng)性時(shí)，儀器法的尿RBC假陽(yáng)性率男性大于女性，這可能與不同性別中尿液中有形成分的差異及尿液有形成分分析儀的識(shí)別能力、不同工作人員的細(xì)胞識(shí)別能力有關(guān)；在鏡檢陽(yáng)性時(shí)，不同的SG、BLD時(shí)儀器法假陰性率不同，說(shuō)明在儀器尿液分析中SG也是一個(gè)影響因素，因多數(shù)尿液標(biāo)本的SG均正常，SG無(wú)法細(xì)分，無(wú)法探討低滲、高滲尿液儀器分析的不正確率是本次研究的不足之處；表2中有多項(xiàng)無(wú)法統(tǒng)計(jì)，主要是這幾種模式的少見(jiàn)，從側(cè)面反映了iQ-200與手工鏡檢的高一致性90.7%。有些儀器法的陰性結(jié)果受它的原理和技術(shù)所限，將其分辨不清的細(xì)胞全都?xì)w入未分類細(xì)胞中，這就要求工作人員不斷提高對(duì)不同細(xì)胞在屏幕上的識(shí)別能力，進(jìn)一步提高儀器法與手工鏡檢的一致性，但由于尿液成分的復(fù)雜，儀器法不能完全替代顯微鏡檢。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜,等.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第 3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:294.

[2]Hoffmann P,Hoffmanna C,Ziebig R,et al.Evaluation of the iChem VelocityTMurine chemistry analyzer in a hospital routine laboratory[J].Clin Chem Lab Med,2011,49(3):509-513.

[3]Deindoerfe FH,Gangwer JR,Laird CW,et al.“The Yellow IRISTM” urinalysis workstation-the first commercial application of “automated intelligent microscopy”[J].Clin Chem,1985,31 (9):1491-1493.

[4]梁騎,李君安,王東生,等.四種全自動(dòng)尿沉渣分析儀對(duì)尿液中紅細(xì)胞和白細(xì)胞的檢測(cè)性能研究 [J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2012，15(32):3737-3742.

[5]劉旗,王明麗,徐笑紅.菌尿?qū)Q-200尿液分析儀測(cè)定尿紅細(xì)胞的影響[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2008,26(3)326-327.

[6]高淑芳,張雪清,陸波,等.人工鏡檢與科寶XS全自動(dòng)尿沉渣分析儀及IQ 200尿沉渣分析儀的比較和評(píng)價(jià)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,26(4):231-234.

[7]謝文鋒,林川,嚴(yán)海燕,等.IRIS iQ200與 Sysmex UF-1000i自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)尿液紅、白細(xì)胞的性能評(píng)價(jià)[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010,28(6):595-596,612.

[8]叢玉隆,馬駿龍.幾種檢測(cè)尿紅細(xì)胞方法的價(jià)值與互補(bǔ)關(guān)系[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2002,25(5):263-264.