鄭斌等

摘要：采用不同遮陰處理（全光照、73%全光照、55%全光照、30%全光照）研究遮陰條件下白花敗醬[Patrinia villosa （Thunb.） Juss.]葉片的形態(tài)、解剖結(jié)構(gòu)及生理特性的差異，并探討其在夏季環(huán)境條件下的產(chǎn)量及藥用成分。結(jié)果表明，隨著遮陰程度的增大，白花敗醬葉寬、單葉面積、單葉鮮重和葉綠素含量呈增大的趨勢(shì)，氣孔密度、比葉重、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)、脯氨酸和丙二醛含量呈降低的趨勢(shì)，單株產(chǎn)量呈先增后減的趨勢(shì)，而總皂苷和總黃酮含量則呈先減后增的趨勢(shì)。綜合考慮，在夏季給予55%全光照的遮陰，白花敗醬的產(chǎn)量及藥用成分含量均較高。

關(guān)鍵詞：白花敗醬[Patrinia villosa （Thunb.） Juss.]；遮陰；形態(tài)；解剖；生理特性；藥用成分

中圖分類號(hào)：R282 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）13-3111-05

Effects of Shade on Morphological， Anatomical and Physiological Properties

of Patrinia villosa （Thunb.） Juss. Leaves

ZHENG Bin，CHEN Hong-guo，YAN Zhi-qiang，LUO Xian-zhen，DUAN Lai-jun，HE Hai-guo

（College of Nuclear Technology， Chemistry and Biology， Hubei University of Science and Technology， Xianning 437100， Hubei， China）

Abstract： Four levels of artificial shade（100%， 73%， 55% and 30% full sunlight） were used to study the morphological， anatomical and physiological properties of Patrinia villosa （Thunb.） Juss. leaves. The results showed that with the increase of shade density， the leaf width， leaf area， leaf fresh weight and chlorophyll content increased gradually. The stomatal density， specific leaf weight（SLW）， the content of soluble sugar， soluble protein， proline and malonaldehyde decreased. The yield per plant and the content of total saponins and flavonoids increased firstly and then decreased. 55% full sunlight in summer can be used to cultivate Patrinia villosa（Thunb.） Juss due to its high yield and the accumulation of medicinal components.

Key word： Patrinia villosa （Thunb.） Juss.； shade； morphology； anatomy； physiological property； medicinal components

光對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育、形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理生化等都有重要的作用。不同光環(huán)境下植物的形態(tài)、生物量的分配、光合作用及生化物質(zhì)的含量都會(huì)有所不同[1，2]。葉是植物對(duì)環(huán)境最敏感的器官，環(huán)境的變化會(huì)在葉的生長(zhǎng)發(fā)育及生理代謝中得到體現(xiàn)，而分布廣泛、生態(tài)適應(yīng)性強(qiáng)的植物往往有更大的可塑性[3]。植物的次生代謝是植物長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中對(duì)復(fù)雜生態(tài)環(huán)境適應(yīng)的結(jié)果，而藥用植物的次生代謝產(chǎn)物多作為藥用成分，其產(chǎn)生與變化相對(duì)初級(jí)代謝產(chǎn)物與環(huán)境有著更強(qiáng)的相關(guān)性和對(duì)應(yīng)性[4]。

白花敗醬[Patrinia villosa （Thunb.） Juss.]又名敗醬草、苦菜等，是一種歷史悠久的中草藥及野菜。在臨床上常用于治療慢性盆腔炎、結(jié)腸炎等，還具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、保肝利膽等功效[5，6]。其食用部分富含膳食纖維、維生素C及多種微量元素，還具有明顯的抗便秘作用[7]，因而具有很高的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。隨著天然藥物開(kāi)發(fā)的日漸興起，提高植物次生代謝產(chǎn)物的含量已成為一個(gè)重要環(huán)節(jié)。環(huán)境對(duì)次生代謝產(chǎn)物作用的研究，具有很大的理論和實(shí)踐意義[8]。白花敗醬在我國(guó)分布極廣，適應(yīng)性強(qiáng)，常見(jiàn)于山地溪溝邊、林緣、路邊等較陰濕的環(huán)境中[9]。但目前的研究多集中在化學(xué)成分及藥理方面，有關(guān)環(huán)境條件對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育等影響的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究比較了不同遮陰條件下白花敗醬葉片形態(tài)、解剖結(jié)構(gòu)及生理特性的差異，并探討遮陰對(duì)其產(chǎn)量及主要藥用成分總皂苷、總黃酮含量的影響，為人工栽培及后續(xù)研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)在湖北科技學(xué)院實(shí)驗(yàn)地進(jìn)行，該地氣候概況見(jiàn)參考文獻(xiàn)[10]。于2011年11月，挑選生長(zhǎng)狀況較一致的白花敗醬植株進(jìn)行移栽，株行距為20～25 cm。試驗(yàn)設(shè)置4種光照條件，用黑色遮陽(yáng)網(wǎng)及紗網(wǎng)進(jìn)行遮光，用ST—80C型照度計(jì)（北京師范大學(xué)光電儀器廠）測(cè)定光照度，分別為對(duì)照（全光照）、一層紗網(wǎng)（73%全光照）、兩層紗網(wǎng)（55%全光照）、一層遮陽(yáng)網(wǎng)（30%全光照）。棚長(zhǎng)×寬為5 m×2 m，高度100 cm，并保持一定的間距。遮陰處理于2012年5月15日開(kāi)始，于6月25～30日開(kāi)始測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)。試驗(yàn)期間管理?xiàng)l件一致。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 白花敗醬微環(huán)境、生長(zhǎng)及葉形態(tài)的測(cè)定 用溫度計(jì)測(cè)定土壤溫度（距土表8 cm）；利用稱重法測(cè)定土壤含水量，選擇有代表性的、處理效果較一致的植株，在其附近空地取表層0～6 cm及6～10 cm的剖面土壤（五點(diǎn)取樣法），迅速用塑料袋裝好，及時(shí)測(cè)定；單株產(chǎn)量，每組挖取帶根植株若干，再隨機(jī)選取3株，洗去泥土后稱重；單葉厚度，選取生長(zhǎng)狀況較一致的枝條上第3～5片葉，將5片葉子重疊，用游標(biāo)卡尺測(cè)定總厚度，取平均值；莖粗用游標(biāo)卡尺測(cè)量；比葉重用單葉干重比單葉面積進(jìn)行計(jì)算；葉長(zhǎng)、葉寬用游標(biāo)卡尺測(cè)量；單葉面積用比重法測(cè)定，用打孔器分別在各組葉相同部位打孔，計(jì)算小圓片的面積，分別稱量小圓片及葉片質(zhì)量即得到葉近似面積，以上均重復(fù)3～5次。

1.2.2 葉解剖結(jié)構(gòu)的測(cè)定 每組隨機(jī)選取3～5片葉，清水浸泡后再用鑷子撕取下表皮，鏡檢并各選取10個(gè)視野，用測(cè)微尺統(tǒng)計(jì)氣孔數(shù)目并計(jì)算氣孔密度；再分別隨機(jī)選取3～5片葉，在葉片中部主脈處進(jìn)行徒手切片，鏡檢并拍照。同時(shí)各選取10個(gè)視野，用測(cè)微尺測(cè)定柵欄組織及海綿組織的厚度。

1.2.3 生理指標(biāo)的測(cè)定 色素的提取測(cè)定采用浸提法[11]，可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)、脯氨酸及丙二醛的含量測(cè)定均參照張志良等[12]的方法。總皂苷的提取及含量測(cè)定參考萬(wàn)德光等[13]的方法并略作改動(dòng)：精確稱取10 mg齊墩果酸對(duì)照品（上海源葉生物科技有限公司），用甲醇配制成0.2 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取0.1、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL于10 mL試管中，用甲醇定容至刻度線。用TU-1810型紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）分別對(duì)各標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行光譜掃描，得到最大吸收波長(zhǎng)為208 nm。然后在208 nm處測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，得到回歸方程A=13.159 C+0.001 6，R2=0.999 5，其線性范圍為0.000～0.040 mg/mL?？傸S酮含量測(cè)定采用NaNO2-Al（NO3）3顯色法[14]，得到回歸方程為A=1.568 6 C-0.003 9，R2=0.999 2，其線性范圍為0.000～0.020 mg/mL?？傇碥蘸涂傸S酮的提取方法：分別取2.5 g烘干的樣品粉末，用70%乙醇進(jìn)行索氏提取，提取液定容搖勻后再分別取樣測(cè)定，3次重復(fù)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用Excel 2003軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理并用SPSS 16.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行One way ANOVA分析，LSD檢驗(yàn)比較組間差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 遮陰對(duì)白花敗醬的微環(huán)境及生長(zhǎng)的影響

由表1可知，各組間土壤溫度的差異達(dá)到了顯著水平，隨著遮陰程度的增大，土壤溫度呈降低的趨勢(shì)。土壤濕度則隨遮陰程度的增大呈升高的趨勢(shì)，其中30%全光照組土壤濕度明顯較對(duì)照組大，0～6 cm土壤剖面的濕度較對(duì)照組增加了4.62個(gè)百分點(diǎn)，而6～10 cm的土壤剖面濕度較對(duì)照組增加了7.51個(gè)百分點(diǎn)。這表明重度遮陰能有效降低土壤溫度并增加土壤濕度，尤其是較深土層。同時(shí)，遮陰對(duì)白花敗醬生長(zhǎng)有顯著影響。在各組處理中，全光照下白花敗醬單葉鮮重及莖粗均最小，分別為0.168 0 g和0.252 cm，葉厚度最大，達(dá)0.336 mm。隨著遮光程度的增大，白花敗醬單葉鮮重顯著增加，其中30%全光照組的單葉鮮重為全光照組的2.3倍，達(dá)0.392 5 g。而且遮陰組單葉厚度明顯較對(duì)照組小，莖粗則較對(duì)照組大，但遮陰組之間的葉厚度和莖粗的差異不大。比葉重隨遮陰程度的增大逐漸減小，各處理差異達(dá)到極顯著水平，單株產(chǎn)量隨遮陰程度的增大呈先增后減的趨勢(shì)。

2.2 遮陰對(duì)白花敗醬葉片形態(tài)的影響

植物在長(zhǎng)期外界生態(tài)環(huán)境的影響下，葉的形態(tài)構(gòu)造上的變異性和塑造性是最大的[15]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，遮陰對(duì)白花敗醬葉的形態(tài)有明顯影響。隨著遮陰程度的增大，單葉面積逐漸增大，葉逐漸變寬，由披針形變?yōu)槁研沃灵熉研?，葉脈由緊密變得疏松，鋸齒也由細(xì)鋸齒變?yōu)榇咒忼X（圖1）。對(duì)照組和遮陰組之間的葉寬和單葉面積有極顯著差異。對(duì)照組葉狹長(zhǎng)，與73%全光照及55%全光照組葉長(zhǎng)的差異不顯著，而30%全光照組葉寬大，單葉面積為對(duì)照組的3.6倍（表2）。植物通過(guò)增加葉面積以增加對(duì)陽(yáng)光的捕獲和利用，以適應(yīng)減弱的光環(huán)境，這體現(xiàn)了白花敗醬較強(qiáng)的耐陰性。

2.3 遮陰對(duì)白花敗醬葉解剖結(jié)構(gòu)的影響

由表2可知，對(duì)照組與遮陰組白花敗醬的氣孔密度有極顯著差異。全光照下葉下氣孔密度最大，隨著遮陰程度的增加，各處理氣孔密度、柵欄組織厚度及柵欄組織/海綿組織均呈降低趨勢(shì)，海綿組織厚度則呈先減后增的趨勢(shì)。其中30%全光照下白花敗醬氣孔密度比對(duì)照組減小37.8%，且遮陰條件下海綿組織細(xì)胞間隙明顯增大（圖2）。

2.4 遮陰對(duì)白花敗醬葉片光合色素含量的影響

由表3可知，隨著遮陰程度的增大，白花敗醬葉片中葉綠素a、葉綠素b的含量逐漸增大，遮陰處理與對(duì)照組呈顯著或極顯著差異。葉綠素a/b呈先減后增的趨勢(shì)，表明植物通過(guò)增加葉綠素b的含量以適應(yīng)減弱的光環(huán)境，這與前人的研究結(jié)論一致[16]。30%全光照葉綠素a/b與55%全光照組差異不顯著。遮陰處理后，白花敗醬葉片類胡蘿卜素呈先減后增的趨勢(shì)，其中全光照和55%全光照組無(wú)顯著差異。類胡蘿卜素作為光合作用重要的色素，能避免葉綠素的光氧化和紫外線輻射傷害[17]，所以作為一種保護(hù)方式，全光照組類胡蘿卜素含量高于73%全光照組，而30%全光照組較55%全光照組葉綠素及類胡蘿卜素含量顯著增加，則是對(duì)弱光適應(yīng)性的體現(xiàn)。

2.5 遮陰對(duì)白花敗醬葉片生理指標(biāo)的影響

由表4可知，對(duì)照組與各處理組白花敗醬葉片的可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)、脯氨酸和丙二醛含量間有顯著或極顯著差異，且均隨遮陰程度的增大呈減小的趨勢(shì)。全光照下的可溶性蛋白質(zhì)、脯氨酸和丙二醛含量較其他組差異較大，而30%全光照下的可溶性蛋白質(zhì)含量較其他遮陰組減小幅度較大?？扇苄蕴呛透彼崾菨B透調(diào)節(jié)物質(zhì)，其變化情況表明各組受脅迫的程度依次減小。丙二醛是膜脂過(guò)氧化的產(chǎn)物，反映了植物膜脂過(guò)氧化的程度，其變化情況表明遮陰能減弱逆境對(duì)植物的傷害。

2.6 遮陰對(duì)白花敗醬總黃酮及總皂苷含量的影響

由圖3和圖4可知，隨著遮陰程度的增大，白花敗醬總皂苷和總黃酮的含量均呈先減后增的趨勢(shì)，其中白花敗醬總皂苷含量55%全光照組與30%全光照組無(wú)顯著差異。全光照條件下白花敗醬總皂苷及總黃酮的含量均高于各遮陰處理組，且存在顯著差異。

3 結(jié)論與討論

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，夏季進(jìn)行遮陰處理是一種常用的方式。遮陰能通過(guò)減弱太陽(yáng)光的直射以降低環(huán)境溫度和增加土壤濕度。溫度的降低，能減少水分的蒸發(fā)，植物有了充足的水分供應(yīng)，通過(guò)蒸騰作用也能向環(huán)境中釋放一定的熱量，以降低植物體的溫度，并維持適宜的溫度和濕度，從而有利于植物度過(guò)夏季不良環(huán)境。因此，遮陰可以改變植物生長(zhǎng)的微環(huán)境，并通過(guò)多種因素綜合作用于植物體。

植物的葉作為光合作用的主要器官，其形態(tài)解剖特點(diǎn)在一定程度上能反映環(huán)境的狀況。如，孟慶杰等[15]研究了桃葉解剖結(jié)構(gòu)與其抗旱性的關(guān)系，結(jié)果表明桃葉厚、氣孔密度高，則抗旱性強(qiáng)。本試驗(yàn)中，全光照組處理的白花敗醬單葉厚度、柵欄組織厚度和氣孔密度均明顯高于遮陰處理，這可能是受高溫、強(qiáng)光、干旱的環(huán)境脅迫所致。而柵欄組織與海綿組織厚度的比值反映了柵欄組織占葉肉厚度的比重[18]，本試驗(yàn)中該值隨遮陰程度的增大而減小，說(shuō)明了柵欄組織在葉片中所占的比例逐漸減小，光合能力逐漸減弱。葉片的厚度取決于葉發(fā)育過(guò)程中的光照，成熟的葉片厚度則變化很小[19]。本試驗(yàn)中，白花敗醬海綿組織厚度先降低后升高，這可能由于遮陰條件下植物通過(guò)調(diào)整葉肉組織的分化，以適應(yīng)不同的光環(huán)境。強(qiáng)光下，既增加?xùn)艡诮M織的厚度又增加海綿組織的厚度，以增加?xùn)艡诮M織厚度為主。而弱光下柵欄組織厚度減小的同時(shí)又增加了海綿組織的厚度，以增加海綿組織厚度為主。

產(chǎn)量可衡量植物的生長(zhǎng)情況，是對(duì)環(huán)境響應(yīng)的一種體現(xiàn)。光照有利于光合作用的進(jìn)行，但由于強(qiáng)光及水分等限制，影響了植物的生長(zhǎng)發(fā)育，所以本試驗(yàn)中對(duì)照組單株產(chǎn)量較低。而當(dāng)光照不足時(shí)，植物生長(zhǎng)受阻，且對(duì)莖和根生物量的分配減少，使得發(fā)枝數(shù)減少，根系稀疏較淺，所以重度遮陰葉面積、單葉鮮重都較大，但整體生物量降低?？傇碥蘸涂傸S酮是白花敗醬重要的藥用成分，前人的研究表明，環(huán)境中光照、溫度、水分等因子對(duì)植物體三萜皂苷的合成有較大的影響[4]。研究表明紫外輻射、高光強(qiáng)、低溫、高CO2濃度、適度干旱以及合理的施肥等因素均可以促進(jìn)黃酮類成分的合成[20]。在夏季高溫、強(qiáng)光、干旱的綜合影響下，白花敗醬生長(zhǎng)遲緩，從而有利于藥用成分的積累。白花敗醬在野外常見(jiàn)于路邊、林緣等相對(duì)陰濕地段，且生長(zhǎng)良好。植物的自然分布及其生境條件在人工栽培上是可借鑒的。本研究表明中度遮陰下白花敗醬生長(zhǎng)良好，產(chǎn)量及藥用成分均較高。

參考文獻(xiàn)：

[1] SKILLMAN J B，GARCIA M，VIRGO A，et al.Growth irradiance effects on photosynthesis and growth in two co-occurring shade-tolerant neotropical perennials of contrasting photosynthetic pathways[J]. American Journal of Botany，2005，92（11）：1811-1819.

[2] PERI P L，MOOT D J，JARVIS P，et al.Morphological， anatomical， and physiological changes of orchardgrass leaves grown under fluctuating light regimes[J]. American Society of Agronomy， 2007， 99：1502-1513.

[3] GRATANI L，COVONE F，LARCHER W. Leaf plasticity in response to light of three evergreen species of the Mediterranean maquis[J]. Trees，2006，20：549-558.

[4] 焦曉林，高微微.環(huán)境因子對(duì)藥用植物三萜皂苷合成影響的研究進(jìn)展[J].中草藥，2011，42（2）：398-402.

[5] 趙 棟，丁 青，肖 藝.敗醬草的研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，15（10）：76-78.

[6] 李 娜.白花敗醬草化學(xué)成份、抗炎作用以及總皂苷提取純化工藝研究[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2006.

[7] 朱加進(jìn).白花敗醬的綜合開(kāi)發(fā)及提取物對(duì)毒死蜱抑制吸收的作用研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2006.

[8] 李 霞.環(huán)境因子對(duì)黃檗幼苗生長(zhǎng)及主要藥用成分含量的影響[D].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2006.

[9] 金水虎，李根有，胡永旭.白花敗醬繁育技術(shù)初步研究[J].中國(guó)野生植物資源.2002，21（3）：52-53.

[10] 何禮軍，王珊崇，楊園園，等.三角梅在咸寧市生態(tài)適應(yīng)性研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，51（12）：2536-2538.

[11] 郝再彬，蒼 晶，徐 仲.植物生理實(shí)驗(yàn)[M].哈爾濱：哈爾濱工業(yè)大學(xué)出版社，2004.

[12] 張志良，翟偉菁.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京：高等教育出版社，2003.

[13] 萬(wàn)德光，裴 瑾，唐 遠(yuǎn)，等.分光光度法測(cè)定威靈仙中總皂苷的含量[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，30（3）：52-53.

[14] 黃澤元，王海濱，劉志偉，等.芝麻葉中總黃酮的最佳提取工藝研究[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2004，20（6）：201-204.

[15] 孟慶杰，王光全，董邵峰，等.桃葉片組織結(jié)構(gòu)特征與其抗旱性關(guān)系的研究[J].干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，2004，22（3）：124-126.

[16] 安翠香，楊世梅，紀(jì)海波，等.遮陰對(duì)甜瓜葉片光合特性的影響[J].西北植物學(xué)報(bào)，2012，32（2）：342-347.

[17] 張林青，周 青，肖程嶺，等.園林植物耐陰性研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（19）：4851-4853.

[18] 趙光偉，孫廣玉，閻秀峰，等.烤煙成熟時(shí)柵欄組織與海綿組織厚度比值的變化[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，46（2）：266-267.

[19] PANDEY S，KUSHWAHA R. Leaf anatomy and photosynthetic acclimation in Valeriana jatamansi L. grown under high and low irradiance[J]. Photosynthetica，2005，43（1）：85-90.

[20] 徐文燕，高微微，何春年，等.環(huán)境因子對(duì)植物黃酮類化合物生物合成的影響[J].世界科學(xué)技術(shù)，2006，8（6）：68-72.

2.6 遮陰對(duì)白花敗醬總黃酮及總皂苷含量的影響

由圖3和圖4可知，隨著遮陰程度的增大，白花敗醬總皂苷和總黃酮的含量均呈先減后增的趨勢(shì)，其中白花敗醬總皂苷含量55%全光照組與30%全光照組無(wú)顯著差異。全光照條件下白花敗醬總皂苷及總黃酮的含量均高于各遮陰處理組，且存在顯著差異。

3 結(jié)論與討論

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，夏季進(jìn)行遮陰處理是一種常用的方式。遮陰能通過(guò)減弱太陽(yáng)光的直射以降低環(huán)境溫度和增加土壤濕度。溫度的降低，能減少水分的蒸發(fā)，植物有了充足的水分供應(yīng)，通過(guò)蒸騰作用也能向環(huán)境中釋放一定的熱量，以降低植物體的溫度，并維持適宜的溫度和濕度，從而有利于植物度過(guò)夏季不良環(huán)境。因此，遮陰可以改變植物生長(zhǎng)的微環(huán)境，并通過(guò)多種因素綜合作用于植物體。

植物的葉作為光合作用的主要器官，其形態(tài)解剖特點(diǎn)在一定程度上能反映環(huán)境的狀況。如，孟慶杰等[15]研究了桃葉解剖結(jié)構(gòu)與其抗旱性的關(guān)系，結(jié)果表明桃葉厚、氣孔密度高，則抗旱性強(qiáng)。本試驗(yàn)中，全光照組處理的白花敗醬單葉厚度、柵欄組織厚度和氣孔密度均明顯高于遮陰處理，這可能是受高溫、強(qiáng)光、干旱的環(huán)境脅迫所致。而柵欄組織與海綿組織厚度的比值反映了柵欄組織占葉肉厚度的比重[18]，本試驗(yàn)中該值隨遮陰程度的增大而減小，說(shuō)明了柵欄組織在葉片中所占的比例逐漸減小，光合能力逐漸減弱。葉片的厚度取決于葉發(fā)育過(guò)程中的光照，成熟的葉片厚度則變化很小[19]。本試驗(yàn)中，白花敗醬海綿組織厚度先降低后升高，這可能由于遮陰條件下植物通過(guò)調(diào)整葉肉組織的分化，以適應(yīng)不同的光環(huán)境。強(qiáng)光下，既增加?xùn)艡诮M織的厚度又增加海綿組織的厚度，以增加?xùn)艡诮M織厚度為主。而弱光下柵欄組織厚度減小的同時(shí)又增加了海綿組織的厚度，以增加海綿組織厚度為主。

產(chǎn)量可衡量植物的生長(zhǎng)情況，是對(duì)環(huán)境響應(yīng)的一種體現(xiàn)。光照有利于光合作用的進(jìn)行，但由于強(qiáng)光及水分等限制，影響了植物的生長(zhǎng)發(fā)育，所以本試驗(yàn)中對(duì)照組單株產(chǎn)量較低。而當(dāng)光照不足時(shí)，植物生長(zhǎng)受阻，且對(duì)莖和根生物量的分配減少，使得發(fā)枝數(shù)減少，根系稀疏較淺，所以重度遮陰葉面積、單葉鮮重都較大，但整體生物量降低。總皂苷和總黃酮是白花敗醬重要的藥用成分，前人的研究表明，環(huán)境中光照、溫度、水分等因子對(duì)植物體三萜皂苷的合成有較大的影響[4]。研究表明紫外輻射、高光強(qiáng)、低溫、高CO2濃度、適度干旱以及合理的施肥等因素均可以促進(jìn)黃酮類成分的合成[20]。在夏季高溫、強(qiáng)光、干旱的綜合影響下，白花敗醬生長(zhǎng)遲緩，從而有利于藥用成分的積累。白花敗醬在野外常見(jiàn)于路邊、林緣等相對(duì)陰濕地段，且生長(zhǎng)良好。植物的自然分布及其生境條件在人工栽培上是可借鑒的。本研究表明中度遮陰下白花敗醬生長(zhǎng)良好，產(chǎn)量及藥用成分均較高。

參考文獻(xiàn)：

[1] SKILLMAN J B，GARCIA M，VIRGO A，et al.Growth irradiance effects on photosynthesis and growth in two co-occurring shade-tolerant neotropical perennials of contrasting photosynthetic pathways[J]. American Journal of Botany，2005，92（11）：1811-1819.

[2] PERI P L，MOOT D J，JARVIS P，et al.Morphological， anatomical， and physiological changes of orchardgrass leaves grown under fluctuating light regimes[J]. American Society of Agronomy， 2007， 99：1502-1513.

[3] GRATANI L，COVONE F，LARCHER W. Leaf plasticity in response to light of three evergreen species of the Mediterranean maquis[J]. Trees，2006，20：549-558.

[4] 焦曉林，高微微.環(huán)境因子對(duì)藥用植物三萜皂苷合成影響的研究進(jìn)展[J].中草藥，2011，42（2）：398-402.

[5] 趙 棟，丁 青，肖 藝.敗醬草的研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，15（10）：76-78.

[6] 李 娜.白花敗醬草化學(xué)成份、抗炎作用以及總皂苷提取純化工藝研究[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2006.

[7] 朱加進(jìn).白花敗醬的綜合開(kāi)發(fā)及提取物對(duì)毒死蜱抑制吸收的作用研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2006.

[8] 李 霞.環(huán)境因子對(duì)黃檗幼苗生長(zhǎng)及主要藥用成分含量的影響[D].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2006.

[9] 金水虎，李根有，胡永旭.白花敗醬繁育技術(shù)初步研究[J].中國(guó)野生植物資源.2002，21（3）：52-53.

[10] 何禮軍，王珊崇，楊園園，等.三角梅在咸寧市生態(tài)適應(yīng)性研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，51（12）：2536-2538.

[11] 郝再彬，蒼 晶，徐 仲.植物生理實(shí)驗(yàn)[M].哈爾濱：哈爾濱工業(yè)大學(xué)出版社，2004.

[12] 張志良，翟偉菁.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京：高等教育出版社，2003.

[13] 萬(wàn)德光，裴 瑾，唐 遠(yuǎn)，等.分光光度法測(cè)定威靈仙中總皂苷的含量[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，30（3）：52-53.

[14] 黃澤元，王海濱，劉志偉，等.芝麻葉中總黃酮的最佳提取工藝研究[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2004，20（6）：201-204.

[15] 孟慶杰，王光全，董邵峰，等.桃葉片組織結(jié)構(gòu)特征與其抗旱性關(guān)系的研究[J].干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，2004，22（3）：124-126.

[16] 安翠香，楊世梅，紀(jì)海波，等.遮陰對(duì)甜瓜葉片光合特性的影響[J].西北植物學(xué)報(bào)，2012，32（2）：342-347.

[17] 張林青，周 青，肖程嶺，等.園林植物耐陰性研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（19）：4851-4853.

[18] 趙光偉，孫廣玉，閻秀峰，等.烤煙成熟時(shí)柵欄組織與海綿組織厚度比值的變化[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，46（2）：266-267.

[19] PANDEY S，KUSHWAHA R. Leaf anatomy and photosynthetic acclimation in Valeriana jatamansi L. grown under high and low irradiance[J]. Photosynthetica，2005，43（1）：85-90.

[20] 徐文燕，高微微，何春年，等.環(huán)境因子對(duì)植物黃酮類化合物生物合成的影響[J].世界科學(xué)技術(shù)，2006，8（6）：68-72.

2.6 遮陰對(duì)白花敗醬總黃酮及總皂苷含量的影響

由圖3和圖4可知，隨著遮陰程度的增大，白花敗醬總皂苷和總黃酮的含量均呈先減后增的趨勢(shì)，其中白花敗醬總皂苷含量55%全光照組與30%全光照組無(wú)顯著差異。全光照條件下白花敗醬總皂苷及總黃酮的含量均高于各遮陰處理組，且存在顯著差異。

3 結(jié)論與討論

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，夏季進(jìn)行遮陰處理是一種常用的方式。遮陰能通過(guò)減弱太陽(yáng)光的直射以降低環(huán)境溫度和增加土壤濕度。溫度的降低，能減少水分的蒸發(fā)，植物有了充足的水分供應(yīng)，通過(guò)蒸騰作用也能向環(huán)境中釋放一定的熱量，以降低植物體的溫度，并維持適宜的溫度和濕度，從而有利于植物度過(guò)夏季不良環(huán)境。因此，遮陰可以改變植物生長(zhǎng)的微環(huán)境，并通過(guò)多種因素綜合作用于植物體。

植物的葉作為光合作用的主要器官，其形態(tài)解剖特點(diǎn)在一定程度上能反映環(huán)境的狀況。如，孟慶杰等[15]研究了桃葉解剖結(jié)構(gòu)與其抗旱性的關(guān)系，結(jié)果表明桃葉厚、氣孔密度高，則抗旱性強(qiáng)。本試驗(yàn)中，全光照組處理的白花敗醬單葉厚度、柵欄組織厚度和氣孔密度均明顯高于遮陰處理，這可能是受高溫、強(qiáng)光、干旱的環(huán)境脅迫所致。而柵欄組織與海綿組織厚度的比值反映了柵欄組織占葉肉厚度的比重[18]，本試驗(yàn)中該值隨遮陰程度的增大而減小，說(shuō)明了柵欄組織在葉片中所占的比例逐漸減小，光合能力逐漸減弱。葉片的厚度取決于葉發(fā)育過(guò)程中的光照，成熟的葉片厚度則變化很小[19]。本試驗(yàn)中，白花敗醬海綿組織厚度先降低后升高，這可能由于遮陰條件下植物通過(guò)調(diào)整葉肉組織的分化，以適應(yīng)不同的光環(huán)境。強(qiáng)光下，既增加?xùn)艡诮M織的厚度又增加海綿組織的厚度，以增加?xùn)艡诮M織厚度為主。而弱光下柵欄組織厚度減小的同時(shí)又增加了海綿組織的厚度，以增加海綿組織厚度為主。

產(chǎn)量可衡量植物的生長(zhǎng)情況，是對(duì)環(huán)境響應(yīng)的一種體現(xiàn)。光照有利于光合作用的進(jìn)行，但由于強(qiáng)光及水分等限制，影響了植物的生長(zhǎng)發(fā)育，所以本試驗(yàn)中對(duì)照組單株產(chǎn)量較低。而當(dāng)光照不足時(shí)，植物生長(zhǎng)受阻，且對(duì)莖和根生物量的分配減少，使得發(fā)枝數(shù)減少，根系稀疏較淺，所以重度遮陰葉面積、單葉鮮重都較大，但整體生物量降低。總皂苷和總黃酮是白花敗醬重要的藥用成分，前人的研究表明，環(huán)境中光照、溫度、水分等因子對(duì)植物體三萜皂苷的合成有較大的影響[4]。研究表明紫外輻射、高光強(qiáng)、低溫、高CO2濃度、適度干旱以及合理的施肥等因素均可以促進(jìn)黃酮類成分的合成[20]。在夏季高溫、強(qiáng)光、干旱的綜合影響下，白花敗醬生長(zhǎng)遲緩，從而有利于藥用成分的積累。白花敗醬在野外常見(jiàn)于路邊、林緣等相對(duì)陰濕地段，且生長(zhǎng)良好。植物的自然分布及其生境條件在人工栽培上是可借鑒的。本研究表明中度遮陰下白花敗醬生長(zhǎng)良好，產(chǎn)量及藥用成分均較高。

參考文獻(xiàn)：

[1] SKILLMAN J B，GARCIA M，VIRGO A，et al.Growth irradiance effects on photosynthesis and growth in two co-occurring shade-tolerant neotropical perennials of contrasting photosynthetic pathways[J]. American Journal of Botany，2005，92（11）：1811-1819.

[2] PERI P L，MOOT D J，JARVIS P，et al.Morphological， anatomical， and physiological changes of orchardgrass leaves grown under fluctuating light regimes[J]. American Society of Agronomy， 2007， 99：1502-1513.

[3] GRATANI L，COVONE F，LARCHER W. Leaf plasticity in response to light of three evergreen species of the Mediterranean maquis[J]. Trees，2006，20：549-558.

[4] 焦曉林，高微微.環(huán)境因子對(duì)藥用植物三萜皂苷合成影響的研究進(jìn)展[J].中草藥，2011，42（2）：398-402.

[5] 趙 棟，丁 青，肖 藝.敗醬草的研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，15（10）：76-78.

[6] 李 娜.白花敗醬草化學(xué)成份、抗炎作用以及總皂苷提取純化工藝研究[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2006.

[7] 朱加進(jìn).白花敗醬的綜合開(kāi)發(fā)及提取物對(duì)毒死蜱抑制吸收的作用研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2006.

[8] 李 霞.環(huán)境因子對(duì)黃檗幼苗生長(zhǎng)及主要藥用成分含量的影響[D].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2006.

[9] 金水虎，李根有，胡永旭.白花敗醬繁育技術(shù)初步研究[J].中國(guó)野生植物資源.2002，21（3）：52-53.

[10] 何禮軍，王珊崇，楊園園，等.三角梅在咸寧市生態(tài)適應(yīng)性研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，51（12）：2536-2538.

[11] 郝再彬，蒼 晶，徐 仲.植物生理實(shí)驗(yàn)[M].哈爾濱：哈爾濱工業(yè)大學(xué)出版社，2004.

[12] 張志良，翟偉菁.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京：高等教育出版社，2003.

[13] 萬(wàn)德光，裴 瑾，唐 遠(yuǎn)，等.分光光度法測(cè)定威靈仙中總皂苷的含量[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，30（3）：52-53.

[14] 黃澤元，王海濱，劉志偉，等.芝麻葉中總黃酮的最佳提取工藝研究[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2004，20（6）：201-204.

[15] 孟慶杰，王光全，董邵峰，等.桃葉片組織結(jié)構(gòu)特征與其抗旱性關(guān)系的研究[J].干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，2004，22（3）：124-126.

[16] 安翠香，楊世梅，紀(jì)海波，等.遮陰對(duì)甜瓜葉片光合特性的影響[J].西北植物學(xué)報(bào)，2012，32（2）：342-347.

[17] 張林青，周 青，肖程嶺，等.園林植物耐陰性研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（19）：4851-4853.

[18] 趙光偉，孫廣玉，閻秀峰，等.烤煙成熟時(shí)柵欄組織與海綿組織厚度比值的變化[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，46（2）：266-267.

[19] PANDEY S，KUSHWAHA R. Leaf anatomy and photosynthetic acclimation in Valeriana jatamansi L. grown under high and low irradiance[J]. Photosynthetica，2005，43（1）：85-90.

[20] 徐文燕，高微微，何春年，等.環(huán)境因子對(duì)植物黃酮類化合物生物合成的影響[J].世界科學(xué)技術(shù)，2006，8（6）：68-72.