盧志權(quán) 謝一鳴 成光輝 李介華

TK1、CA199及CA724聯(lián)合檢測(cè)在結(jié)直腸癌中的診斷價(jià)值

盧志權(quán) 謝一鳴 成光輝 李介華

目的 探討血清胸苷激酶1(TK1)、糖類抗原199(CA199)、糖類抗原724(CA724)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)直腸癌診斷的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 采用電化學(xué)發(fā)光法對(duì)77例結(jié)直腸癌患者、61例結(jié)直腸良性病變患者和40例健康體檢者的血清CA199、CA724含量進(jìn)行檢測(cè), 采用免疫印跡-增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法對(duì)各組血清TK1含量進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果 結(jié)直腸癌組的TK1、CA199和CA724水平顯著高于結(jié)直腸良性病變組患者和正常對(duì)照組(P均＜0.05), 結(jié)直腸良性病變患者的血清TK1、CA199和CA724水平顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.05)。單項(xiàng)檢測(cè)TK1對(duì)結(jié)直腸癌診斷的敏感度、 特異度和準(zhǔn)確度分別為40.3%、75.4%、55.8%, CA199為44.2%、88.5%、63.8%, CA724為45.5%、77.0%、59.4%；聯(lián)合檢測(cè)TK1、CA199和CA724為64.9%、68.9%、65.9%。 結(jié)論 TK1、CA199和CA724水平對(duì)于結(jié)直腸癌的診斷、鑒別診斷具有重要的臨床價(jià)值, 三者聯(lián)合檢測(cè)可提高結(jié)直腸癌的檢出率。

結(jié)直腸腫瘤；胸苷激酶1；糖類抗原199；糖類抗原724；聯(lián)合檢測(cè)

結(jié)直腸癌(colorectal cancer, CRC)是常見的消化道惡性腫瘤, 在全球范圍內(nèi)為男性第3位、女性第2位高發(fā)性惡性腫瘤,每年新發(fā)約120萬(wàn)例, 死亡約60萬(wàn)例, 其進(jìn)展與疾病的診斷時(shí)機(jī)和分期相關(guān)［1,2］。在我國(guó), 結(jié)直腸癌發(fā)病率呈逐年升高趨勢(shì), 預(yù)計(jì)我國(guó)結(jié)直腸癌新發(fā)病例仍將逐年增多［3］。臨床早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療對(duì)提高患者生存質(zhì)量和生存率具有重要意義。目前, 臨床上結(jié)直腸癌的診斷主要依賴內(nèi)窺鏡活檢,但由于該技術(shù)難度、操作復(fù)雜性及患者痛苦性相對(duì)較大。因此, 如何發(fā)現(xiàn)或整合一些能夠早期發(fā)現(xiàn)和診斷結(jié)直腸癌的血液學(xué)指標(biāo)已經(jīng)成為全世界共同研究的課題。本研究對(duì)77例結(jié)直腸癌患者的血清TK1、CA199和CA724進(jìn)行了檢測(cè)分析,旨在了解三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)直腸癌的敏感性、特異性及早期診斷的價(jià)值。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 2012年7月～2013年9月本院收治的結(jié)直腸癌患者77例, 男43例, 女34例, 年齡38～88歲, 平均年齡62.3歲, 診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)衛(wèi)生部主編的中國(guó)常見惡性腫瘤診治規(guī)范［4］；結(jié)直腸良性病變患者61例, 其中男34例, 女27例, 年齡28～66歲, 平均年齡42.3歲。結(jié)直腸良性病變包括結(jié)直腸息肉、急性結(jié)腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、慢性結(jié)直腸炎等疾病, 上述全部病例的診斷均經(jīng)過(guò)臨床、內(nèi)鏡及病理學(xué)證實(shí)；選擇同期來(lái)本院體檢中心健康體檢人群40例, 其中男23例,女17例, 年齡27～66歲, 平均年齡42.1歲, 該組人群經(jīng)檢查無(wú)心、肝、腎、肺等重要器官疾病, 無(wú)傳染性疾病、炎性病變及貧血等, 無(wú)腫瘤家族史。

1. 2 標(biāo)本采集 TK1、CA199、CA724測(cè)定采用血清標(biāo)本,于清晨空腹采靜脈血3 ml, 3 h內(nèi)以3800 r/min離心8 min, 分離血清, 標(biāo)本要求無(wú)溶血、脂血, CA199、CA724當(dāng)天檢測(cè), TK1標(biāo)本-20℃保存, 在1周內(nèi)完成檢測(cè)。

1. 3 儀器、試劑與方法 TK1 采用免疫印跡增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法檢測(cè), 試劑盒及CIS 化學(xué)發(fā)光數(shù)字成像分析儀由深圳華瑞同康生物技術(shù)有限公司提供, 按說(shuō)明書操作。CA199、CA724采用電化學(xué)發(fā)光法, 儀器為羅氏E170電化學(xué)發(fā)光儀,試劑為其配套試劑。

1. 4 陽(yáng)性值判斷標(biāo)準(zhǔn) TK1＞2.0 pmol/L、CA19-9＞27.00 ng/ml、CA724＞6.90 ng/ml。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析, 檢測(cè)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 樣本間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 三組人群的血清TK1、CA199、CA724水平比較 結(jié)直腸癌患者血清TK1、CA199、CA724含量明顯高于結(jié)直腸良性病變組和正常對(duì)照組的水平, 結(jié)直腸良性病變組的血清TK1、CA199、CA724含量明顯高于正常對(duì)照組的水平, 兩兩組間比較, 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), 檢測(cè)結(jié)果見表1。

2. 2 血清TK1、CA199、CA724單項(xiàng)與聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)直腸癌診斷的敏感度、特異度和準(zhǔn)確度比較 CA724單項(xiàng)檢測(cè)對(duì)結(jié)直腸癌診斷的敏感度高于TK1和CA199, 單項(xiàng)檢測(cè)CA199對(duì)結(jié)直腸癌診斷的特異度高于TK1和CA724, 聯(lián)合檢測(cè)TK1、CA199、CA724對(duì)結(jié)直腸癌診斷的敏感度和準(zhǔn)確度均能提高,見表2。

表1 結(jié)直腸癌患者血清TK1、CA199、CA724檢測(cè)結(jié)果(±s)

表1 結(jié)直腸癌患者血清TK1、CA199、CA724檢測(cè)結(jié)果(±s)

注：與正常對(duì)照組比較, a, P＜0.05；與良性病變組比較, b, P＜0.05

組別例數(shù)TK1(pmol/L)CA199(U/ml)CA724(U/ml)結(jié)直腸癌組772.93±3.17ab152.63±329.08ab28.58±65.54ab良性病變組611.58±0.85a9.34±11.21a4.22±3.87a正常對(duì)照組400.83±0.262.60±1.131.72±0.79

表2 TK1、CA199、CA724單項(xiàng)及聯(lián)檢對(duì)結(jié)直腸癌的診斷性能評(píng)價(jià)(%)

3 討論

在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的早期, 由于病變隱匿, 病情難以發(fā)現(xiàn), 即使應(yīng)用影像學(xué)等技術(shù)檢測(cè)仍難以取得陽(yáng)性結(jié)果。近年來(lái), 血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)由于其高效、 無(wú)創(chuàng)的特點(diǎn), 在輔助診斷結(jié)直腸癌、評(píng)估病情等方面有著重要的作用, 在臨床中得到廣泛應(yīng)用。因此, 利用腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)來(lái)提高診斷腫瘤的敏感性和特異性在臨床中的應(yīng)用漸廣。聯(lián)檢多種腫瘤標(biāo)志物是提高大腸癌診斷準(zhǔn)確率的一種方法［5］。

胸苷激酶是嘧啶合成的補(bǔ)救酶, 是催化胸腺嘧啶核苷轉(zhuǎn)為單磷酸胸腺嘧啶的關(guān)鍵酶, 這種磷酸化作用是胸腺嘧啶核苷進(jìn)入DNA代謝的唯一途徑［6］。TK1在細(xì)胞周期的G1早中期水平低, 當(dāng)細(xì)胞周期進(jìn)入G1晚期, TK1開始持續(xù)升高, 在細(xì)胞周期S晚期G2期達(dá)到高峰, 但在靜止細(xì)胞中不會(huì)發(fā)生這種情況。TK1與細(xì)胞增殖生長(zhǎng)密切相關(guān), 可作為一種細(xì)胞增殖標(biāo)志物來(lái)檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性, 也可作為一種有效的腫瘤標(biāo)志物來(lái)檢測(cè)惡性腫瘤的增殖度及評(píng)估預(yù)后［7,8］。CA199結(jié)直腸細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì), 這種抗體可在消化道惡性腫瘤與胰腺癌中有明顯高水平表達(dá), 但也存在正常組織中如胰腺、膽囊等黏膜檢測(cè)表達(dá)水平呈現(xiàn)較高趨勢(shì), 是消化道惡性腫瘤檢測(cè)的良好指標(biāo)［9,10］。CA724是一種黏蛋白樣腫瘤相關(guān)糖蛋白, 其水平與腫瘤大小、分期及轉(zhuǎn)移有關(guān), 是胃腸道和卵巢腫瘤的標(biāo)志物［11］。

本實(shí)驗(yàn)表1結(jié)果顯示：結(jié)直腸癌患者的血清TK1、CA199、CA724水平明顯高于結(jié)直腸良性疾病患者和正常對(duì)照人群的血清含量, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.05), 說(shuō)明TK1、CA199、CA724都可作為結(jié)直腸癌診斷的腫瘤標(biāo)志物。表1也顯示了結(jié)直腸良性病變患者組的血清TK1、CA199、CA724水平明顯高于健康體檢人群的血清含量, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), 提示血清TK1、CA199、CA724濃度升高發(fā)出的信號(hào),可為結(jié)直腸癌病變患者的早期診斷提供可靠的依據(jù)。

腫瘤標(biāo)志物各有其生物學(xué)特性和病理學(xué)基礎(chǔ), 其血清水平能從不同角度反映腫瘤的變化, 所以聯(lián)合檢測(cè)多種標(biāo)志物可彌補(bǔ)單項(xiàng)檢測(cè)的不足, 有助于提高診斷的敏感度和特異度［12］。從本實(shí)驗(yàn)表2結(jié)果可知TK1、CA199、CA724單項(xiàng)檢測(cè)在結(jié)直腸癌中的敏感性均在50%以下, 但三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)敏感性達(dá)到64.9%；同時(shí)特異性也有68.9%, 準(zhǔn)確性達(dá)65.9%, 三者聯(lián)合檢測(cè)可以優(yōu)勢(shì)互補(bǔ), 提高結(jié)直腸癌的檢出率, 對(duì)結(jié)直腸癌的輔助診斷、療效監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷等有重要的臨床價(jià)值。

［1］ Jemnl A, Center MM, DeSantis C, et al. Global patterns of cancer Incidence and mortalily rates and trends. Cancer Epidemiol BiomarkersPrey, 2010, 19(8):1893-1907.

［2］ Cappellani A, Di Vita M, Zanghi A, et al. Biological and clinical markers in colorectal cancer: state of the art. Front Biosci(Schol Ed), 2010, 1(2):422-431.

［3］ 代珍, 鄭榮壽, 鄒小農(nóng), 等.中國(guó)結(jié)直腸癌發(fā)病趨勢(shì)分析和預(yù)測(cè).中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 46(7):598-603.

［4］ 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司.中國(guó)常見惡性腫瘤診治規(guī)范2010版.北京:北京醫(yī)科大學(xué)中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社, 2010:187-188.

［5］ 王影, 梁歡.血清CEA、CA199、CA242聯(lián)檢在大腸癌診斷中的臨床應(yīng)用.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2008, 18(7):1395-1360.

［6 ］ 郭林, 盧仁泉.胃癌患者血清胸苷激酶檢測(cè)的臨床意義.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué), 2008, 23(3):271-273.

［7］ Von Euler H, Einarsson R, Olsson U, et a1. Serum thymidine kinase activity in dogs with malignant lymphoma, a potent marker for prog-nosis and monitoring the disease.J Vet Int Me, 2004, 18(5):696-702.

［8］ Ohrvik A, Lindh M, Einarsson R, et a1. Sensitive nonradiometric method for determining thymidine kinase l activity. Clin Chem, 2004, 50(9):1597-1606.

［9］ Grothey A, A comparison of XELOX with FOLFO4 as firstline treatment for metastatic colorectal cancer. Nat Clin Pract Oncol, 2009, 6(1):10-11.

［10］ 莊珊珊, 陳炯玉, 方裕森, 等.血清CA199與CEA檢測(cè)對(duì)結(jié)直腸癌的診斷價(jià)值.現(xiàn)代腫瘤學(xué), 2010, 18(7):1395-1396.

［11］ 徐煒, 盧敏, 韓峰, 等.血清CA199、CA125、CA724、CEA聯(lián)合檢測(cè)診斷胃癌的價(jià)值.山東醫(yī)藥, 2009, 49(19):78.

［12］ 胡曉愛, 曹廣斌, 王衛(wèi).血清腫瘤標(biāo)志CEA和CA724聯(lián)合檢測(cè)在結(jié)直腸癌診斷中的應(yīng)用 .中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥, 2011, 14(6):54-55.

Clinical diagnostic value of combined detection of serum TK1, CAl99 and CA724 in colorectal cancer

LU Zhi-QUAN, XIE Yi-ming, CEHNG Guang-hui, et al. Department of Clinical Laboratory, Qingyuan Affiliated Hospital of Jinan University, Qingyuan 511518, China

Objective To investigate diagnostic value of combined detection of TK1, CA199 and CA724 in colorectal cancer. Methods Serum levels of CAl99 and CA724 in 77 patients with colorectal cancer, 61 patients with benign colorectal diseases and 40 healthy controls were measured by western blotting-enhanced chemiluminescence method, and serum levels of TK1 were measured by enzyme immune chemiluminescence dot-blot assay. Results Serum levels of CAl99 and CA724 in patients with colorectal cancer were significantly higher than those in patients with benign colorectal diseases and healthy controls(P＜0.05). And those patients with benign colorectal diseases were significantly higher than those in healthy controls(P＜0.05). The sensitivity, specificity and accuracy of TK1 for the diagnosis of colorectal cancer were 40.3%, 75.4% and 55.8%, respectively; those of CA199 were 44.2%, 88.5% and 63.8%, respectively; CA724 were 45.5%,77.0% and 59.4%, respectively; combined detection of TK1, CA199 and CA724 were 64.9%, 68.9% and 65.9%, respectively. Conclusion There are certain values of combined detection of TK1, CA199 and CA724 for the diagnosis of colorectal cancer, combined detection of TK1, CA199 and CA724 were helpful to increase the detection rate of colorectal cancer.

Colorectal neoplasms; Serum thymidine kinase 1; Carbohydrate antigen 199; Carbohydrate antigen 724; Combined detection

2014-03-12］

511518 暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬清遠(yuǎn)市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科