李 英，安慶寶，劉興林，陳德森

(1. 湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院，湖北 十堰 442000；2. 湖北醫(yī)藥學(xué)院，湖北 十堰 442000)

復(fù)方丹參滴丸是在現(xiàn)代高科技條件下提取丹參、三七的有效成分再加入適量冰片而制成的新型純中藥滴丸劑，其有效成分丹參素(Da)、原兒茶醛(Pra)和丹酚酸B(Sal B)及少量冰片，能擴張心腦血管、增加心臟供血、降低血管阻力、改善微循環(huán)、增加冠脈血流量、減少心肌耗氧量、改善心臟泵血功能[1]，有活血化瘀、理氣止痛功效。筆者對復(fù)方丹參滴丸對兔冠狀動脈的舒縮功能的影響進行了系統(tǒng)觀察，并初步分析其對兔冠狀動脈的舒縮功能的影響及其可能機制，旨在為其用于冠心病、心絞痛的治療提供進一步的實驗及理論依據(jù)。

1 實驗資料

1.1動物分組與造模 日本大耳白兔18只(由湖北省實驗動物研究中心提供)，雌雄兼用，體質(zhì)量(2.50±0.50)kg，編號，采用隨機數(shù)字表隨機分為模型組、硝苯地平組、復(fù)方丹參滴丸組。3組均參照文獻[2]行雙腎動脈夾閉術(shù)制備腎性高血壓模型。

1.2儀器及藥品 BL-420生物機能實驗系統(tǒng)(成都泰盟電子有限公司)；復(fù)方丹參滴丸(天津天士力制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字Z10950111，丸劑，每粒25 mg)；硝苯地平(江蘇方強制藥廠生產(chǎn)，批號：20111008)；去甲腎上腺素(NE，武漢遠(yuǎn)大制藥集團有限公司，批號080203)；Krebs-Henseleit(KH)營養(yǎng)液(自制)，用1 mol/L HCl調(diào)pH至7.4，通混合氣體(95%O2+5% CO2)。

1.3離體兔冠狀動脈的制備及記錄 兔擊頭處死，迅速打開胸腔，取出心臟分離出冠狀動脈，置95% O2和5%CO2混合氣體飽和的KH營養(yǎng)液(4 ℃)中，迅速去除血管周圍的結(jié)締組織，制成寬度為2～3 mm的動脈環(huán)將其懸掛于10 mL的浴槽中，一端固定在L形通氣鉤上，另一端與張力換能器相連，負(fù)荷2 g，浴槽中通入95% CO2+5% CO2混合氣體，浴槽溫度保持37 ℃,每10～15 min換液1次，平衡1 h后開始實驗，BL-420F生物實驗系統(tǒng)記錄實驗結(jié)果[3]。

1.4復(fù)方丹參滴丸對NE致兔冠狀動脈血管收縮張力的影響 3組兔冠狀動脈均給予2 g基礎(chǔ)張力平衡1 h后，以1×10-4mol/L NE 0.1 mL加入浴槽灌流離體高血壓兔冠狀動脈環(huán)，5 min后模型組加入4次0.1 mL雙蒸水；硝苯地平組累計加入1×10-6，1×10-5，1×10-4和1×10-3mol/L硝苯地平溶液各0.1 mL；復(fù)方丹參滴丸組累計加入1×10-6，1×10-5，1×10-4和1×10-3mol/L復(fù)方丹參滴丸液各0.1 mL,分別測定血管收縮張力值(g)并計算收縮張力降低百分率。

2 結(jié) 果

2.1復(fù)方丹參滴丸對NE致兔冠狀動脈收縮量效曲線的影響 模型組測定溶劑雙蒸水對NE引起的血管收縮的影響，實驗測得模型組的NE對內(nèi)源性鈣收縮張力為(1.76±0.14)g，復(fù)方丹參滴丸1×10-3和1×10-4mol/L兩濃度測定NE引起的外源性鈣收縮分別為(1.29±0.13)g和(0.91±0.11)g，與模型組(2.31±0.15)g比較有明顯差異(P均<0.01)。溶劑雙蒸水對NE引起的血管收縮無影響。見圖1。NE可劑量依賴性地引起免冠狀動脈環(huán)收縮，加入1×10-4mol/L復(fù)方丹參滴丸后，再以同樣的方式累加給予不同濃度的NE，可見NE的量效曲線均非平行右移，最大反應(yīng)壓低，說明復(fù)方丹參滴丸與NE呈非競爭性拮抗關(guān)系，可以使動脈環(huán)舒張。表明復(fù)方丹參滴丸有與硝苯地平相似的擴張兔冠狀動脈、增加冠脈血流量、降低心臟做功及降低血壓的效應(yīng)。

圖1 復(fù)方丹參滴丸對NE致兔冠狀動脈環(huán)收縮張力量效曲線的影響

2.2復(fù)方丹參滴丸對NE致兔冠狀動脈收縮張力的影響 模型組累計加入4次0.1 mL的雙蒸水，標(biāo)本張力4次降低值相對于基礎(chǔ)張力2 g，溶劑雙蒸水對NE引起的血管收縮幾無影響。硝苯地平組在加入NE后，累計加入1×10-6，1×10-5，1×10-4，1×10-3mol/L的硝苯地平，4次張力降低值比較變化非常顯著，與溶劑模型組比較有顯著性差異(P均<0.05)，說明硝苯地平可劑量依賴性地降低NE引起兔冠狀動脈收縮。復(fù)方丹參滴丸組在累計加入1×10-6，1×10-5，1×10-4，1×10-3mol/L的復(fù)方丹能滴丸，10-4mol/L與10-3mol/L之間可以劑量依賴性地抑制NE引起的冠脈環(huán)的收縮，與溶劑模型組比較有顯著性差異(P<0.05)，說明復(fù)方丹參滴丸可劑量依賴性地降低NE引起兔冠狀動脈收縮。各組標(biāo)本張力降低值見表1。各組標(biāo)本張力降低百分率見表2。

表1 各組不同濃度時標(biāo)本張力降低值比較

注：①與模型組比較，P<0.05。

表2 各組不同濃度時標(biāo)本張力降低百分率比較

注：①與模型組比較，P<0.05。

3 討 論

復(fù)方丹參滴丸主要的藥理作用是對心血管系統(tǒng)的作用。能明顯增加冠脈流量，降低動脈壓及冠脈阻力[4]。有研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)方丹參滴丸具有部分β2受體激動劑活性[5]。本研究觀察了復(fù)方丹參滴丸對腎性高血壓兔冠狀動脈的影響，旨在探討復(fù)方丹參滴丸更多活性成分的可能藥理作用和不良反應(yīng)及新的適應(yīng)證，為臨床該藥應(yīng)用提供進一步的理論和實驗依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示復(fù)方丹參滴丸可抑制NE引起的冠脈收縮，降低NE致兔冠狀動脈收縮張力百分率，說明復(fù)方丹參滴丸對NE有拮抗作用，可劑量依賴性地抑制NE對內(nèi)源性鈣釋放及外源性鈣內(nèi)流所引起的兔冠狀動脈環(huán)的收縮。復(fù)方丹參滴丸既可抑制兔冠狀動脈平滑肌細(xì)胞膜電壓依賴性和受體操性外鈣內(nèi)流，也可抑制受體操縱性細(xì)胞內(nèi)鈣庫釋放鈣。說明復(fù)方丹參滴丸擴張兔冠狀動脈的作用可能與其降低細(xì)胞內(nèi)鈣外流有關(guān)，但可能并不是其主要作用環(huán)節(jié)。有文獻報道，復(fù)方丹參滴丸可以減少Ca2+內(nèi)流，有Ca2+拮抗作用[6]；NE激活α1受體，促進細(xì)胞膜上的鈣通道開放并通過第二信使IP3的作用使細(xì)胞內(nèi)鈣釋放引起肌張力升高[7]。盡管兔冠狀動脈平滑肌細(xì)胞上交感縮血管纖維分布較少(其末梢釋放NE)，但無論何種原因引起的冠脈收縮都是通過增加平滑肌細(xì)胞內(nèi)的Ca2+來實現(xiàn)的[8]。故本研究以NE作為激動劑使兔冠狀動脈平滑肌收縮，以觀察藥物對血管平滑肌細(xì)胞電壓依賴性鈣通道和受體操縱鈣通道介導(dǎo)的外鈣內(nèi)流和內(nèi)鈣釋放的作用。因復(fù)方丹參滴丸是非肽類內(nèi)皮素受體拮抗劑，通過拮抗內(nèi)皮素的作用或者再加上增加血管內(nèi)皮細(xì)胞NO合成可能是其擴張冠脈、增加冠脈流量的主要原因。

綜上所述，復(fù)方丹參滴丸對腎性高血壓兔冠狀動脈具有擴張冠狀動脈作用，并可以劑量依賴性地抑制NE引起的收縮作用。其作用機制可能與其抑制平滑肌細(xì)胞電壓依賴性鈣通道和受體操縱鈣通道介導(dǎo)的外鈣內(nèi)流和內(nèi)鈣釋放，擴張兔冠狀動脈有關(guān)。

[參考文獻]

[1] 李俊枝. 復(fù)方丹參滴丸與黃芪注射液聯(lián)合治療糖尿病療效觀察[J]. 陜西醫(yī)學(xué)雜志，2002，31(12)：155

[2] 陳德森，李莉，郭俐宏，等. 腹主動脈狹窄致左室肥厚動物模型制備[J]. 山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2004，35(6)：627-628

[3] 陳德森，郭俐宏，李莉，等. 復(fù)方丹參滴丸對大鼠局灶性腦缺血再澆灌注損傷的影響[J]. 山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010，41(9)：780-781

[4] 王明江，馮桂香，張鵬，等. 側(cè)腦室內(nèi)注射丹參素對犬肺動脈壓的影響[J]. 鄖陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2000，19(4)：217-218

[5] Liao MH,Wu CC,Yen MH. Beneficial effects of tetramethylpyrazine,an active constituent of Chinest herbs, on rats with endotoxemia[J]. Proc Natl Sci Counc Repub China B,1998,22(1):46-54

[6] 魯春鶴，喬國芬，侯云龍，等. 丹參提取物對犬離體冠狀動脈環(huán)的作用及其機制[J]. 黑龍江醫(yī)學(xué)，2008，32(2)：121-122；125

[7] 杜先華，陳德森，王衛(wèi)民，等. 丹參注射液對活性氧誘導(dǎo)的平肌細(xì)胞增殖的影響[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2003，12(1)：13-15

[8] 朱怡，陳霞，黃屏，等. 丹參川芎嗪對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，20(7)：802-804