鄧鋒++林向華

[摘要] 目的 探索采用離子色譜法測(cè)定合成多肽藥物中醋酸的含量。 方法 以DIONEX IonPac AS19（4 mm×250 mm）為色譜柱，淋洗液為3.2 mmol/L的碳酸鈉和1.0 mmol/L碳酸氫鈉混合溶液，流速為0.8 ml/min，抑制電流為70 mA，電導(dǎo)檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果 醋酸含量在14.2～142.2 μg/ml范圍內(nèi)線性相關(guān)系數(shù)為0.9997，回收率在98.1%～100.7%，RSD為1.0%。 結(jié)論 離子色譜法簡(jiǎn)便快捷，結(jié)果準(zhǔn)確，可替代高效液相色譜法用于測(cè)定合成多肽藥物中醋酸的含量。

[關(guān)鍵詞] 離子色譜；合成多肽類藥物；醋酸

[中圖分類號(hào)] R927 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）08（a）-0056-03

Content of acetic acid in synthetic polypeptide drugs determined by ion chromatography

DENG Feng1 LIN Xiang-hua2

1.Food and Drug Control Institute in Guangdong Province，Guangzhou 510180，China；2.Sun Yat-Sen Memorial Hospital，Sun Yat-Sen University，Guangzhou 510120，China

[Abstract] Objective To explore the content of acetic acid in synthetic polypeptide drugs determined by ion chromatography. Methods Analytical column was DIONEX IonPac AS19 （4 mm×250 mm），the leacheate was a solution of 3.2 mmol/L sodium carbonate mixed with 1.0 mmol/L sodium bicarbonate，flow velocity was 0.8 ml per minute，the curb was 70 mA，and electrical conductivity detector was applied for determination. Results The linearly dependent coefficient was 0.9997 when the content of acetic acid ranged from 14.2 μg/ml to 142.2 μg/ml.The recovery rate was from 98.1% to 100.7% and percentage of relative standard deviation （RSD） was 1.0%. Conclusion Ion chromatography is simple，convenient and fast with accurate result，which can replace high performance liquid chromatography in determining the content of acetic acid from synthetic polypeptide drugs.

[Key words] Ion chromatography；Synthetic polypeptide drug；Acetic acid

《中國藥典》2010年版第一增補(bǔ)本二部附錄Ⅶ N合成多肽中醋酸測(cè)定法[1]以冰醋酸為對(duì)照品，采用高效液相色譜法，梯度洗脫30 min測(cè)定醋酸含量。操作過程中冰醋酸味道刺鼻，分析時(shí)間較長(zhǎng)。本文以醋酸鈉作為對(duì)照品，采用離子色譜法，嘗試以更簡(jiǎn)便安全的方法檢測(cè)多肽藥物中醋酸的含量。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

離子色譜法儀器為戴安（DIONEX）ICS1000，高效液相色譜儀為WATERS 2690/996，Mettler AE240電子天平，MILLIPORE 超純水儀。

三合水醋酸鈉（分析純，廣州化學(xué)試劑廠，批號(hào)20090401-2，99.0%），冰醋酸（分析純，廣州化學(xué)試劑廠，批號(hào)20101101-2，99.5%），碳酸氫鈉、碳酸鈉均為分析純。

樣品為2家不同企業(yè)生產(chǎn)的合成多肽類藥物醋酸曲普瑞林各1批。

1.2 溶液配制

1.2.1 對(duì)照品溶液 取三合水醋酸鈉適量，精密稱定，加水溶解并稀釋至約2500 μg/ml，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液；精密吸取適量，加水稀釋至約80 μg/ml。

1.2.2 樣品溶液 取樣品約100 mg，精密稱定，加水10 ml溶解。

1.3 色譜條件

3 討論

離子色譜是在離子交換色譜法的基礎(chǔ)上建立起來的一種離子分離分析液相色譜技術(shù)[2]，目前已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中發(fā)展最快的分析方法之一，被廣泛地用于無機(jī)陰陽離子和有機(jī)離子的測(cè)定，具有快速方便、靈敏度高、選擇性好、可同時(shí)分析多種離子化合物、分離柱的穩(wěn)定性好、容量高、樣品用量少、易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，在環(huán)境檢測(cè)[3-4]、食品[5]乃至藥品[6-7]及疫苗[8]等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。特別是《美國藥典》31版和《歐洲藥典》6.0版對(duì)妥布霉素等個(gè)氨基苷類抗生素品種應(yīng)用離子色譜法檢測(cè)，標(biāo)志著其作為法定檢驗(yàn)方法在藥品標(biāo)準(zhǔn)中收載和應(yīng)用?！吨袊幍洹?010年版附錄也新增了離子色譜法并用于測(cè)定帕米膦酸二鈉注射液含量[9]。endprint

合成多肽藥物多采用固相合成方法，出于工藝生產(chǎn)要求和需要，大部分多肽藥物以醋酸鹽形式存在[10]，醋酸作為合成多肽重要的質(zhì)量指標(biāo)在《中國藥典》2010年版二部附錄中專門對(duì)其測(cè)定作了規(guī)定，采用高效液相色譜方法，C18色譜柱，應(yīng)用有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，分析一個(gè)樣品需要約1 h。有研究采用離子色譜法，采用Ion-Pac AS14離子色譜柱測(cè)定鹽酸氨溴索中醋酸殘留量[11]，而采用Ion-Pac AS19離子色譜柱交換容量更高，適于復(fù)雜體系陰離子的分析[12]，無需采用有機(jī)溶劑，分離分析時(shí)間大為縮短，分析1個(gè)樣品僅為10 min，而且干擾較小，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確。此外，用醋酸鈉替代冰醋酸作為對(duì)照品，可以降低腐蝕氣體對(duì)人體的危害，同時(shí)保證結(jié)果準(zhǔn)確可靠。該方法可作為合成多肽類藥物醋酸含量指標(biāo)控制方法的重要補(bǔ)充。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（第一增補(bǔ)本）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：532.

[2] Small H，Stevens T，Baunann W.Novel ion exchange chromatographic method using conductimetric detection[J].Anal Chem，1975，47（11）：1801-1809.

[3] 孔瑾.簡(jiǎn)析離子色譜在飲用水監(jiān)測(cè)工作中的應(yīng)用[J].環(huán)境科學(xué)與管理，2012，7（2）：118-120.

[4] 王靜.離子色譜在大氣環(huán)境中的離線和在線應(yīng)用[J].環(huán)境化學(xué)，2011，30（11）：1970-1972.

[5] 劉向紅.離子色譜在食品分析中的應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2011，21（7）：1837-1840.

[6] 張培敏，周琰春，朱巖.離子色譜在制藥分析中的新進(jìn)展[J].藥物分析雜志，2007，27（1）：151-155.

[7] 劉英，李茜.離子色譜在抗生素藥物分析中的應(yīng)用[J].藥物分析雜志，2012，32（1）：179-185.

[8] 慕艷紅，王晶.離子色譜在多糖疫苗及多糖蛋白結(jié)合疫苗質(zhì)量控制中的應(yīng)用[J].微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展，2011，40（6）：78-82.

[9] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[10] Chan WC，White PD.Fmoc solid phase and peptide synthesis[M].Oxford：Oxford University Press，2000：6.

[11] 晏菊姣.離子色譜法測(cè)定鹽酸氨溴索中醋酸殘留量[J].中國藥品標(biāo)準(zhǔn)，2008，9（3）：203-205.

[12] 李國興，施青紅，朱巖.離子色譜固定相最新進(jìn)展[J].化學(xué)分析計(jì)量，2005，14（6）：58.

（收稿日期：2014-05-26 本文編輯：郭靜娟）endprint

合成多肽藥物多采用固相合成方法，出于工藝生產(chǎn)要求和需要，大部分多肽藥物以醋酸鹽形式存在[10]，醋酸作為合成多肽重要的質(zhì)量指標(biāo)在《中國藥典》2010年版二部附錄中專門對(duì)其測(cè)定作了規(guī)定，采用高效液相色譜方法，C18色譜柱，應(yīng)用有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，分析一個(gè)樣品需要約1 h。有研究采用離子色譜法，采用Ion-Pac AS14離子色譜柱測(cè)定鹽酸氨溴索中醋酸殘留量[11]，而采用Ion-Pac AS19離子色譜柱交換容量更高，適于復(fù)雜體系陰離子的分析[12]，無需采用有機(jī)溶劑，分離分析時(shí)間大為縮短，分析1個(gè)樣品僅為10 min，而且干擾較小，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確。此外，用醋酸鈉替代冰醋酸作為對(duì)照品，可以降低腐蝕氣體對(duì)人體的危害，同時(shí)保證結(jié)果準(zhǔn)確可靠。該方法可作為合成多肽類藥物醋酸含量指標(biāo)控制方法的重要補(bǔ)充。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（第一增補(bǔ)本）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：532.

[2] Small H，Stevens T，Baunann W.Novel ion exchange chromatographic method using conductimetric detection[J].Anal Chem，1975，47（11）：1801-1809.

[3] 孔瑾.簡(jiǎn)析離子色譜在飲用水監(jiān)測(cè)工作中的應(yīng)用[J].環(huán)境科學(xué)與管理，2012，7（2）：118-120.

[4] 王靜.離子色譜在大氣環(huán)境中的離線和在線應(yīng)用[J].環(huán)境化學(xué)，2011，30（11）：1970-1972.

[5] 劉向紅.離子色譜在食品分析中的應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2011，21（7）：1837-1840.

[6] 張培敏，周琰春，朱巖.離子色譜在制藥分析中的新進(jìn)展[J].藥物分析雜志，2007，27（1）：151-155.

[7] 劉英，李茜.離子色譜在抗生素藥物分析中的應(yīng)用[J].藥物分析雜志，2012，32（1）：179-185.

[8] 慕艷紅，王晶.離子色譜在多糖疫苗及多糖蛋白結(jié)合疫苗質(zhì)量控制中的應(yīng)用[J].微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展，2011，40（6）：78-82.

[9] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[10] Chan WC，White PD.Fmoc solid phase and peptide synthesis[M].Oxford：Oxford University Press，2000：6.

[11] 晏菊姣.離子色譜法測(cè)定鹽酸氨溴索中醋酸殘留量[J].中國藥品標(biāo)準(zhǔn)，2008，9（3）：203-205.

[12] 李國興，施青紅，朱巖.離子色譜固定相最新進(jìn)展[J].化學(xué)分析計(jì)量，2005，14（6）：58.

（收稿日期：2014-05-26 本文編輯：郭靜娟）endprint

合成多肽藥物多采用固相合成方法，出于工藝生產(chǎn)要求和需要，大部分多肽藥物以醋酸鹽形式存在[10]，醋酸作為合成多肽重要的質(zhì)量指標(biāo)在《中國藥典》2010年版二部附錄中專門對(duì)其測(cè)定作了規(guī)定，采用高效液相色譜方法，C18色譜柱，應(yīng)用有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，分析一個(gè)樣品需要約1 h。有研究采用離子色譜法，采用Ion-Pac AS14離子色譜柱測(cè)定鹽酸氨溴索中醋酸殘留量[11]，而采用Ion-Pac AS19離子色譜柱交換容量更高，適于復(fù)雜體系陰離子的分析[12]，無需采用有機(jī)溶劑，分離分析時(shí)間大為縮短，分析1個(gè)樣品僅為10 min，而且干擾較小，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確。此外，用醋酸鈉替代冰醋酸作為對(duì)照品，可以降低腐蝕氣體對(duì)人體的危害，同時(shí)保證結(jié)果準(zhǔn)確可靠。該方法可作為合成多肽類藥物醋酸含量指標(biāo)控制方法的重要補(bǔ)充。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（第一增補(bǔ)本）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：532.

[2] Small H，Stevens T，Baunann W.Novel ion exchange chromatographic method using conductimetric detection[J].Anal Chem，1975，47（11）：1801-1809.

[3] 孔瑾.簡(jiǎn)析離子色譜在飲用水監(jiān)測(cè)工作中的應(yīng)用[J].環(huán)境科學(xué)與管理，2012，7（2）：118-120.

[4] 王靜.離子色譜在大氣環(huán)境中的離線和在線應(yīng)用[J].環(huán)境化學(xué)，2011，30（11）：1970-1972.

[5] 劉向紅.離子色譜在食品分析中的應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2011，21（7）：1837-1840.

[6] 張培敏，周琰春，朱巖.離子色譜在制藥分析中的新進(jìn)展[J].藥物分析雜志，2007，27（1）：151-155.

[7] 劉英，李茜.離子色譜在抗生素藥物分析中的應(yīng)用[J].藥物分析雜志，2012，32（1）：179-185.

[8] 慕艷紅，王晶.離子色譜在多糖疫苗及多糖蛋白結(jié)合疫苗質(zhì)量控制中的應(yīng)用[J].微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展，2011，40（6）：78-82.

[9] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[10] Chan WC，White PD.Fmoc solid phase and peptide synthesis[M].Oxford：Oxford University Press，2000：6.

[11] 晏菊姣.離子色譜法測(cè)定鹽酸氨溴索中醋酸殘留量[J].中國藥品標(biāo)準(zhǔn)，2008，9（3）：203-205.

[12] 李國興，施青紅，朱巖.離子色譜固定相最新進(jìn)展[J].化學(xué)分析計(jì)量，2005，14（6）：58.

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