羅淑文，鄧遠輝，黎 雄，鄧金寶

(1.廣州中醫(yī)藥大學，廣州510407;2.廣東省中醫(yī)藥科學院，廣州510006)

香附是莎草科植物莎草(Cyperus rotundus L.)的干燥根莖，具有行氣解郁，調(diào)經(jīng)止痛的功效.根據(jù)現(xiàn)代藥理研究表明，香附具有解熱鎮(zhèn)痛、抑制子宮收縮、抑制腸管收縮、雌激素樣作用，此外還有抗炎、抗病原微生物、強心、減慢心率等多種藥理活性.其主要成分為揮發(fā)油，此外還有糖類、黃酮類、三萜類化合物、生物堿、蒽醌等［1-3］.為了更全面地了解其物質(zhì)基礎，從而進一步合理的開發(fā)利用這一中藥資源，我們開展了如下研究.

1 儀器與材料

1.1 儀器

Microfuge16臺微量離心機(美國BACKMAN COULTER公司);BüCHI C-660全自動餾分收器(瑞士 BüCHI公司);Waters 2695HPLC(Waters 2998 PDA檢測器，美國 Waters公司);Brucker ARX-500M超導核磁共振儀(TMS內(nèi)標，瑞士Bruck公司)，Thermo LTQ Orbitrap液質(zhì)聯(lián)用質(zhì)譜儀.

1.2 材料

香附(批號:100404791)，康美藥業(yè)股份有限公司，已根據(jù)2005《中華人民共和國版藥典》一部的相關(guān)內(nèi)容鑒定為莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根莖;硅膠GF254(青島海洋化工廠分廠)，硅膠柱色譜 (100～200目，青島海洋化工)，SephadexLH-20(美國Sigma公司);石油醚、二氯甲烷、冰醋酸、乙醇均為分析純.

2 提取與分離

取藥材粗粉，加95%乙醇回流提取3次，每次2 h，回收溶劑得浸膏.取浸膏加水混懸溶，分別用石油醚、二氯甲烷萃取，萃取液回收，得石油醚萃取浸膏、二氯甲烷萃取浸膏.

石油醚萃取層以硅膠柱色譜分離，采用中低壓柱色譜分離，石油醚:乙酸乙酯(100∶0→01)梯度洗脫，每550 mL收集1份，共收集洗脫液131份.經(jīng)TLC檢識，10%的硫酸乙醇溶液顯色后，將相同的餾分11-21合并.再經(jīng)反復硅膠分離純化得化合物1和化合物2.

二氯甲烷層萃取層以硅膠柱色譜分離，采用中低壓柱色譜分離，石油醚∶乙酸乙酯(100∶1→0∶1)梯度洗脫，約500 mL為一餾分，每個比例收集兩個柱體積.TLC分析后，將Fr.16-17合并.經(jīng)Sephadex LH-20以二氯甲烷:甲醇(1∶1)分離后的液16-17-6經(jīng)比較，為化合物2.合并液18～21經(jīng)Sephadex LH-20用二氯甲烷∶甲醇(1∶1)洗脫后，再經(jīng)薄層制備板制備，得2個化合物，經(jīng)鑒定，與從石油醚中分離得到的化合物相同.將合并液117～120經(jīng)凝膠Sephadex LH-20以二氯甲烷∶甲醇(1∶1)洗脫，再經(jīng)薄層制備板制備得到化合物3.

3 鑒定

化合物1:黃色油狀物，ESI-MS m/z 217［M-H］-，易溶于乙酸乙酯、二氯甲烷、石油醚，相對分子質(zhì)量218，分子式為C15H22O.

化合物2:黃色油狀物，易溶于石油醚、二氯甲烷.

化合物3:黃色油狀物，UV(MeOH)242 nm.

以上數(shù)據(jù)經(jīng)HSQC、HMBC等二維譜歸屬(見表1)，并與參考文獻［3］報道的oxyphyllenone B核磁數(shù)據(jù)比較，基本一致(見圖1)，只是碳譜中4，5位烯鍵，6位，7位手性碳化學位移相差較大(見圖2)，故推測化合物3應當為oxyphyllenone B的構(gòu)型異構(gòu)體，為未見文獻報道的新化合物，命名為oxyphyllenones C，但由于實驗條件及樣品量限制，沒有對其6，7位手性中心絕對構(gòu)型進行確認，只是確定了該化合物平面結(jié)構(gòu).

表1 化合物3的核磁數(shù)據(jù)

圖1 化合物1－3的結(jié)構(gòu)

4 討論

香附中較多的揮發(fā)性化學成分，這些成分與其體內(nèi)解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎藥效相關(guān).因此，對香附中含量較多的揮發(fā)油進行系統(tǒng)化學成分研究具有重要意義.

圖2 化合物3與oxyphyllenone B碳譜數(shù)據(jù)

本研究采用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜、薄層制備等分離技術(shù)，對山東產(chǎn)的香附95%乙醇提取物低極性部位化學成分進行了系統(tǒng)研究，共分離鑒定了3個成分，其中化合物3，我們通過SciFinder數(shù)據(jù)庫檢索，未見有文獻報道，是一種新化合物，但其手性碳構(gòu)型的確認及其生理活性仍有待進一步的研究.

［1］HAAKSMA A A，JANSEN B JM，GROAT A.Lewis Acid catalyzed Diels－Alder Reactions of S－(+)－Carvone with Silyloxy Dienes.Total Synthesis of(+)－ a－ Cyperone［J］.Temhedron，1992，48(15):3121－3130.

［2］XU Y，ZHANG H W，WAN X C，etal.Complete assignments of1H and13CNMR data for two new sesquiterpenes from Cyperus rotundus L［J］.Magn.Reson.Chem.，2009，47:527 －531.

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