傅金英，于勝男，徐萌萌，李瑞麗，杜 蕾

(河南中醫(yī)學院，鄭州 450003)

婦女絕經(jīng)后心腦血管病的危險性較絕經(jīng)前明顯增加［1］。動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)普遍存在內(nèi)皮功能障礙，是多種心腦血管疾病的共同病理基礎(chǔ)。內(nèi)皮功能障礙的主要原因是ET和NO平衡失調(diào)［2］。本實驗研究了坤安煎劑對去卵巢大鼠血清NO、ET-1含量的影響，以探討坤安煎劑對心血管的保護作用及其初步作用機理，為坤安煎劑在防治更年期心血管疾病的應用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物飼養(yǎng)環(huán)境與分組

選用SPF級雌性成年Wistar大鼠52只，體質(zhì)量(200±10)g，由山東魯抗實驗動物中心提供(動物質(zhì)量許可證號SCCXK(魯)20080002)。室溫20℃左右，濕度70%，通風、清潔，飼料、供水充足，環(huán)境安靜。實驗環(huán)境符合SPF級動物實驗室要求。

動物購進適應喂養(yǎng)1周后，按隨機數(shù)字表法分為4組?？瞻捉M不予任何處理;模型組摘除大鼠雙側(cè)卵巢，術(shù)后7 d給予生理鹽水灌胃，10 ml/kg/次，連續(xù)8周;中藥組摘除大鼠雙側(cè)卵巢，術(shù)后7 d給予中藥“坤安煎劑”灌胃，10 ml/kg/次，相當于成人等效劑量的6倍，連續(xù)8周;補佳樂組摘除大鼠雙側(cè)卵巢，術(shù)后7 d給予補佳樂生理鹽水混懸液(0.01 mg/ml)灌胃，10 ml/kg/次，相當于成人等效劑量的6倍，連續(xù)8周。

1.2 藥物與試劑

坤安煎劑組成:北沙參15 g，知母15 g，山茱萸15 g，黃柏12 g，枸杞20 g，黃芪30 g，地骨皮15 g，茯苓15 g，女貞子15 g，旱蓮草30 g，杜仲20 g，淫羊藿30 g，煅龍骨 30 g，煅牡蠣30 g，丹參30 g，酸棗仁 30 g。所用生藥飲片由河南省中醫(yī)藥研究院制劑室提供，按照本院制劑標準濃煎、過濾，所煎藥液濃縮至每毫升含生藥3.52 g，4℃冰箱保存?zhèn)溆?補佳樂片(戊酸雌二醇片)1 mg/片，法國Delpharm Lille SAS進口藥品(批號J20080036);鹽酸氯胺酮注射液2 ml:0.1g/支，由福建古田藥業(yè)有限公司生產(chǎn)(批號H35020148);注射用青霉素鈉80 U/支，由華北制藥股份有限公司生產(chǎn)(批號H13020657);生理鹽水500 ml/瓶，由河南太龍藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)(批號H41023506)。

1.3 標本采集與指標檢測

末次給藥24 h后稱取各大鼠體質(zhì)量。以10%水合氯醛麻醉后，腹主動脈取血5ml，離心出血清，儲存于低溫冰箱待測。檢測各大鼠血清內(nèi)皮素-1(ET-1)采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測，試劑盒來自伊萊瑞特生物技術(shù)有限公司;一氧化氮(NO)采用硝酸還原酶法檢測，試劑盒來自南京建成生物工程研究所。檢測方法按試劑盒說明書進行操作。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，組間比較采用單因素方差分析，所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(±s)表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

表1 各組大鼠血清NO、ET-1含量比較(±s)

表1 各組大鼠血清NO、ET-1含量比較(±s)

注:與空白組比較:＊＊P ＜0.01，*P ＜0.05;與模型組比較:#P ＜0.01，與補佳樂組比較:△P＜0.01

組 別 例數(shù) 血清NO(μmol/L)血清ET-1(pg/mL)空 白 組 10 42.75±2.87△ 55.31±1.89△模 型 組 10 17.54 ±2.52＊＊△ 75.14 ±0.83＊＊△中 藥 組 10 28.62 ±2.82＊＊#△ 66.95 ±4.70＊＊#△補 佳 樂 組 10 37.53 ±2.69＊＊# 58.55 ±3.81*#

表1顯示，與空白組比較，模型組大鼠血清NO顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);血清ET-1顯著升高(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計學意義。與模型組比較，中藥組和補佳樂組大鼠血清NO明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);血清ET-1下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。

3 討論

更年期是婦女一生中的重要時期，是婦女從生育期向老年期過渡的必經(jīng)時期［3］。隨著卵巢功能逐漸衰退，雌激素水平的下降，近期易導致潮熱、盜汗、心悸、抑郁、失眠等;遠期易致骨質(zhì)疏松、泌尿生殖道改變及心血管疾病發(fā)病率增加［4］?，F(xiàn)代研究關(guān)于更年期綜合征遠期并發(fā)癥的研究較少，而心血管疾病是危害絕經(jīng)后婦女身體健康的主要因素。故導師傅金英教授結(jié)合其多年的臨床經(jīng)驗自擬經(jīng)驗方坤安煎劑防治更年期綜合征，以補腎填精為主，藥用女貞子、旱蓮草、枸杞補益肝腎;淫羊藿、杜仲補腎助陽，以助陽中求陰;以北沙參、知母、地骨皮、黃柏養(yǎng)陰退熱;山萸肉、煅龍骨、煅牡蠣3味藥收斂固澀、鎮(zhèn)驚安神;黃芪、茯苓健脾益氣，補后天以滋養(yǎng)先天;丹參活血祛瘀，酸棗仁養(yǎng)心安神?？v觀全方，諸藥合用、標本兼治，共奏滋陰補腎、填精益髓之效。

NO是由血管內(nèi)皮細胞合成的一種酶催化的生物活性物質(zhì)，其前體是L-精氨酸，具有強力擴張血管、抑制血小板黏附和聚集［5］、白細胞的趨化激活、抑制血管平滑肌細胞的增殖移行、保護血管內(nèi)皮細胞、防止心肌細胞缺血的作用，是心血管系統(tǒng)的重要調(diào)節(jié)因子［6］。ET-1為主要的縮血管因子，是迄今所知最強的縮血管物質(zhì)，還可誘導血小板聚集，導致血栓形成，增加單核細胞遷移、促進平滑肌細胞增殖等作用［7］。ET通過激活鈣通道增加鈣離子內(nèi)流，促進血管平滑肌收縮。在內(nèi)皮損傷時其合成或釋放增加，并與血管平滑肌上的受體結(jié)合，增加血管緊張度而使血管收縮。ET和NO之間存在著相互促進、相互抑制的復雜關(guān)系，共同調(diào)節(jié)心肌、血管的舒縮狀態(tài)和平滑肌細胞的增殖情況，直接或間接地影響心功能［6］。臨床實驗表明，高血壓、動脈粥樣硬化、心絞痛、慢性心力衰竭、心肌病等心血管疾病常伴有NO、ET的異常，而NO、ET的異常又反過來加重心血管疾病，所以兩者之間有著密切關(guān)系的NO和ET是維持血管基礎(chǔ)張力的主要血管活性物質(zhì)［8］。

本實驗研究表明，坤安煎劑在影響血管內(nèi)皮功能方面可明顯升高模型大鼠血清NO含量，降低大鼠血清ET-1含量，說明坤安煎劑通過改善受損內(nèi)皮功能，調(diào)節(jié)血管活性物質(zhì)的分泌、釋放及不同活性物質(zhì)間的平衡，以調(diào)節(jié)血管緊張度增加局部血流量，恢復血管的自穩(wěn)態(tài)，有助于為臨床預防絕經(jīng)后心血管疾病提供理論依據(jù)。

［1］田文艷，武紅利，等.絕經(jīng)后婦女雌激素替代治療對缺血性腦血管病患者的預防及治療作用［J］.醫(yī)學研究與教育，2009，26(1):26-28.

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［8］謝夢洲，劉強，李紹芝，等.參芪心復康對心氣虛細胞模型ET和NOS基因表達的影響［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2004，11(10):870-871.