雷松波 池春梅 金其全 葉耀輝 王金寶 福建省寧德市農(nóng)業(yè)科學研究所 352000
太子參為石竹科植物孩兒參 [Pseud ostellaria heterophylla (Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.]的干燥塊根,其味甘、微苦,具有抗疲勞、抗氧化、抗應(yīng)激、降血糖、增強免疫等功效,常用于治療脾虛體倦、食欲不振、病后虛弱、氣血不足、自汗口渴、肺燥干咳等[1-2]。福建柘榮縣為太子參的原產(chǎn)地,其太子參產(chǎn)量占全國總產(chǎn)量的60%以上,2009年產(chǎn)量已達3 500 t[3-5],太子參的傳統(tǒng)入藥部位為根部,其莖葉則被丟棄,其中所含的大量太子參皂苷和多糖類物質(zhì)未能得到充分利用,尤為浪費。對太子參莖葉的開發(fā)和綜合利用對于福建太子參產(chǎn)業(yè)發(fā)展尤為重要。已有研究表明,太子參具有抗氧化和抗應(yīng)激的功效[6-9],但其在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用鮮見報道。因此,本課題通過研究太子參莖葉對斷乳仔豬抗氧化和抗應(yīng)激能力的影響,為擴大太子參莖葉在畜牧業(yè)上的應(yīng)用提供科學依據(jù)。
1.1 試驗材料 太子參莖葉采自柘榮縣富溪鎮(zhèn)富溪村,經(jīng)清洗,烘干,粉碎,過5號篩[10],各組配比添加后均制成顆粒性試驗飼糧。
丙二醛(MDA)試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)試劑盒、游離甲狀腺素(FT4)試劑盒、皮質(zhì)醇(Cortiso1)試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。
1.2 試驗方法
1.2.1 試驗動物及分組 選取胎次相近 (4~5胎)、日齡相同的杜-長-大斷乳仔豬共60頭,隨機分為4組,每組15頭,每5頭為一個重復。分別設(shè)為空白對照組、太子參莖葉低、中、高劑量組(基礎(chǔ)日糧中分別添加0.5%、1%和1.5%的太子參莖葉粉)。于仔豬斷乳后開始飼喂日糧,直到70日齡。試驗豬采取組內(nèi)群飼,自由采食飲水,日常管理與免疫程序按豬場常規(guī)進行。
1.2.2 血液采集 在第50日齡、第70日齡,各組每個重復隨機選取3頭仔豬空腹采血7~8 mL,3 000 r/min離心10 min,收集血清,分裝于eppendorf管,-20℃保存,待測。
1.2.3 抗氧化指標測定 谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性采用二硫代二硝基苯甲酸法;丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥法;總抗氧化能力(TAOC)采用化學比色法。具體步驟按試劑盒說明書進行。
1.2.4 抗應(yīng)激指標的測定 三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)度采用放射免疫分析法測定,皮質(zhì)醇(Cortiso1)采取ELISA雙抗體夾心法測定,試驗步驟按試劑盒說明書進行。
1.2.5 數(shù)據(jù)處理 所有數(shù)據(jù)用均值±標準差表示,采用SPSS11.5軟件進行數(shù)據(jù)處理與分析,LSD法比較顯著性。
2.1 斷乳仔豬血清抗氧化指標 由表1可知,50日齡時,太子參莖葉不同劑量組的MDA含量均顯著低于對照組(P<0.05),且中、高劑量組極顯著低于對照組 (P<0.01);太子參莖葉不同劑量組的GSH-Px活性數(shù)值上均高于對照組,但差異不顯著(P>0.05);太子參莖葉不同劑量組的SOD活性均顯著高于對照組(P<0.05),且高劑量組極顯著高于對照組(P<0.01)。70日齡時,太子參莖葉不同劑量組的MDA含量數(shù)值上均低于對照組,但差異不顯著(P>0.05);太子參莖葉不同劑量組的GSH-Px活性均顯著高于對照組(P<0.05),且中、高劑量組極顯著高于對照組(P<0.01);太子參莖葉不同劑量組的SOD活性均極顯著高于對照組(P<0.01)。
表1 太子參莖葉對斷乳仔豬血清抗氧化指標的影響
結(jié)果表明,太子參莖葉能提高斷乳仔豬血清中的GSH-Px和SOD活性,降低MDA含量,顯著改善斷乳仔豬的抗氧化能力。
2.2 斷乳仔豬血清抗應(yīng)激指標 由表2可知,50日齡時,太子參莖葉不同劑量組的T3含量均顯著高于對照組(P<0.05),且中、高劑量組極顯著高于對照組(P<0.01);T4 含量均顯著高于對照組(P<0.05),且高劑量組極顯著高于對照組(P<0.01);皮質(zhì)醇含量均顯著低于對照組(P<0.05),且中、高劑量組極顯著低于對照組(P<0.01)。70日齡時,太子參莖葉不同劑量組的T3含量均顯著高于對照組(P<0.05),且高劑量組極顯著高于對照組 (P<0.01);T4含量均顯著高于對照組(P<0.05),且中、高劑量組極顯著高于對照組(P<0.01);低劑量組皮質(zhì)醇含量與對照組差異不顯著(P>0.05),中、高劑量組顯著低于對照組(P<0.05)。
表2 太子參莖葉對斷乳仔豬血清抗應(yīng)激指標的影響
結(jié)果表明,太子參莖葉能提高斷乳仔豬血清中T3、T4含量,降低皮質(zhì)醇含量,顯著改善斷乳仔豬的抗應(yīng)激能力。
3.1 太子參莖葉能顯著提高斷乳仔豬抗氧化能力動物在正常生理狀態(tài)下,體內(nèi)活性氧的產(chǎn)生和清除處于動態(tài)平衡,但是在集約化飼養(yǎng)條件下,許多外源性或內(nèi)源性刺激均可使體內(nèi)氧化還原狀態(tài)失去平衡,使機體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。氧化應(yīng)激主要表現(xiàn)為活性氧自由基(ROS)生成過量,產(chǎn)生細胞毒性效應(yīng)[11]。SOD主要功能是清除體內(nèi)有氧代謝所產(chǎn)生的超氧自由基[12],GSH-Px是機體存在一種重要的過氧化氫和過氧化物的分解酶,使有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物[13],MDA是氧自由基與生物膜多不飽和脂肪酸發(fā)生氧化應(yīng)激的產(chǎn)物,它產(chǎn)生的量與氧化應(yīng)激的程度相平行,故檢測MDA可反映氧自由基的水平及氧化應(yīng)激反應(yīng)的程度[14]。研究表明,多種中藥多糖對豬的氧化應(yīng)激都有較好的干預(yù)作用[15-17],而太子參莖葉的主要有效成分也是多糖類,本試驗結(jié)果表明,太子參莖葉能提高斷乳仔豬血清中的GSH-Px和SOD活性,降低MDA含量,具有較好的抗氧化功效。
3.2 太子參莖葉能顯著提高斷乳仔豬抗應(yīng)激能力在集約化養(yǎng)殖場,由于飼養(yǎng)密度高,豬只健康對環(huán)境的依賴性很大,易產(chǎn)生環(huán)境應(yīng)激綜合征,同時影響畜產(chǎn)品質(zhì)量[18]。應(yīng)激會影響機體甲狀腺、腎上腺中調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝激素分泌量的改變,從而引起機體糖類、脂類和蛋白質(zhì)的代謝活動的變化,以適應(yīng)變化著的外環(huán)境。機體抗應(yīng)激的主要中樞是下丘腦,由其分泌產(chǎn)生的皮質(zhì)醇能夠調(diào)節(jié)應(yīng)激引起的消化道功能改變,促進糖異生,適度和短時的增高能夠幫助機體抵抗應(yīng)激,但是高濃度和長時間的作用則會產(chǎn)生全身抑制[19]。甲狀腺素是廣泛參與調(diào)節(jié)機體代謝的激素,其中T3的生理效價比T4大2~4倍,甲狀腺素水平升高可在一定程度上促進細胞分化和組織器官發(fā)育,抵抗應(yīng)激逆境[20]。本試驗結(jié)果表明,太子參莖葉能提高斷乳仔豬血清中T3、T4含量,減少應(yīng)激對生長發(fā)育造成的不利影響,同時降低皮質(zhì)醇含量,緩解皮質(zhì)醇分泌導致的全身抑制,從而改善斷乳仔豬的抗應(yīng)激能力。
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