栗 敏, 李 杰,王盼盼
(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所,黑龍江哈爾濱150030)
代謝有機(jī)酸有別于酸化劑,其主要是通過參與調(diào)節(jié)機(jī)體的生命活動(dòng),發(fā)揮其特殊的生化作用,進(jìn)而影響機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育,且主要為短鏈有機(jī)酸。Nordgren等(2006)研究表明,給禁食仔豬靜脈灌輸α-酮戊二酸能使動(dòng)脈中支鏈氨基酸和谷氨酸水平增加,并能緩解禁食引起的體重降低。洪平等(2010)研究顯示,運(yùn)動(dòng)員在系統(tǒng)訓(xùn)練中服用丙酮酸肌酸可以明顯減少機(jī)體脂肪含量,且能明顯增加肌肉重量和去脂體重。本試驗(yàn)旨在研究不同水平代謝有機(jī)酸對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能和部分血清生化指標(biāo)的影響,進(jìn)而確定生長(zhǎng)育肥豬日糧代謝有機(jī)酸的適宜添加水平,同時(shí)為代謝有機(jī)酸作為飼料添加劑的開發(fā)應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)所用代謝有機(jī)酸產(chǎn)品由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所飼料資源研究室開發(fā)研制。該產(chǎn)品在發(fā)酵的基礎(chǔ)上,添加了部分代謝有機(jī)酸,主要為丙酮酸、α-酮戊二酸和檸檬酸等,且成品中代謝有機(jī)酸含量為20%。
1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),選用 144 頭平均體重為(19.83±1.10)kg 的長(zhǎng)×大二元雜交健康豬,隨機(jī)分為4組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)12頭豬,且公母各半。A組為對(duì)照組,飼喂基礎(chǔ)日糧,B、C、D組為試驗(yàn)組,分別在基礎(chǔ)日糧中添加3.75‰、5.00‰、6.25‰代謝有機(jī)酸產(chǎn)品。試驗(yàn)在哈爾濱成農(nóng)遠(yuǎn)大養(yǎng)殖有限公司進(jìn)行,自由采食和飲水,驅(qū)蟲、消毒和免疫均按該公司常規(guī)管理進(jìn)行。預(yù)飼期5 d,試驗(yàn)期105 d。
1.3 試驗(yàn)日糧 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參照我國(guó)《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》配制,預(yù)飼期和試驗(yàn)前兩周飼喂飼料A,之后飼喂飼料B,且均為干粉料。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平
1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法
1.4.1 生產(chǎn)性能 于試驗(yàn)第1、36、76、106天早晨8∶00空腹稱重,并以重復(fù)為單位統(tǒng)計(jì)各階段的耗料量,計(jì)算各階段各組的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
1.4.2 血清指標(biāo) 飼養(yǎng)試驗(yàn)?zāi)?,于每個(gè)重復(fù)中挑選接近平均體重的健康豬公母各1頭,空腹進(jìn)行前腔靜脈采血。每頭采血10 mL,先置于37℃的水浴鍋中靜置30 min,之后在3500 r/min下離心15 min,制備血清。采用貝克曼庫(kù)爾特UniCel DxC 800 Synchron全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清總蛋白(TP)、尿素氮(BUN)、總膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量以及血清乳酸脫氫酶(LDH)、淀粉酶(AMY)和堿性磷酸酶(ALP)活性。
1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,并采用LSD法進(jìn)行多重比較,P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著,結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。
2.1 代謝有機(jī)酸水平對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知,在試驗(yàn)1~35 d和35~75 d兩階段,各組間的平均日增重均無顯著差異(P>0.05);隨代謝有機(jī)酸添加水平的提高,平均日采食量有增加趨勢(shì),但各組間差異不顯著 (P>0.05)。 試驗(yàn) 75~ 105 d,B、C、D 組的平均日增重分別比對(duì)照組提高7.51%(P>0.05)、19.27%(P<0.05)和 22.48%(P < 0.01),且 D 組的平均日增重比B組提高13.92%(P<0.05);C﹑D組的平均日采食量分別比對(duì)照組和B組提高11.51%(P<0.01)、15.17%(P < 0.01) 和 12.08%(P < 0.01)、15.76%(P<0.01),其他各組均無顯著差異(P>0.05)。從全期來看,B、C、D組的平均日增重分別比 對(duì) 照 組 提 高 3.36%(P > 0.05)、4.27%(P >0.05) 和 11.59%(P < 0.01);B、C、D 組的平均日采食量分別比對(duì)照組提高 1.16%(P>0.05)、8.69%(P < 0.05)和 10.29%(P < 0.05),且 D 組的平均日采食量比B組提高9.03%(P<0.05)。此外,D組的末重比 A、B、C組分別提高了8.89%(P < 0.01)、5.88%(P < 0.05) 和 5.63%(P<0.05),不同水平代謝有機(jī)酸對(duì)料重比無顯著影響(P > 0.05)。
2.2 代謝有機(jī)酸水平對(duì)生長(zhǎng)育肥豬部分血清生化指標(biāo)的影響 由表3可知,各組血清高密度脂蛋白含量呈依次增加的趨勢(shì),且D組含量較對(duì)照組提高30.86%(P<0.05),其他各組間差異不顯著(P>0.05)。隨日糧代謝有機(jī)酸添加水平的提高,血清總蛋白含量、血清淀粉酶和堿性磷酸酶活性均呈增加趨勢(shì);血清尿素氮、總膽固醇和甘油三酯含量均呈降低趨勢(shì),但各組間均無顯著差異(P>0.05)。不同水平代謝有機(jī)酸對(duì)各組血清乳酸脫氫酶活性和低密度脂蛋白含量均無顯著影響(P > 0.05)。
表2 代謝有機(jī)酸水平對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響
表3 代謝有機(jī)酸水平對(duì)生長(zhǎng)育肥豬部分血清生化指標(biāo)的影響
3.1 代謝有機(jī)酸水平對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響 郭俊武等(2012)研究表明,基礎(chǔ)日糧中添加0.4%檸檬酸可提高肉雞的體增重,降低料肉比,提高成活率。胡泉舟(2008)報(bào)道,日糧中添加1%的α-酮戊二酸可在一定程度上提高斷奶仔豬的平均日采食量和平均日增重,降低飼料增重比。劉堅(jiān)等(2009)研究顯示,日糧中添加1%的α-酮戊二酸可以顯著提高斷奶仔豬的日增重,降低飼料增重比。本試驗(yàn)結(jié)果也表明,代謝有機(jī)酸可促進(jìn)生長(zhǎng)育肥豬全期的平均日采食和平均日增重,且6.25‰組促進(jìn)效果均優(yōu)于其他各組。這可能是因?yàn)椋海?)部分代謝有機(jī)酸具有獨(dú)特的芳香味,可以改善日糧的適口性,提高采食量。(2)部分代謝有機(jī)酸可作為腸上皮細(xì)胞的一種選擇性代謝燃料,維護(hù)腸黏膜形態(tài)和功能的完整性,改善腸道消化吸收功能(Hou 等,2010)。 (3)部分代謝有機(jī)酸通過轉(zhuǎn)氨基作用或其他代謝途徑參與蛋白質(zhì)代謝,促進(jìn)蛋白質(zhì)合成,抑制蛋白質(zhì)分解 (Riedel等,1996)。此外,本試驗(yàn)結(jié)果顯示,適宜水平代謝有機(jī)酸對(duì)試驗(yàn)1~35 d和35~75 d生長(zhǎng)育肥豬的采食和增重?zé)o顯著影響,而在試驗(yàn)75~105 d呈顯著的促進(jìn)效果。申慧芳等(2005)研究也表明,日糧添加0.3%檸檬酸對(duì)三黃雞1周齡的體增重并無顯著影響,但可顯著提高其2~6周齡各周的體增重。這可能是因?yàn)榇x有機(jī)酸對(duì)家畜的作用需要一個(gè)緩慢積累的過程,因此,關(guān)于代謝有機(jī)酸對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響,尤其是對(duì)不同時(shí)期生長(zhǎng)性能的影響有待進(jìn)一步研究。
3.2 代謝有機(jī)酸水平對(duì)生長(zhǎng)育肥豬部分血清生化指標(biāo)的影響 血清生化指標(biāo)可以反映機(jī)體各組織器官的功能和營(yíng)養(yǎng)代謝狀況,從而間接反映動(dòng)物的生長(zhǎng)性能(劉輝等,2013)。淀粉酶和堿性磷酸酶是動(dòng)物體內(nèi)消化代謝的關(guān)鍵酶。血清淀粉酶主要來自胰腺和唾液腺,其參與和調(diào)節(jié)著體內(nèi)的糖代謝,其活性的高低可在一定程度上反應(yīng)糖代謝的速率。血清堿性磷酸酶主要來自肝臟和成骨細(xì)胞,其活性高低可反映體內(nèi)脂代謝的強(qiáng)弱。易國(guó)華等(1999)報(bào)道,長(zhǎng)×大二元雜交豬血清堿性磷酸酶和淀粉酶活性與日增重均呈顯著的正相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,隨著代謝有機(jī)酸添加水平的提高,血清淀粉酶和堿性磷酸酶呈增加趨勢(shì),且6.25‰組活性最高,這進(jìn)一步表明日糧添加適宜水平的代謝有機(jī)酸可提高生長(zhǎng)育肥豬的生長(zhǎng)性能。
血清總蛋白和尿素氮含量與體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝密切相關(guān)。劉衛(wèi)東等(2011)研究報(bào)道,血清總蛋白含量是機(jī)體蛋白質(zhì)合成代謝強(qiáng)弱的風(fēng)向標(biāo),當(dāng)濃度升高時(shí),可促使其與組織蛋白形成的動(dòng)態(tài)平衡向組織蛋白沉積的方向移動(dòng),使蛋白的沉積量增加,進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物體的生長(zhǎng)發(fā)育。血清尿素氮是蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的終產(chǎn)物,可以準(zhǔn)確地反映動(dòng)物機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況,較低的血清尿素氮水平反映機(jī)體蛋白質(zhì)合成率較高(扶國(guó)才等,2009)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,適宜水平的代謝有機(jī)酸可在一定程度上促進(jìn)生長(zhǎng)育肥豬血清總蛋白含量升高和尿素氮含量降低。這表明代謝有機(jī)酸在一定程度上提高了生長(zhǎng)育肥豬體內(nèi)非蛋白氮的利用率,促進(jìn)了體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成代謝,使血清總蛋白含量增多和組織蛋白沉積增加,進(jìn)而促進(jìn)了生長(zhǎng)育肥豬的生長(zhǎng)發(fā)育。
血清總膽固醇和甘油三酯含量是衡量體內(nèi)脂類代謝強(qiáng)弱的重要指標(biāo)。尹靖東等(2000)研究報(bào)道,脂肪組織發(fā)育和脂肪沉積取決于血漿中的甘油三酯水平。血清高密度脂蛋白和低密度脂蛋白與體內(nèi)脂類的轉(zhuǎn)運(yùn)密切相關(guān),現(xiàn)已證實(shí),低密度脂蛋白是組織轉(zhuǎn)運(yùn)肝臟合成內(nèi)源性膽固醇的主要形式;高密度脂蛋白與之相反,負(fù)責(zé)把膽固醇運(yùn)回肝臟代謝轉(zhuǎn)變而清除體外,因此有血液清掃機(jī)之稱。Cortez等(1991)研究發(fā)現(xiàn),補(bǔ)充丙酮酸可明顯降低肥胖Zucker大鼠血漿中的甘油三酯水平。王曼等(2011)研究表明,日糧中添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的丙酮酸肌酸可顯著降低肉雞腹脂率及肝臟和血清中甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇含量。本試驗(yàn)結(jié)果也顯示,日糧添加6.25‰代謝有機(jī)酸產(chǎn)品可在一定程度降低生長(zhǎng)育肥豬血清膽固醇和甘油三酯含量,顯著提高血清高密度脂蛋白含量。這表明日糧添加適宜水平的代謝有機(jī)酸可促進(jìn)生長(zhǎng)育肥豬體內(nèi)脂類的分解代謝及轉(zhuǎn)運(yùn),一定程度上加速體內(nèi)脂肪的消耗,減少體脂的沉積。其原因可能是日糧添加代謝有機(jī)酸使生長(zhǎng)育肥豬外源供給的丙酮酸含量增加,避免了糖酵解過程中關(guān)鍵酶對(duì)丙酮酸生成的限速作用,增強(qiáng)丙酮酸脫氫酶復(fù)合體活性,加快丙酮酸向NADH和乙酰輔酶A的轉(zhuǎn)化,使三羧酸循環(huán)得以不斷地進(jìn)行,進(jìn)而使機(jī)體能量消耗增加,脂肪動(dòng)員加強(qiáng)(de Groot等,1995)。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧添加6.25‰代謝有機(jī)酸可顯著提高生長(zhǎng)育肥豬的生長(zhǎng)性能,且能在一定程度上改善其蛋白質(zhì)和脂類代謝。綜合各項(xiàng)測(cè)定指標(biāo),本試驗(yàn)條件下生長(zhǎng)育肥豬日糧中代謝有機(jī)酸產(chǎn)品的適宜添加量為6.25‰。
[1]扶國(guó)才,賀生中,羅有文,等.低聚木糖對(duì)生長(zhǎng)豬免疫功能和血液生化指標(biāo)的影響[J]揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版),2009,30(3):50 ~ 53.
[2]郭俊武,陶弼菲,陳玉洪,等.日糧中添加檸檬酸對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能及鈣磷代謝的影響[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊,2012,4:25 ~ 26.
[3]洪平,李稚,陳耿,等.補(bǔ)充丙酮酸肌酸,肌酸和肉堿對(duì)運(yùn)動(dòng)員身體成分及運(yùn)動(dòng)能力的影響[J].中國(guó)體育科技,2010,46(3):91 ~ 97.
[4]胡泉舟.α-酮戊二酸對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和腸道功能的影響:[碩士學(xué)位論文][D].武漢:武漢工業(yè)學(xué)院,2008.
[5]劉輝,季海峰,張董燕,等.飼糧添加短乳桿菌對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能和血清生化指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(1):182 ~ 189.
[6]劉堅(jiān),侯永清,丁斌鷹,等.α-酮戊二酸對(duì)脂多糖應(yīng)激斷奶仔豬生長(zhǎng)抑制的緩解作用[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2009,21(4):519 ~ 524.
[7]劉衛(wèi)東,王章存,程璞,等.大米蛋白肽對(duì)育成豬生產(chǎn)性能、養(yǎng)分代謝和血液生化指標(biāo)的影響[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2011,26(7):72 ~ 75.
[8]申慧芳,韓垂旺,杜炳旺.檸檬酸對(duì)三黃土雞早期生產(chǎn)性能的影響[J].中國(guó)家禽,2005,27(16):14 ~ 15.
[9]王曼,陳娟,孔一力,等.丙酮酸肌酸對(duì)肉雞脂肪代謝和蛋白質(zhì)代謝的影響[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2011,34(1):89 ~ 94.
[10]易國(guó)華,柳小春,施啟順,等.豬的血漿酶活性和蛋白(酶)型與日增重的關(guān)系研究[J].中國(guó)畜牧雜志,1999,35(3):31 ~ 32.
[11]尹靖東,齊廣海,霍啟光.家禽脂類代謝調(diào)控機(jī)理的研究進(jìn)展[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2000,12(2):1 ~ 7.
[12]Cortez M Y,Torgan C E,Brozinick J T,et al.Effects of pyruvate and dihydroxyacetone consumption on the growth and metabolic state of obese Zucker rats[J].Am J Clin Nutr,1991,53(4):847 ~ 853.
[13]de Groot M J,Van Helden M A,de Jong Y F,et al.The influence of lactate,pyruvate and glucose as exogenous substrates on free radical defense mechanisms in isolated rat hearts during ischaemia and reperfusion[J].Mol Cell Biochem,1995,146(2):147 ~ 155.
[14] Hou Y Q,Wang L,Ding B,et al.Dietary α -ketoglutarate supplementation ameliorates intestinal injury in lipopolysaccharide-challenged piglets[J].Amino Acids,2010,39:555 ~ 564.
[15]Nordgren A,Karlsson T,Wiklund L.Ammonium chloride and α -ketoglutaric acid increase glutamine availability in the early phase of induced acute metabolic acidosis[J].Acta Anaest hesiologica Scandinavica,2006,50(7):840~847.
[16]RiedelE,NündelM,HamplH.α -Ketoglutarate application in hemodialysis patients improves amino acid metabolism[J].Nephron,1996,74(2):261 ~ 265.