白少偉 徐媛 龐文生 胡娟

【摘要】目的：研究液態(tài)保健品中總多糖含量測定方法。方法：采用醇沉法，分離樣品中的總多糖;以無水D-葡萄糖為標準品，采用苯酚-硫酸法檢測總多糖含量。結(jié)果：回歸方程y=00209x + 00199，r = 09991;線性范圍10～50μg/ml，測得樣品含量均值369mg/100ml。結(jié)論：醇沉提取方法和苯酚-硫酸顯色的含量測定方法操作簡便易行，可作為該配方質(zhì)量的檢測方法。

【關(guān)鍵詞】保健品;總多糖;含量

【中圖分類號】R286【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2014）07-0026-01

Abstract：

Keywords：

以藥食兩用、保健中藥為原料研制保健食品，配方中原料藥的主要成分包括皂苷和多糖等多種化合物，多糖不僅是一類非特異性免疫增強劑而且有降血糖、降血脂、降血清過氧化脂質(zhì)和降低膽固醇濃度、抗血凝、抗癌等作用[1]。總多糖通常作為增強免疫力、抗疲勞的功能性指標成分[2]。本文利用多糖溶于水，不溶于醇的特點，將樣品中多糖經(jīng)乙醇沉淀分離后，以D-葡萄糖為標準，通過苯酚-硫酸法測定其含量[3]。

1儀器與試劑

UV-1800紫外可見分光光度計（上海美譜達儀器有限公司），數(shù)顯恒溫水浴鍋，臺式離心機。D-無水葡萄糖（中國藥品生物制品鑒定所），濃硫酸、苯酚、無水乙醇等試劑均為分析純;水為超純水。

2方法與結(jié)果

21試樣處理精密吸取50ml樣品于50ml離心管中，加適量無水乙醇，混勻，使樣品中乙醇的終濃度為90%，4℃靜置1h，于4000r/min離心10min，棄去上清液。這樣分多次收集沉淀。沉淀物用適量乙醇洗滌至無色。以4000r/min離心10min，棄去上清液，沉淀加熱除去乙醇，用水溶解，定容于100ml容量瓶中，搖勻，作為供試溶液。

22標準曲線的制備精密稱取干燥恒重的無水葡萄糖對照品10mg，加水溶解，定容到10ml，得10mg/ml的葡萄糖對照品貯備液。精密吸取對照品貯備液02、03、04、05、06、08ml，置10ml具塞試管中，分別向各管內(nèi)加水使至體積為20ml，再依次向各試管加5%苯酚溶液10ml，搖勻，依次迅速加入濃硫酸50ml，搖勻;以水作為空白，于分光光度計490nm波長處測定吸光度，以葡萄糖濃度（mg/ml）為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線?；貧w方程y=00209x + 00199，r=09991。

23樣品測定精密吸取供試溶液20ml，置于具塞試管中，按“22項”方法測定吸光度，計算供試溶液濃度。

24計算

X=C×V×100M×100

式中X-樣品中總多糖含量以無水葡萄糖計，g/100ml;C-由回歸方程計算得供試溶液濃度，mg/ml;V-供試溶液定容體積，ml;M-樣品取樣體積，ml。

表1多糖含量測定結(jié)果

序號吸光度濃度mg/ml多糖含量

mg/100ml平均值10627 0020 407 20590 0019 382 30575 0019 372 40619 0020 401 50538 0017 347 60473 0015 304 369

3討論

31文獻表明蛋白質(zhì)對多糖的測定影響并不大，而增加去蛋白步驟會造成多糖的進一步損失。因此，本方法建立中未考慮去蛋白步驟[4]。

32醇沉的提取方法和以苯酚-硫酸顯色的含量測定方法，操作簡便易行，檢測數(shù)據(jù)真實、可靠，可作為該配方質(zhì)量的檢測方法。參考文獻

[1] Wensheng Pang，Siding Lin，Juan Hu.Antitussive Activity of Pseudostellaria heterophylla Pax Extracts and Improvement in Lung Function via Adjustment of Multicytokine Levels[J].Molecules 2011，16（11）：3360-3370.

[2] 于村.保健食品中多糖測定的研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2000，10（3）：281-282.

[3] 鄔衛(wèi)東，張曉文.硫酸-苯酚法測定枸杞膠囊中多糖的含量[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2003，22（6）：39-39.

[4] 趙寧，問亞琴，潘秋紅.苯酚-硫酸法測定干紅葡萄酒中的多糖含量[J].中外葡萄與葡萄酒，2011，35（5）：9-12.

（收稿日期：20140121）