王業(yè) 盈施明

【摘要】目的：測定膽舒排石顆粒中梔子苷的含量。方法：采用高效液相色譜法，以乙腈—水（15∶85）為流動相;流速為10ml/min;檢測波長為238nm。結果：梔子苷線性范圍為705μg～705μg，平均回收率為10061%，RSD=187%。結論：高效液相色譜法測定梔子苷含量，方法快速、結果準確，操作簡便，可用于膽舒排石顆粒的質量研究。

【關鍵詞】 膽舒排石顆粒; HPLC;梔子苷

【中圖分類號】R286【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2014）07-0027-02

Determination of Geniposid in Danshupaishi GranuleWangyeying，Shiming

Nanjing Tongrentang Pharmaceutical CO. LTD，Nanjing Jiangsu ?210012Abstract：Objective： To determine the content of Geniposid in Danshupaishi granule. Methods：A HPLC method was used. The mobile phase consisted of methgl alcohol-water（15∶85）.The flow rate was 1 ml/min. The detection wavelength was at 238 nm. Results： The linear range of Geniposid was 705μg～705μg The average recovery rate was 10061%（RSD=187%）. Conclusion： The HPLC method is accurate，simple and suitable for quality studies of the Danshupaishi granule.

Keywords：Danshupaishi granule; HPLC; Geniposid

膽舒排石顆粒是我公司自行研制的新藥品種，由梔子、金錢草、茵陳等18 味中藥組成，臨床上主要用于膽石病合并慢性膽囊炎濕熱兼氣血瘀阻證。為保證該制劑的安全、有效、質量可控，采用高效液相色譜法測定該藥品中梔子苷的含量。

1儀器與試藥

Agilent 1100高效液相色譜儀，十萬分之一電子天平（sartorius），KQ-300DE型數(shù)控超聲儀。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水。梔子苷對照品（批號：110749-200309，中國藥品生物制品檢定所提供）。膽舒排石顆粒（南京同仁堂藥業(yè)有限責任公司）。缺味陰性樣品：按處方分別配成相應的缺味處方藥，模擬制劑工藝，加相應輔料制成。

2方法與結果

21色譜條件色譜柱：依利特 SinoChrom ODS-BP柱（5um，46×250mm）;流動相：乙腈-水（15∶85）;流速：10ml/min;柱溫：35℃;檢測波長：238nm。

22溶液的制備

221對照品溶液的制備取梔子苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含40μg的梔子苷溶液，備用。

222供試品溶液的制備取本品裝量差異項下的顆粒，粉碎成細粉，取1g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，超聲提取40分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，備用[1-2]。

223陰性對照溶液的制備取缺梔子的樣品，按222項下的方法制成陰性對照溶液。

23干擾試驗分別吸取對照品、供試品溶液、陰性對照溶液各10μL，按照“21項”下的色譜條件測定，結果陰性無干擾[3]。色譜圖見圖1、圖2、圖3。

24線性考察分別精密量取1ml、2ml、4ml、6ml、8ml、10ml的梔子苷對照品溶液（705μg/ml），移入10ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻。分別吸取10μl注入高效液相色譜儀，測定，記錄峰面積。以峰面積Y對進樣濃度X（μg/ml）進行線性回歸，得回歸方程為：Y=1820043X+11313，r=09998（n=6），線性范圍為705ug～705ug。

25精密度試驗取同一批次的樣品10g，精密稱定，按“222項”下的方法制備成供試品溶液，連續(xù)進樣6次，體積10μml，測定其峰面積[4]。計算RSD為102%，符合要求，表明該方法的精密度較好。

26重現(xiàn)性試驗精密稱取6份同一批號的樣品，按照“222”項下的方法制成供試品溶液，進樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積[4]。計算得RSD為052%，符合要求。表明該方法的重現(xiàn)性較好。

27穩(wěn)定性試驗取同一供試品溶液，分別于0h、4h、8h、12h、16h、20h進樣，進樣體積10μl，注入高效液相中測定其峰面積，計算得RSD為113%，符合要求。表明供試品溶液在20h內比較穩(wěn)定。

28加樣回收率試驗取已知含量的樣品約05g，精密稱定，加入一定量的橙皮苷對照品，按“222項”下的方法制成供試品溶液，測定其峰面積。計算得平均回收率為1006%，RSD為19%，均符合要求，說明該方法可以用于橙皮苷的含量測定。具體結果見表1所示。

表1加樣回收率試驗結果（n=2）

序號樣品量

（g）橙皮苷含

量（mg）加入橙皮

苷量（mg）實測量

（mg）回收率

（%）平均回

收率（%）RSD

（%）1051012251209044321990220491221682090443361037130533723552090444561005140496321902090442941006550503622222090442959917100619

29含量測定分別取三個不同批次的膽舒排石顆粒樣品1g，精密稱定，按照222項下的方法制成供試品溶液，測定橙皮苷的含量，結果見表2所示。

表2樣品含量測定結果 （n=2）

批號含量（mg/袋）） ? ? RSD（%）100601380191006023961310060337115

3討論

膽舒排石顆粒是由金錢草、梔子等十八味中藥精制而成，處方藥味多，相互干擾大，最初標準是采用薄層掃描法測定梔子苷的含量，但操作復雜，精密度較差，回收率低，現(xiàn)經(jīng)過研究改為采用高效液相色譜法測定成品中梔子苷的含量，方法快速，結果準確，操作簡便，可用于膽舒排石顆粒的質量研究。

參考文獻

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（收稿日期：20140116）