李春和， 韓永嬌， 楊 越,2， 張?jiān)聟玻?楊依天， 楊 妮

(1.河北民族師范學(xué)院，河北承德 067000；2 北京師范大學(xué)資源學(xué)院，北京 100875)

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干濕交替對(duì)壩上草原微生物活性的影響

李春和1， 韓永嬌1， 楊 越1,2， 張?jiān)聟?， 楊依天1， 楊 妮1

(1.河北民族師范學(xué)院，河北承德 067000；2 北京師范大學(xué)資源學(xué)院，北京 100875)

[目的]為了認(rèn)識(shí)干濕交替對(duì)土壤微生物活性的影響。[方法] 采用室內(nèi)培養(yǎng)法，研究氮肥添加下栗鈣土中土壤微生物呼吸及微生物量碳對(duì)恒濕處理和干濕交替的響應(yīng)。[結(jié)果] 干旱土壤再濕潤(rùn)后激發(fā)了土壤微生物的生長(zhǎng)，提高了土壤微生物活性。與恒濕處理相比，多次干濕交替后，土壤呼吸釋放CO2累積量增加了28.40%。干濕交替處理培養(yǎng)過(guò)程中，干濕交替處理下土壤微生物量最大值為467.2 mg/kg，比恒濕處理高20.60%。[結(jié)論] 干濕交替對(duì)土壤微生物生長(zhǎng)代謝有重要影響。

干濕交替;土壤呼吸;微生物;微生物量

土壤干濕交替是指土壤經(jīng)歷干旱，隨后經(jīng)歷濕潤(rùn)，然后經(jīng)歷干旱的這種交替出現(xiàn)的循環(huán)過(guò)程。干濕交替是土壤頻繁經(jīng)歷的自然過(guò)程，對(duì)CO2、CH4和N2O等溫室氣體的排放和水體富營(yíng)養(yǎng)化有著深刻的影響[1]。草地是陸地生態(tài)系統(tǒng)中最重要、分布最廣的生態(tài)系統(tǒng)類(lèi)型之一,對(duì)全球碳循環(huán)和氣候調(diào)節(jié)有著重要的作用和效應(yīng)[2]。北方干旱半干旱草原區(qū)的氣候特點(diǎn)是冬季寒冷漫長(zhǎng)，夏季炎熟干燥，水分蒸發(fā)量大，為降水量的幾倍到幾十倍。河北豐寧壩上草原地區(qū)位于內(nèi)蒙古牧區(qū)和華北農(nóng)業(yè)區(qū)交錯(cuò)地帶，是季風(fēng)氣候向大陸氣候和濕潤(rùn)森林，向荒漠草原過(guò)渡的中間地帶，是京津地區(qū)的沙源。受全球氣候變化的影響，全球降水格局將發(fā)生改變[3-4]，河北壩上草原土壤出現(xiàn)干濕交替的頻率將增大。研究干濕交替條件下土壤微生物活性的變化，對(duì)于保護(hù)壩上草原土壤、指示草原上植物的生長(zhǎng)具有重要意義。采用實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，模擬研究降雨引起的干濕交替條件下土壤中的微生物的動(dòng)態(tài)變化，認(rèn)識(shí)干濕交替體對(duì)土壤微生物活性的影響，預(yù)測(cè)氣候格局變化以及降雨的增加對(duì)草原土壤的影響，對(duì)更好地利用和保護(hù)草地資源具有非常重要的作用。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料供試土壤為栗鈣土(0 ～ 20 cm)，采自河北省豐寧縣大灘草地，于2013年10月按照“z”形采集8～10點(diǎn)混合樣。土壤樣品在室溫下風(fēng)干，過(guò)2 mm篩，其基本的理化性質(zhì)為：pH 7.8，有機(jī)質(zhì)17.47 g/kg，全N 1.06 g/kg，全P 0.27 g/kg，全K 17.60 g/kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)每個(gè)樣品稱(chēng)取10 g風(fēng)干土壤于小瓶中，在25 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)7 d，采用稱(chēng)重法定期補(bǔ)水，使得水分保持在風(fēng)干土重的20%。預(yù)培養(yǎng)7 d后，即正式培養(yǎng)開(kāi)始時(shí)向土壤樣品中一次性加入0.5 ml (NH4)2SO4，加入量為0.1 mg N/g土。試驗(yàn)設(shè)2個(gè)處理：①恒濕培養(yǎng)處理，在培養(yǎng)過(guò)程中水分含量保持在風(fēng)干土重的20%，培養(yǎng)時(shí)間為35 d；②干濕交替處理，供試土壤在25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中風(fēng)干2 d，使得土壤含水量逐漸達(dá)到風(fēng)干土重的10%，然后補(bǔ)水使得土壤含水量恢復(fù)到風(fēng)干土重的20%，保持濕潤(rùn)3 d，如此干旱-濕潤(rùn)一次的過(guò)程即為一個(gè)干濕交替周期。在35 d的培養(yǎng)過(guò)程中，該處理一共干濕交替7次，設(shè)3次重復(fù)。在培養(yǎng)的第0、5、15、20、25和35天取樣，測(cè)定土壤的微生物量碳。

1.3 測(cè)定方法土壤呼吸測(cè)定使用二氧化碳分析儀；土壤微生物生物量以微生物C表示，采用氯仿熏蒸法，利用TOC分析儀(Multi C/N 3000,analitikjena,Germany)測(cè)定；土壤的全碳、全氮的測(cè)定用元素分析儀(Elemental,Germany)。

1.4 數(shù)據(jù)處理采用Microsoft Excel 2003軟件處理數(shù)據(jù)及繪圖，應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件檢驗(yàn)2個(gè)處理數(shù)據(jù)差異的顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)土壤呼吸速率的影響由圖1可知，供試土壤的基礎(chǔ)呼吸為0.212 6 mg/(kg·h)。在添加氮肥第1天后，2個(gè)處理土壤呼吸均迅猛增加，1 d內(nèi)達(dá)到最大值后又開(kāi)始不同程度的下降。其中,恒濕處理土壤呼吸速率在氮肥添加的第1個(gè)小時(shí)便達(dá)到最大值1.029 mg/(kg·h)，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于初始值，為初始值的4.84倍。此時(shí)，干濕交替處理的呼吸只達(dá)0.577 5 mg/(kg·h)，僅為恒濕處理的56.13%。此后，恒濕處理的呼吸速率便迅速下降，培養(yǎng)第4個(gè)小時(shí)后下降到0.813 6 mg/(kg·h)，而干濕交替處理的呼吸速率仍處于穩(wěn)定的緩慢增長(zhǎng)的趨勢(shì)，培養(yǎng)第4個(gè)小時(shí)后上升到0.798 2 mg/(kg·h)，但仍遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于恒濕處理的最大值。在培養(yǎng)第1天結(jié)束時(shí)，2個(gè)處理土壤呼吸分別為0.582 5和0.583 6 mg/(kg·h)，無(wú)顯著差異。隨著培養(yǎng)時(shí)間的進(jìn)行，恒濕處理的呼吸速率一直處于穩(wěn)定下降的趨勢(shì)。在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，土壤呼吸速率僅為初始值的39.84%，下降為0.084 7 mg/(kg·h)。干濕交替處理土壤呼吸速率隨土壤水分的變化呈波浪式變化的趨勢(shì)。

2.2 不同處理對(duì)土壤呼吸釋放CO2累積量的影響從圖2可以看出，在培養(yǎng)前期，恒濕及干濕處理土壤呼吸釋放CO2累積量相當(dāng)，無(wú)明顯差異，均保持較高的增長(zhǎng)速度。隨著培養(yǎng)時(shí)間的進(jìn)行，2個(gè)處理土壤呼吸釋放CO2累積量增長(zhǎng)速度逐漸降低。其中，恒濕處理下土壤釋放的CO2累積量增長(zhǎng)速度在0.05水平顯著低于干濕交替處理下土壤釋放的CO2累積量增長(zhǎng)速度。在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，恒濕處理土壤呼吸釋放CO2累積量為204.9 mg/kg，干濕交替處理土壤呼吸釋放CO2累積量較之高出28.40%，為263.1 mg/kg，兩者差異在0.05水平顯著。

2.3 不同處理對(duì)土壤微生物量的影響從圖3可以看出，2個(gè)處理土壤微生物量表現(xiàn)出相同的變化趨勢(shì)。在培養(yǎng)前期，隨著培養(yǎng)時(shí)間增加呈增加趨勢(shì)，隨后則以較為緩慢的速度增長(zhǎng)，在第4次取樣時(shí)土壤中微生物量達(dá)到最大值，干濕交替處理下土壤微生物量為467.2 mg/kg，比恒濕處理高20.60%。隨后，由于缺乏底物，土壤微生物量隨培養(yǎng)時(shí)間的增加呈降低的趨勢(shì)，干濕交替處理土壤微生物量下降的速度在0.05水平顯著高于恒濕處理下。在培養(yǎng)時(shí)間結(jié)束時(shí)，恒濕處理土壤的微生物量為253.4 mg/kg，干濕交替處理下土壤微生物量為274.4 mg/kg，差異不顯著(P>0.05)。

3 結(jié)論與討論

研究表明，與恒濕處理相比，多重干濕交替處理能夠顯著提高土壤微生物的活性。在干濕交替處理下，干旱土壤再濕潤(rùn)的時(shí)候，能夠激發(fā)CO2的產(chǎn)量，呈現(xiàn)一個(gè)小的脈沖，隨干濕交替頻率的增加，這種效應(yīng)越來(lái)越低。在底物充足的時(shí)候，干濕交替處理增加了土壤微生物量的含量。在自然條件下，土壤頻繁地處在干濕交替的變化中，且每次干旱和濕度強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間以及干濕交替的頻率均不同。同時(shí)，存在很多不確定性因素，例如溫度、植物根系、凋落物、人類(lèi)活動(dòng)的干擾等。雖然控制試驗(yàn)所得的結(jié)果不能直接運(yùn)用到自然情況中去，但是可以提供一些基本的趨勢(shì)。

3.1 干濕交替處理對(duì)土壤呼吸的影響土壤呼吸速率動(dòng)態(tài)變化可表明土壤中微生物生長(zhǎng)情況的變化。它與土壤中底物和土壤中水分變化密切相關(guān)。在自然條件下，土壤表面經(jīng)歷著水分的季節(jié)性波動(dòng)。水分變化對(duì)CO2產(chǎn)量的激發(fā)在土壤中也是很常見(jiàn)的現(xiàn)象[5-6]。特別是在干旱、半干旱和地中海環(huán)境中，土壤很干燥，降雨不頻繁，土壤再濕潤(rùn)所釋放的CO2可能在全年土壤表面釋放的CO2產(chǎn)量中占很大的比例[7]。

在培養(yǎng)開(kāi)始時(shí)，底物的添加刺激了土壤微生物的生長(zhǎng)，恒濕處理土壤呼吸迅猛增加。而在干濕交替處理下，土壤處于干旱失水的狀態(tài)，抑制微生物活性[8]，降低CO2的釋放。當(dāng)干旱的土壤再濕潤(rùn)的時(shí)候，通常情況下能夠刺激微生物活性，并且釋放CO2。這在干濕交替的第一個(gè)周期內(nèi)表現(xiàn)不明顯，主要是因?yàn)榇藭r(shí)土壤呼吸作用的主導(dǎo)因子是添加的底物。隨著培養(yǎng)時(shí)間的進(jìn)行，干濕交替處理土壤呼吸速率隨著土壤水分的變化呈波浪式變化的趨勢(shì)，在干旱土壤再濕潤(rùn)的時(shí)候激發(fā)了CO2的產(chǎn)生，土壤呼吸速率均呈現(xiàn)出一個(gè)小小的脈沖。Fierer等[9]通過(guò)對(duì)橡樹(shù)和草地土壤進(jìn)行水分的室內(nèi)控制試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在干旱土壤再濕潤(rùn)時(shí)，激發(fā)CO2的產(chǎn)量，并且能夠持續(xù)2～6 d。Saetre等[10]對(duì)半干旱地區(qū)草地和灌木土壤的研究表明，在土壤再濕潤(rùn)后， 17 h內(nèi) CO2的產(chǎn)量增加了10倍。Schmitt等[11]對(duì)挪威云杉林灰化土壤試驗(yàn)中也同樣發(fā)現(xiàn)CO2產(chǎn)量激發(fā)現(xiàn)象。

在自然條件下，土壤并不只是經(jīng)歷一次干旱和濕潤(rùn)，干濕交替的頻率對(duì)微生物活性也有很大的影響。隨著培養(yǎng)時(shí)間的進(jìn)行，干旱的土壤再濕潤(rùn)激發(fā)土壤呼吸的脈沖越來(lái)越小，其原因可能在于不穩(wěn)定碳隨培養(yǎng)時(shí)間減少[12]或土壤中細(xì)菌群落發(fā)生改變[13]。Borken等[7]分析了現(xiàn)有的文獻(xiàn)報(bào)道，發(fā)現(xiàn)隨著干濕交替的頻率增加，再濕潤(rùn)對(duì)CO2產(chǎn)量的激發(fā)效應(yīng)會(huì)不斷減弱。這一結(jié)果在農(nóng)業(yè)土壤、草地土壤和森林土壤中都是一致的。

3.2 干濕交替處理對(duì)土壤微生物量的影響在土壤中，水分狀況變化(如干濕交替)對(duì)土壤的微生物活性有重要影響[5,14]。干濕交替對(duì)土壤微生物活性的影響主要表現(xiàn)在每次干旱后期微生物量均較低,在干旱條件下有一部分微生物死亡[15]。當(dāng)土壤重新濕潤(rùn)時(shí)易被活下來(lái)的生物降解時(shí),在土壤濕潤(rùn)后又刺激微生物生長(zhǎng)。土壤水勢(shì)的快速變化能使微生物經(jīng)歷滲透性的沖擊[16]。

在試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，由于氮肥增加，刺激微生物生長(zhǎng)，恒濕、干濕交替處理土壤微生物含量迅速增加。在培養(yǎng)前期，與恒濕處理相比，干濕交替處理顯著增加了土壤中微生物量含量。土壤微生物經(jīng)歷干旱，再濕潤(rùn)的時(shí)候，對(duì)其生理來(lái)說(shuō)也是一種脅迫。在經(jīng)歷再濕潤(rùn)的初期，微生物量會(huì)大量增加，其原因在于存活下來(lái)的微生物量能夠很好地利用養(yǎng)分資源或死去的微生物[17]。隨著干濕交替頻率的增加，土壤干旱再濕潤(rùn)刺激土壤微生物生長(zhǎng)的效應(yīng)持續(xù)進(jìn)行，在培養(yǎng)的第20天時(shí)達(dá)最大值。在干旱條件下，土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)會(huì)被壓縮，從而暴露新的土壤表面和前期受到保護(hù)的有機(jī)質(zhì)[18]。土壤壓縮的強(qiáng)度和團(tuán)粒結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性與土壤有機(jī)質(zhì)含量、微生物量有著很大的關(guān)系[19]。在土壤再經(jīng)歷濕潤(rùn)的時(shí)候，土壤會(huì)膨脹，土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)遭到進(jìn)一步的破壞，暴露給微生物的有機(jī)質(zhì)表面進(jìn)一步增加，從而增加非生物有機(jī)質(zhì)的生物可利用性[20]。但是，這種土壤物理結(jié)構(gòu)破壞對(duì)土壤有機(jī)質(zhì)可利用性和微生物活性的影響只是限制在少量幾次干濕循環(huán)之內(nèi)[18-19]。Xiang等[8]通過(guò)對(duì)比研究表層土和次表層土，發(fā)現(xiàn)多次干濕交替增加了兩層土壤中的生物量，其最值出現(xiàn)在多次干濕交替處理的后期，并且次表層土的響應(yīng)更強(qiáng)烈，其生物量比初始時(shí)增加了5～8倍，而表層土中只增加了30%。Schimel等[21]也發(fā)現(xiàn)干濕交替的頻率增加了樺樹(shù)土壤中的微生物量。這些研究都與該試驗(yàn)結(jié)果一致，即多次干濕交替可以增加土壤中微生物量含量。

在培養(yǎng)后期，恒濕及干濕交替處理下土壤微生物量迅速降低，主要是由于整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有外源碳輸入，土壤中可供微生物消耗的有機(jī)質(zhì)數(shù)量有限。同時(shí)，多次干濕交替后土壤持水能力下降，土壤團(tuán)聚體裂解，釋放出有機(jī)質(zhì)含量逐漸耗盡[18]。

[1] 王明.干濕交替驅(qū)動(dòng)下土壤微生物量及N2O變化規(guī)律[D].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2013.

[2] 鮑芳,周廣勝.中國(guó)草原土壤呼吸作用研究進(jìn)展[J].植物生態(tài)學(xué)報(bào),2010,34(6):713-726.

[3] EASTERLING D R,EVENANS J L,GROISMAN P Y,et al.Observed variability and trends in extreme climate events:A brief review[J].Bulletin of the American Meteorological Society,2000,81:417-425.

[4] KARL T R,TRENBERTH K E.Modern global climate change[J].Science,2003,302:1719-1723.

[5] WU J,BROOKES P C.The proportional mineralisation of microbial biomass and organic matter caused by air-drying and rewetting of a grassland soil[J].Soil Biology & Biochemistry,2005,37(3):507-515.

[6] LI C H,TANG L S,LI Y.Effects of air-drying and rewetting on physico-chemical properties and microbial activity of desert grey soil[J].Acta Pedologia Sinica,2007,44(2):364-367.

[7] BORKEN W,MATZNER E.Reappraisal of drying and wetting effects on C and N mineralization and fluxes in soils[J].Global Change Biology,2009,15(4):808-824.

[8] XIANG S R,DOYLE A,HOLDEN P A,et al.Drying and rewetting effects on C and N mineralization and microbial activity in surface and subsurface California grassland soils[J].Soil Biology & Biochemistry,2008,40(9):2281-2289.

[9] FIERER N,SCHIMEL J P.Effects of drying-rewetting frequency on soil carbon and nitrogen transformations[J].Soil Biology & Biochemistry,2002,34(6):777-787.

[10] SAETRE P,STARK J M.Microbial dynamics and carbon and nitrogen cycling following re-wetting of soils beneath two semi-arid plant species[J].Oecologia,2005,142(2):247-260.

[11] SCHMITT A,GLASER B,BORKEN W,et al.Organic matter quality of a forest soil subjected to repeated drying and different re-wetting intensities[J].European Journal of Soil Science,2010,61(2):243-254.

[12] BIRCH H F.The effect of soil drying on humus decomposition and nitrogen availability[J].Plant and Soil,1958,10:9-31.

[13] FIERER N,SCHIMEL J P,HOLDEN P A.Influence of drying-rewetting frequency on soil bacterial community structure[J].Microbial Ecology,2003,45(1):63-71.

[14] ZHANG B,YAO S H,HU F.Microbial biomass dynamics and soil wet tability as affected by the intensity and frequency of wetting and drying during straw decomposition[J].European Journal of Soil Science,2007,58:1482-1492.

[15] HAMER U,UNGER M,MAKESCHIN F.Impact of air-drying and rewetting on PLFA profiles of soil microbial communities[J].Journal of Plant Nutrition and Soil Science,2007,170:259-264.

[16] HALVERSON L J,JONES T M,FIRESTONE M K.Release of intracellular solutes by four soil bacteria exposed to dilution stress[J].Soil Science Society of America Journal,2000,64(5):1630-1637.

[17] TUNMER B L,DRIESSEN J P,HAYGARTH P M,et al.Potential contribution of lysed bacterial cells to phosphorus solubilisation in two rewetted Australian pasture soils[J].Soil Biology & Biochemistry,2003,35(1):187-189.

[18] DENEF K,SIX J,BOSSUYT H,et al.Influence of dry-wet cycles on the interrelationship between aggregate,particulate organic matter,and microbial community dynamics[J].Soil Biology & Biochemistry,2001,33(12/13):1599-1611.

[19] DENEF K,SIX J,PAUSTIAN K,et al.Importance of macroaggregate dynamics in controlling soil carbon stabilization:short-term effects of physical disturbance induced by dry-wet cycles[J].Soil Biology & Biochemistry,2001,33(15):2145-2153.

[20] VANGESTEL M,MERCKX R,VLASSAK K.Microbial biomass responses to soil drying and rewetting the fate of fast-growing and slow-growing microorganisms in soils from different climates[J].Soil Biology & Biochemistry,1993,25(1):109-123.

[21] SCHIMEL J P,GULLEDGE J M,CLEIN-CURLEYy J S,et al.Moisture effects on microbial activity and community structure in decomposing birch litter in the Alaskan taiga[J].Soil Biology & Biochemistry,1999,31(6):831-838.

Influence of Drying-wetting Cycles on Microbial Activity in Bashang Soil

LI Chun-he1,HAN Yong-jiao1,YANG Yue1,2

(1.Hebei Normal University for Nationalities,Chengde,Hebei 067000; 2.College of Resources Science and Technology,Beijing Normal University,Beijing 100875)

[Objective]The research aimed to study the effects of drying-wetting cycles on microbial actitity. [Method] The influence of drying-wetting cycles on the respiration of the soil and the dynamics of microbial biomass C in soil with the addition of nitrogen fertilizer was investigated,through a laboratory incubation test.[Result] Compared with the continuous wetting treatment,drying-wetting cycles stimulated the microbial growth, and CO2respiration cumnlant decreased 28.40%.Druing the incubation,drying-wetting cycles resulted in the increase of microbial biomass carbon by about 20.60%, and the amount was 467.2 mg/kg.[Conclusion] Drying and rewetting cycles had direct and indirect effects on soil microbes.

Drying-wetting cycles; Soil respiration; Microbies; Microbial biomass

承德市財(cái)政局扶持項(xiàng)目(CZ2012008)。

李春和(1965- ),男,河北故城人,教授，碩士，從事環(huán)境土壤學(xué)方面的研究。

2015-02-05

S 154.2

A

0517-6611(2015)09-086-03