胡曉琳，高靜

(天津中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院檢驗科，天津300193)

缺血性腦卒中患者血漿脂蛋白相關磷脂酶A2檢測的臨床意義

胡曉琳，高靜

(天津中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院檢驗科，天津300193)

脂蛋白磷脂酶A2;缺血性腦卒中;動脈粥樣硬化

缺血性腦卒中疾病的重要病理基礎是動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)，而炎癥現(xiàn)已被公認為是AS發(fā)展過程中的核心因子，貫穿于AS的整個發(fā)生、發(fā)展環(huán)節(jié)［1］。脂蛋白相關磷脂酶A2 (lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)作為一種新型的炎癥標志物，參與AS斑塊形成的各個階段，在壞死中心、巨噬細胞、凋亡的巨噬細胞內(nèi)以及易損和破裂的斑塊中有高度表達［2］。D-二聚體(D-dimer，D-D)是纖溶酶作用于交聯(lián)纖維蛋白后產(chǎn)生的特異性降解產(chǎn)物，其升高特異地反映體內(nèi)纖溶活性增強和凝血酶生成增多，對血栓形成性疾病有早期快速診斷的價值［3］。D-D與Lp-PLA2可能對缺血性腦卒中的發(fā)生、發(fā)展有重要意義。為此，我們檢測了缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2水平，并分析其與頸動脈內(nèi)中膜厚度(carotid intima-media thickness，CIMT)、動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性以及D-D之間的關系，以期為缺血性腦卒中的臨床診斷、分期及療效觀察提供理論依據(jù)。

一、材料和方法

1.研究對象(1)動脈粥樣硬化性腦梗死(atherosclerotic cerebral infarction，ACI)組:89例ACI患者均來自天津中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院2014年3月至6月入院的患者，男54例，女35例，均符合第4屆腦血管病學術會議制定的急性腦梗死診斷標準［4］，并據(jù)頸動脈彩超顯示的斑塊性質(zhì)將上述患者分為不穩(wěn)定斑塊組(38例，其中男21例，女17例，年齡39～75歲)、穩(wěn)定性斑塊組(33例，其中男21例女12例，年齡42～72歲)、無斑塊組(18例，其中男12例，女6例，年齡43～70歲);(2)正常對照組:選取同期年齡、性別相匹配的健康體檢者62名，男38名，女24名，年齡40～65歲。確認無既往腦血管病史，近期未服用任何藥物。

2.排除標準(1)腔隙性腦梗死、無癥狀性腦梗死;(2)明確栓子來源的腦栓塞，先天發(fā)育異常導致的腦梗死;(3)出血性腦卒中，梗死后腦出血;(4)各種凝血機制異常、血液系統(tǒng)疾病以及高黏血癥所致的腦梗死;(5)腫瘤、肝病、自身免疫性疾病等;(6)嚴重的全身感染。

3.標本采集所有對象均取晨起空腹靜脈血，ACI患者所用藥物對相關檢測項目無影響。分離血清，取部分于-20℃保存，集中檢測LP-PLA2，以減少批間誤差及測定誤差。另一部分血清常規(guī)進行總膽固醇(totol cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、D-D檢測。

4.方法Lp-PLA2檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗，試劑盒由天津康爾克生物科技有限公司提供。TC、TG、HDL-C、LDL-C試劑由日本和光純藥工業(yè)株式會社提供，儀器為日立7600系列全自動生化分析儀。D-D采用MINI-VIDAS全自動免疫分析系統(tǒng)(法國梅里埃公司)及配套試劑(酶聯(lián)免疫熒光法)檢測。

5.頸動脈超聲多普勒檢查采用東芝2000型彩色多普勒超聲診斷儀測量CIMT，確定斑塊位置和回聲、斑塊形態(tài)、大小范圍、管壁細微硬化斑、有無狹窄或阻塞部位，有斑塊者測量內(nèi)徑。斑塊診斷測量標準:CIMT＜1.0 mm為正常;1.0～1.2 mm為內(nèi)膜增厚;＞1.2 mm為斑塊形成，視為粥樣硬化。根據(jù)斑塊形態(tài)和回聲將其分為扁平型、軟斑、硬斑以及潰瘍斑。扁平型和硬斑稱為穩(wěn)定性斑塊;軟斑和潰瘍斑稱為不穩(wěn)定性斑塊，此種斑塊發(fā)展快，易于脫落出血。

6.統(tǒng)計學方法采用SPSS11.5軟件進行統(tǒng)計分析。正態(tài)分布計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗;非正態(tài)分布數(shù)據(jù)以中位數(shù)(M)［四分位數(shù)(P25，P75)］來表示，比較采用兩獨立樣本的秩和檢驗，多組比較采用單因素方差分析(F檢驗)，2個組數(shù)據(jù)的相關性采用Spearman秩相關分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

二、結果

1.ACI組與對照組Lp-PLA2及相關生化指標比較ACI組Lp-PLA2、TG、LDL-C、D-D水平均高于正常對照組(P＜0.01);而HDL-C、TC水平與正常對照比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表1。

2.不同性質(zhì)斑塊組Lp-PLA2、D-D及CIMT的比較有斑塊組CIMT明顯高于無斑塊組(P＜0.01)，穩(wěn)定型與不穩(wěn)定型組CIMT差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);無斑塊組、穩(wěn)定型斑塊組Lp-PLA2和D-D水平與不穩(wěn)定斑塊組水比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。見表2。

表1 ACI組與正常對照組Lp-PLA2、D-D及血脂水平的比較

表2 ACI患者不同性質(zhì)斑塊組Lp-PLA2、D-D水平及CIMT的比較(±s)

表2 ACI患者不同性質(zhì)斑塊組Lp-PLA2、D-D水平及CIMT的比較(±s)

注:與無斑塊組比較，*P＜0.01;與穩(wěn)定型斑塊組比較，#P＜0.01

組別例數(shù)CIMT(mm)Lp-PLA2(mg/L)D-D(ng/mL) 18 0.89±0.27 137.56±55.57 465.78±277.62穩(wěn)定斑塊組33 1.38±0.22*198.67±57.25*876.24±445.87*不穩(wěn)定斑塊組38 1.41±0.32*288.89±79.72*#1 011.45±578.52*#無斑塊組

3.CIMT與Lp-PLA2、D-D的相關性CIMT與Lp-PLA2、D-D均呈明顯正相關［相關系數(shù)(r)分別為0.876、0.756，P均＜0.01］。

三、討論

Lp-PLA由441個氨基酸殘基組成，在血液中主要由成熟的巨噬細胞和淋巴細胞合成分泌［5］，可水解低密度脂蛋白分子中氧化修飾的磷脂，生成2種強促炎因子和趨化因子:溶血磷脂酰膽堿(lyso-phosphatidyl choline，L-PC)和氧化型游離脂肪酸(oxidized free fatty acid，ox-FFA)，刺激黏附因子和細胞因子的產(chǎn)生，促進單核細胞衍生為巨噬細胞，進一步演變?yōu)榕菽毎?凋亡泡沫細胞會聚集成動脈粥樣硬化斑塊，釋放細胞因子和蛋白酶，降解纖維帽的平滑肌細胞核膠原基質(zhì)，使脆弱斑塊破裂，導致血管內(nèi)皮損傷，引發(fā)動脈粥樣硬化，血栓形成，造成缺血性腦卒中的發(fā)生［6］。

本研究結果顯示ACI組血清Lp-PLA2水平明顯高于正常對照組(P＜0.01)，這與葉蕓等［7］的研究結果一致。經(jīng)頸動脈彩超多普勒檢查，CIMT與Lp-PLA呈明顯正相關(r=0.876，P＜0.01);無斑組、穩(wěn)定型斑塊組和不穩(wěn)定型斑塊組之間差異亦有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，表明Lp-PLA2貫穿著缺血性腦卒中的發(fā)生、發(fā)展過程，并且與頸動脈AS的斑塊穩(wěn)定性有關:Lp-PLA2的水平也越高，出現(xiàn)斑塊的可能性越大，CIMT越高，且斑塊的性質(zhì)越易從穩(wěn)定型向不穩(wěn)定型發(fā)展。

在AS發(fā)生過程中，常伴有機體凝血及纖溶系統(tǒng)的激活。機體血漿纖維蛋白原在凝血酶和凝血因子Ⅻ作用下形成的交聯(lián)纖維蛋白越多，患者頸動脈管腔越狹窄，AS情況越嚴重。隨后，機體纖溶系統(tǒng)出現(xiàn)繼發(fā)性亢進，將交聯(lián)纖維蛋白溶解［8］。同時，腦卒中所引起的腦組織損傷和梗死組織釋放組織因子，也會使凝血活性增高，機體高凝狀態(tài)亦進一步導致激發(fā)纖溶活性增高，引起D-D水平的變化［9］。本研究結果顯示ACI患者血清D-D水平明顯高于正常對照組(P＜0.01)，CIMT與D-D呈明顯正相關(r=0.756，P＜0.01)，且隨著頸動脈斑塊的由無到有和不穩(wěn)定性的增加，其水平也逐漸升高，與文獻報道［10-11］一致。另外，CIMT和斑塊的性質(zhì)反映了頸動脈AS的嚴重程度。本研究結果顯示有斑塊組CIMT高于無斑塊組(P＜0.01)，穩(wěn)定型與不穩(wěn)定型組CIMT則無明顯差異(P＞0.05)。說明缺血性腦卒中的炎癥反應可以引起頸動脈內(nèi)膜增厚，使血管內(nèi)皮受損，激活血小板，促進了血栓形成或繼發(fā)纖溶活性增加，使D-D水平增高。

綜上所述，Lp-PLA2已經(jīng)成為一個新的急性缺血性腦卒中的危險標志物，在動脈粥樣硬化形成、粥樣斑塊內(nèi)中膜厚度和斑塊的不穩(wěn)定性中發(fā)揮著重要作用。檢測血中Lp-PLA2的水平有助于識別斑塊局部炎癥反應的程度和早期識別易損斑塊的產(chǎn)生，有利于臨床病情進展的分析和預后的判斷。

［1］何德化，李衛(wèi)華.脂蛋白相關磷脂酶A2與冠心病的相關性研究進展［J］.心血管病學進展，2008，29(1):57-60.

［2］KOLODGIE FD，BURKE AP，SKORIJA KS，et al. Lipoprotein-associated phosphoipase A2 protein expression in the natural progression of human coronary atherosclerosis［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2006，26(11):2523-2529.

［3］陳峻，馬濤，崔天盆.急性腦梗死患者血漿FDP、DD和CRP聯(lián)合檢測的臨床價值［J］.標記免疫分析與臨床，2013，20(2):111-112.

［4］中華醫(yī)學會全國第四屆腦血管病學術會議.各類腦血管疾病診斷要點［J］.中華神經(jīng)科雜志，1996，42(6):60-61.

［5］貴永堃，呂曉紅.脂蛋白相關磷脂酶A2與缺血性腦血管疾病的研究進展［J］.中風與神經(jīng)疾病雜志，2011，28(1):86-88.

［6］龍璐，王鐘明，陳貞，等.急性缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2水平與頸動脈硬化斑塊穩(wěn)定性及神經(jīng)功能缺損程度的關系［J］.檢驗醫(yī)學，2013，28 (10):885-889.

［7］葉蕓，李蘇亮.腦卒中患者血漿Lp-PLA2水平及臨床意義探討［J］.檢驗醫(yī)學，2014，29(3):249-253.

［8］陳新民，陳福民.急性缺血性腦卒中患者頸動脈粥樣硬化與D-二聚體水平的關系［J］.中國醫(yī)藥導刊，2013，15(5):872.

［9］王慧.急性腦梗死患者NSE、hs-CRP和D-二聚體檢測的臨床意義［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2014，8 (21):67-69.

［10］SMITH A，PATTERSON C，YARNELL J，et al.Which hemostatic markers add to the predictive value of conventional risk factors for coronary heart disease and ischemic stroke?The Caerphilly Study［J］.Circulation，2005，112(20):3080-3087.

［11］VOROBEVA NM，PANCHENKO EP，DOBROVOLSKII AB，et al.Elevated D-dimer in patients with cardiovascular diseases free from thromboembolic complications:what is it associated with and what has to be done［J］.Angiol Sosud Khir，2010，16(4):34-41.

1673-8640(2015)09-0968-03

R446.1

B

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.09.023

2015-02-28)

(本文編輯:龔曉霖)

胡曉琳，女，1970年生，學士，副主任技師，主要從事臨床生化、免疫學檢驗工作。