秦建設(shè)

（重慶三峽醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，重慶404120）

補(bǔ)中益氣活血方對(duì)胃潰瘍患者血清TFF2和SOD水平的影響

秦建設(shè)

（重慶三峽醫(yī)藥高等專科學(xué)校，重慶404120）

目的通過(guò)觀察補(bǔ)中益氣活血方 （由黃芪、黨參、白術(shù)、當(dāng)歸、陳皮、升麻、柴胡、炙甘草等組成）對(duì)脾胃虛弱型胃潰瘍患者血清三葉因子2（TFF2）和超氧化物歧化酶 （SOD）表達(dá)水平的影響并探討其可能的機(jī)制。方法將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的77例病例隨機(jī)分為補(bǔ)中益氣活血方治療組 （簡(jiǎn)稱中藥組）和奧美拉唑治療組，通過(guò)比較2組藥物治療前后的癥狀分析、胃鏡檢查、血清TFF2和SOD的水平來(lái)觀察對(duì)胃潰瘍的治療效果。結(jié)果治療后，補(bǔ)中益氣活血方組的臨床療效評(píng)定和提升胃潰瘍患者血清TFF2和SOD的表達(dá)水平明顯優(yōu)于奧美拉唑組 （P＜0.05）。結(jié)論補(bǔ)中益氣活血方抗脾胃虛弱型胃潰瘍的作用機(jī)理可能與調(diào)節(jié)胃黏膜中TFF2和SOD的表達(dá)有關(guān)。

補(bǔ)中益氣活血方；胃潰瘍；三葉因子2；超氧化物歧化酶

胃潰瘍（gastric ulcer，GU）是一種臨床消化系統(tǒng)的常見(jiàn)病、多發(fā)病，其致病因素復(fù)雜，病理機(jī)制迄今未完全清楚。中醫(yī)藥治療胃潰瘍有深厚的理論基礎(chǔ)和臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，補(bǔ)中益氣類方劑是臨床上用于治療胃潰瘍屬脾胃虛弱證的常用藥物，本研究的目的是探討補(bǔ)中益氣活血方對(duì)胃潰瘍脾胃虛弱型患者血清中三葉因子2（Trefoil factor family 2，TFF2）和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）水平的影響，進(jìn)一步闡明補(bǔ)中益氣類方藥治療胃潰瘍的藥理機(jī)制，為治療慢性胃潰瘍提供科學(xué)理論基礎(chǔ)。

1 研究對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 本研究對(duì)象為重慶三峽醫(yī)藥高等專科學(xué)校附屬醫(yī)院門診收治的符合胃潰瘍脾胃虛弱型診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者77例 （2011年9月—2013年10月）。根據(jù)患者就診時(shí)間將病例隨機(jī)分成補(bǔ)中益氣活血治療組 （簡(jiǎn)稱中藥組）和奧美拉唑治療組（簡(jiǎn)稱西藥組），其中中藥組42例，西藥組35例。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)、納入標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn) 均參照文獻(xiàn) ［1-2］所給定的脾胃虛弱證候的診斷標(biāo)準(zhǔn)判定。凡年齡18～70歲男女不限，無(wú)胃潰瘍并發(fā)癥，無(wú)嚴(yán)重心、腦、腎血管疾病及精神疾病，中醫(yī)辨證屬于脾胃虛弱證能較好配合治療的患者均納入研究對(duì)象。凡年齡小于18歲或大于70歲者，有胃潰瘍嚴(yán)重并發(fā)癥、嚴(yán)重心肺肝腎功能不全者，妊娠、哺乳期婦女，中醫(yī)辨證不屬于脾胃虛弱證不能配合治療及隨訪者作為排除對(duì)象。

1.3 治療方法

1.3.1 中藥組 口服補(bǔ)中益氣活血方，藥物主要為黃芪20 g、黨參20 g、白術(shù)15 g、當(dāng)歸20 g、陳皮10 g、升麻8 g、柴胡15 g、炙甘草10 g、五靈脂10 g、蒲黃6 g、赤芍15 g、大棗6枚，煎湯口服一日1劑。

1.3.2 西藥組給予奧美拉唑20 mg（重慶華邦制藥有限公司）和阿莫西林分散片1 g（華北制藥股份有限公司），口服1日1次。

1.3.3 療程 兩組均以8周為1個(gè)療程。在治療期間，兩組不再使用其他藥物。治療1個(gè)療程后復(fù)查胃鏡及抽血檢測(cè)。

1.4 療效判定

1.4.1 中醫(yī)證候療效判斷標(biāo)準(zhǔn) 參照文獻(xiàn) ［2］對(duì)患者的胃脘部疼痛、腹脹、飲食不振、神疲乏力、面色等主要癥狀和體征采用分級(jí)量化的方法進(jìn)行記分，即分無(wú)、輕、中、重4級(jí)，記為0、1、2、3分。對(duì)舌、脈變化則分為正常和非正常兩級(jí)，分別記0、1分。臨床痊愈：癥狀、體征消失或基本消失，積分減少≥95%；顯效：癥狀、體征明顯改善，積分減少≥70%，但＜95%；有效：癥狀、體征均有好轉(zhuǎn)，積分減少≥30%，但＜70%；無(wú)效：癥狀、體征均無(wú)明顯改善，甚或加重，積分減少＜30%。積分計(jì)算公式為：［（治療前積分-治療后積分）/治療前積分］×100%。

1.4.2 胃鏡療效判定標(biāo)準(zhǔn) 臨床痊愈：潰瘍及周圍炎癥全部消失；顯效：潰瘍基本消失，但仍有炎癥表現(xiàn)；有效：潰瘍面縮小≥50% 以上；無(wú)效：潰瘍無(wú)變化或縮?。?0%者。

1.5 血清TFF2和SOD水平測(cè)定 抽取患者空腹靜脈血5 mL，室溫靜置1 h后3 500 r/min，離心10 min，吸出上層血清存放在-85℃冰箱保存。TFF2試劑盒購(gòu)自武漢伊萊瑞特生物科技有限公司。SOD試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.5.1 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測(cè)血清TFF2水平。設(shè)定空白孔、樣品孔和標(biāo)準(zhǔn)品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢鹤鳛榭瞻讓?duì)照，樣品孔依次加樣品血清100μL，標(biāo)準(zhǔn)孔依次加稀釋為0、31.25、62.5、125、250、500、1 000、2 000、4 000 pg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品100μL，37℃孵育反應(yīng)90 min。棄液甩干后每孔加入生物素化抗體工作液100μL，37℃孵育反應(yīng)60 min。洗板3次后，每孔加入酶結(jié)合物工作液100μL，37℃孵育反應(yīng)60 min。洗板5次后，每孔加底物液90μL，37℃避光孵育反應(yīng)15 min后，每孔加入50μL終止液，終止反應(yīng)。用多功能酶標(biāo)儀（Bio-Tek ELX800，美國(guó)）在450 nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值。標(biāo)準(zhǔn)品得到的數(shù)據(jù)用Excel作標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算樣品的濃度。

1.5.2 采用WST-1法檢測(cè)血清SOD水平。按試劑盒要求設(shè)定對(duì)照孔、對(duì)照空白孔、測(cè)定孔和測(cè)定空白孔，分別加樣品、雙蒸水、酶工作液、酶稀釋液、底物應(yīng)用液后，37℃孵育反應(yīng)20 min。用多功能酶標(biāo)儀（Bio-Tek ELX800，美國(guó)）在450 nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值。依據(jù)公式計(jì)算樣品中SOD水平。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以表示，采用t檢驗(yàn)，等級(jí)資料采用卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異顯著有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般情況比較 經(jīng)卡方檢驗(yàn)，兩組患者性別、年齡、病史等一般情況比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組患者一般情況比較Tab.1 Com parison of general information between the two groups

2.2 臨床療效比較 依據(jù)中醫(yī)證候療效診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行記分，根據(jù)記分結(jié)果把治療效果分別評(píng)定為臨床痊愈、顯效、有效和無(wú)效四個(gè)層次。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，兩組療效整體比較有顯著性差異 （P＜0.05），中藥組療效明顯優(yōu)于西藥組 （見(jiàn)表2）。

表2 兩組臨床療效比較Tab.2 Comparison of clinical effects between the two groups

2.3 兩組胃鏡下療效對(duì)比 經(jīng)卡方檢驗(yàn)，兩組胃鏡下療效無(wú)顯著性差異 （P＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 兩組胃鏡下療效比較Tab.3 Comparison of the curative effect between the two groups by gastroscopy

2.4 兩組治療前后血清TFF2和SOD的含量變化

結(jié)果顯示，經(jīng)過(guò)一個(gè)療程治療后，中藥組與西藥組患者血清中的TFF2和SOD水平與治療前相比都有明顯的提升 （P＜0.05），且中藥組患者治療后血清中TFF2和SOD水平明顯高于西藥組患者（P＜0.05），說(shuō)明中藥組的治療作用要優(yōu)于西藥組（見(jiàn)表4）。

表4 兩組治療前后血清TFF2和SOD的含量變化（）Tab.4 Content changes of serum TFF2 and SOD in two groups（）

表4 兩組治療前后血清TFF2和SOD的含量變化（）Tab.4 Content changes of serum TFF2 and SOD in two groups（）

注：治療前與治療后比較，▲P＜0.05；治療后中藥組與西藥組比較，★P＜0.05

組別 n TFF2/（pg·m L-1）SOD/（U·mL-1）治療前 治療后中藥治療組 42 75.94±9.22 127.14±10.94▲ 64.61±7.28 101.23±8.30治療前 治療后▲西藥治療組 35 73.83±7.19 119.28±8.01▲★ 68.17±8.38 93.70±8.33▲★

3 討論

胃潰瘍（gastric ulcer）的產(chǎn)生與修復(fù)是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，是多種細(xì)胞、生長(zhǎng)因子及細(xì)胞外基質(zhì)相互作用的結(jié)果?，F(xiàn)代研究表明，胃黏膜防御屏障功能下降，防御保護(hù)因子減少是形成胃潰瘍的重要病理基礎(chǔ)之一。三葉因子家族（trefoil factor family，TFF）是一類含有三葉結(jié)構(gòu)域（又稱P結(jié)構(gòu)域）的小分子多肽，其中最常見(jiàn)的是乳腺癌相關(guān)肽（TFF1或pS2）、解痙攣多肽 （TFF2或SP）及小腸三葉因子（TFF3或ITF）。研究表明，三葉因子的主要表達(dá)位點(diǎn)在胃腸道，由胃腸道黏膜細(xì)胞分泌產(chǎn)生，但具有明顯的區(qū)域和細(xì)胞選擇性。TFF1主要由胃竇和胃體的隱窩及表層上皮的黏膜細(xì)胞產(chǎn)生，TFF2主要在胃竇部表達(dá)，TFF3主要由小腸和大腸黏膜細(xì)胞表達(dá)［3］。

近幾年研究顯示，三葉因子2（TFF2）表達(dá)的部位和水平與GU的關(guān)系非常密切，大量實(shí)驗(yàn)也證實(shí)，TFF2能增加胃黏液糖蛋白的分泌，促進(jìn)胃腸道上皮細(xì)胞移行和修復(fù)，是促進(jìn)潰瘍愈合的重要機(jī)制之一［4-5］。另外，相關(guān)研究顯示，胃癌的發(fā)生與TFF2表達(dá)降低存在明顯的相關(guān)性［6］。

SOD是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶之一，胃潰瘍發(fā)生過(guò)程中氧自由基損傷是重要因素之一，大量試驗(yàn)研究表明，SOD活性下降、抗氧化鐵能力降低，導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激反應(yīng)，是胃潰瘍產(chǎn)生的重要機(jī)制［7-8］。

胃潰瘍屬祖國(guó)醫(yī)學(xué)的 “胃痛”的范疇，其發(fā)生主要是由于外感寒邪、飲食不節(jié)、七情失和、久病體虛等因素引起。根據(jù)臨床表現(xiàn)又分為寒邪客胃證、飲食停滯證、肝氣犯胃證、胃陰虧虛證、脾胃虛弱證等證候。本虛標(biāo)實(shí)，正虛邪戀是臨床胃潰瘍病復(fù)發(fā)、遷延不愈的重要病理基礎(chǔ)［9］，故此，針對(duì)臨床慢性脾胃虛弱型胃潰瘍患者，采用補(bǔ)中益氣活血的方法治療并取得了較好的療效。本方以補(bǔ)中益氣湯為基礎(chǔ)方，加活血化瘀的五靈脂、蒲黃、赤芍等，共湊補(bǔ)中益氣，行氣活血化瘀之功效。補(bǔ)中益氣湯是金元時(shí)期名醫(yī)李東垣創(chuàng)制的治療脾胃病的代表方劑，分別見(jiàn)于 《內(nèi)外傷辨惑論》和 《脾胃論》，主要由黃芪、人參、白術(shù)、升麻、柴胡、當(dāng)歸、陳皮、甘草等組成，全方功在補(bǔ)中益氣，升陽(yáng)舉陷。研究表明，補(bǔ)中益氣湯能明顯減少胃潰瘍的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)胃黏膜細(xì)胞的遷移、增殖和修復(fù)，具有胃黏膜保護(hù)及促進(jìn)胃黏膜修復(fù)重建的作用［10-11］。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以補(bǔ)中益氣湯為基礎(chǔ)方的補(bǔ)中益氣活血方能明顯提升患者血清中TFF2和SOD的表達(dá)水平 （P＜0.05），且治療效果明顯優(yōu)于西藥組。這說(shuō)明補(bǔ)中益氣活血方治療脾胃虛弱型胃潰瘍的作用機(jī)理可能與調(diào)節(jié)胃黏膜中的TFF2和SOD的表達(dá)有關(guān)，通過(guò)提高胃黏膜中TFF2和SOD的水平，促進(jìn)胃黏膜微血管的生成，促進(jìn)胃黏膜的增殖與修復(fù)，從而達(dá)到保護(hù)胃黏膜、治療胃潰瘍的中用。關(guān)于補(bǔ)中益氣活血方促進(jìn)胃黏膜中TFF2和SOD的生成與表達(dá)、促進(jìn)胃潰瘍的修復(fù)與愈合的機(jī)制問(wèn)題，還有待進(jìn)一步深入研究。

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Effects of Buzhong Yiqi Huoxue Form ula on serum TFF2 and SOD in gastric ulcer patients

QIN Jian-she

（Chongqing Three GorgesMedical College，Chongqing 404120，China）

Buzhong Yiqi Huoxue Formula；gastric ulcer；trefoil factor family 2（TFF2；superoxide dismutase（SOD）

R287

A

1001-1528（2015）04-0735-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.04.010

2014-07-03

秦建設(shè) （1978—），男，講師，碩士，主治醫(yī)師，研究方向?yàn)橹嗅t(yī)藏象理論研究。Tel：13594819353，E-mail：iamqjshe@ 163.com