楊玉蘭， 柴 彥， 任愛農(nóng)， 趙 妍， 張 梅

（1.江蘇大學(xué)，江蘇鎮(zhèn)江212013；2.江蘇中豪醫(yī)藥有限公司，江蘇南京210009；3.江蘇省中醫(yī)藥研究院，江蘇南京210028）

舒糖絡(luò)顆粒質(zhì)量標準研究

楊玉蘭1， 柴 彥2， 任愛農(nóng)3*， 趙 妍3， 張 梅3

（1.江蘇大學(xué)，江蘇鎮(zhèn)江212013；2.江蘇中豪醫(yī)藥有限公司，江蘇南京210009；3.江蘇省中醫(yī)藥研究院，江蘇南京210028）

目的建立舒糖絡(luò)顆粒 （葛根、黃連、鬼箭羽、生地、凌霄花）的質(zhì)量標準。方法采用薄層色譜法對該復(fù)方制劑中葛根、黃連、生地、凌霄花進行定性鑒別，并采用高效液相色譜法對主要成分葛根素、鹽酸小檗堿進行定量測定。結(jié)果薄層色譜斑點清晰，在與對照品或?qū)φ账幉南鄳?yīng)的位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾；葛根素和鹽酸小檗堿分別在0.053～0.210mg/mL（r=0.999 7）、0.011～0.192mg/mL（r=0.999 5）范圍內(nèi)線性關(guān)系良好；加樣回收率 （n=6）均值分別為99.2%、101.6%，RSD分別為2.6%、1.1%。結(jié)論所建立的方法操作簡便，準確度高，重復(fù)性好，能全面、有效地控制該制劑的質(zhì)量。

舒糖絡(luò)顆粒；葛根素；鹽酸小檗堿；薄層鑒別；高效液相；質(zhì)量標準

舒糖絡(luò)顆粒是由江蘇省中醫(yī)藥研究院自主研發(fā)的科研制劑，源于該院內(nèi)分泌科臨床經(jīng)驗方，由葛根、黃連、鬼箭羽、生地、凌霄花五味中藥組成，具有活血通絡(luò)、涼血祛瘀、滋陰清熱的功效，臨床上用于治療糖尿病周圍神經(jīng)病變［1］。糖尿病周圍神經(jīng)病變是糖尿病三大慢性并發(fā)癥之一。中醫(yī)理論認為糖尿病周圍神經(jīng)病變屬 “絡(luò)病”范疇，其發(fā)病機理為： “脈絡(luò)瘀滯，不通則痛”和 “脈絡(luò)空虛，不榮則痛”［2］。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對該病提出了血管障礙和代謝紊亂學(xué)說。血管障礙理論認為，長期高血糖可導(dǎo)致血液流變異常，神經(jīng)微血管內(nèi)皮增生，管腔變窄，同時血液黏滯度增高，神經(jīng)內(nèi)滋養(yǎng)血管易發(fā)生堵塞而造成神經(jīng)營養(yǎng)障礙和變性；代謝障礙學(xué)說包括山梨醇、肌醇代謝異常和蛋白非酶糖基化等理論或假說［3］。近代藥理研究表明該方各藥分別具有改善血液循環(huán)和微血管病變，糾正代謝障礙的作用［4-8］，為了便于服用和攜帶，我們將該方采用現(xiàn)代工藝制成穩(wěn)定的中藥制劑，同時為了更加全面控制該制劑的內(nèi)在質(zhì)量，保證臨床用藥的安全有效，本實驗采用薄層色譜法對制劑中葛根、黃連、生地、凌霄花四味藥材進行了較全面的定性鑒別，并采用高效液相色譜法對葛根素及黃連中的生物堿成分進行了定量測定。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（美國Waters公司，2489紫外/可見檢測器，Empower色譜工作站）；AT201梅特勒十萬分之一電子分析天平（瑞士METTLER公司）；KQ-250E醫(yī)用超聲波清洗器 （昆山超聲儀器有限公司）；硅膠G板 （青島海洋化工廠分廠）；薄層紫外檢測儀（瑞士CAMAG公司）；Milli-Q超純水系統(tǒng)（美國Millipore公司）。

葛根素對照品 （批號110752-200912，純度96.0%）、鹽酸小檗堿對照品 （批號713-9204，純度98.14%）、梓醇對照品 （批號110808-200305，純度98.1%）、凌霄花對照藥材 （批號121122-200402）均購自中國食品藥品檢定研究院，舒糖絡(luò)顆粒 （江蘇省中醫(yī)藥研究院自制，批號分別為20140102、20140307、20140522）。

黃連、葛根、生地、凌霄花藥材購自安徽豐原銅陵中藥飲片有限公司，經(jīng)江蘇省中醫(yī)藥研究院任愛農(nóng)研究員鑒定為毛茛科植物黃連Coptis chinensis Franch.的干燥根莖、豆科植物野葛Pueraria lobata（Willd.）Ohwi的干燥根、玄參禾斗植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch.的干燥塊根和紫葳科植物凌霄Campsis grandiflora（Thunb.）K.Schum.的干燥花。

甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 薄層色譜鑒別

2.1 葛根薄層鑒別 取本品2 g，研細，加甲醇10 mL，超聲處理30 min，過濾，濾液水浴蒸干，加甲醇2 mL溶解殘渣，作為供試品溶液；取葛根藥材粉末1 g，同法制成藥材對照品溶液；再取處方中除葛根外的其他原比例各藥材，按制備工藝方法制得陰性顆粒樣品，取陰性顆粒樣品同法制成陰性對照溶液；另稱取葛根素對照品，加甲醇制成0.15 mg/mL的溶液，作為對照品溶液。照 《中國藥典》2010年版附錄ⅥB薄層色譜法項下方法試驗，分別吸取上述溶液各5μL，點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水 （6：4：0.7）為展開劑，預(yù)飽和30 min后展開，取出，晾干，在紫外光 （λ=365 nm）下觀察。3批供試品色譜在與藥材對照品色譜、葛根素對照品色譜相應(yīng)位置上均顯示一組相同的藍色熒光斑點，陰性對照色譜中未見此斑點。見圖1。

圖1 葛根薄層色譜圖Fig.1 TLC chromatogram of Puerariae Radix

2.2 黃連薄層鑒別 取本品2 g，研細，加甲醇25 mL，超聲處理30 min，過濾，濾液水浴蒸干，加甲醇2 mL溶解殘渣，作為供試品溶液；取黃連藥材粉末1 g，同法制成藥材對照品溶液；再取處方中除黃連外的其他原比例各藥材，按制備工藝方法制得陰性顆粒樣品，取陰性顆粒樣品同法制成陰性對照溶液；另稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成0.10 mg/mL的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2010年版附錄ⅥB薄層色譜法項下方法試驗，分別吸取上述溶液各5μL，點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水 （7：1：2）為展開劑，預(yù)飽和30 min后展開，取出，晾干，在紫外光 （λ=365 nm）下觀察。3批供試品色譜在與藥材對照品色譜、鹽酸小檗堿對照品色譜相應(yīng)位置上均顯示一組相同的黃色熒光斑點，陰性對照色譜中未見此斑點。見圖2。

2.3 生地薄層鑒別 取本品2 g，研細，加甲醇20 mL回流提取1 h，放冷，過濾，濾液水浴蒸干，加水5 mL溶解殘渣，再用水飽和正丁醇振搖提取5次，每次10 mL，合并正丁醇液，減壓回收正丁醇液至無醇味，濃縮液水浴蒸干，加甲醇10mL溶解殘渣，作為供試品溶液；取生地藥材粉末2 g，同法制成藥材對照品溶液；再取處方中除生地外的其他原比例各藥材，按制備工藝方法制得陰性顆粒樣品，取陰性顆粒樣品同法制成陰性對照溶液；另稱取梓醇對照品，加甲醇制成0.50 mg/mL的溶液，作為對照品溶液。照 《中國藥典》2010年版附錄ⅥB薄層色譜法項下方法試驗，分別吸取上述溶液各5μL，點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水 （6：4：1）為展開劑，預(yù)飽和30 min后展開，取出，晾干，噴以新鮮配制的1%的茴香醛試液，于105℃下加熱3～5 min。3批供試品色譜在與藥材對照品色譜、梓醇對照品色譜相應(yīng)位置上顯示一組相同的淺紫色斑點，陰性對照色譜中未見此斑點。見圖3。

圖2 黃連薄層色譜圖Fig.2 TLC chromatogram of Coptidis Rhizome

圖3 生地薄層色譜圖Fig.3 TLC chromatogram of Rehmanniae glutinosa

2.4 凌霄花薄層鑒別 取本品0.3 g，研細，加石油醚 （60～90℃）15 m L，超聲處理15 min，過濾，棄去石油醚液，藥渣蒸干，加甲醇15 mL，超聲處理15 min，過濾，濾液水浴蒸干，加甲醇1 mL溶解殘渣，作為供試品溶液；取凌霄花藥材粉末0.5 g，同法制成藥材對照品溶液；再取處方中除凌霄花外的其他原比例各藥材，按制備工藝方法制得陰性顆粒樣品，取陰性顆粒樣品同法制成陰性對照溶液；另取凌霄花對照藥材，同法制成對照藥材溶液；照 《中國藥典》2010年版附錄Ⅵ B薄層色譜法項下方法試驗，分別吸取上述溶液各8μL，點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇 （4：4：1）為展開劑，預(yù)飽和30 min后展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏至斑點顯色清晰。3批供試品色譜在與藥材對照品色譜、對照藥材色譜相應(yīng)位置上顯示一組相同的棕色斑點，陰性對照色譜中未見該組斑點。見圖4。

圖4 凌霄花薄層色譜圖Fig.4 TLC chromatogram of Campsis flos

3 HPLC法測定樣品中成分

3.1 葛根素測定

3.1.1 色譜條件 Thermo C18色譜柱（250 mm× 4.6 mm，5μm）；流動相為甲醇-水 （22：78），體積流量1.0 mL/min；柱溫30℃；檢測波長λ=250 nm；進樣量10μL。按葛根素峰計算理論塔板數(shù)為4 250。

3.1.2 溶液制備

3.1.2.1 對照品溶液制備 精密稱取葛根素對照品1.09 mg，以30%乙醇作為溶劑，定容至10 m L，配制成0.105 mg/mL的葛根素對照品溶液。

3.1.2.2 供試品溶液制備 取批號20140522的舒糖絡(luò)顆粒適量，粉碎。取細粉0.2 g，精密稱定，加30%乙醇20 m L，稱定質(zhì)量，超聲處理 （功率250 W，頻率40 kHz）30 min、取出、放至室溫后用30%乙醇補足減失質(zhì)量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

3.1.2.3 陰性對照溶液制備 取 “2.1”項下陰性顆粒樣品，按 “3.1.2.2”項下制備方法制成葛根陰性對照溶液。

3.1.3 專屬性試驗 分別取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各10μL，按 “3.1.1”項下色譜條件分別進樣，記錄色譜圖，供試品溶液在與葛根素對照品溶液相同的保留時間處顯示相同特征峰，陰性對照溶液無此特征峰，表明該方法專屬性良好。見圖5。

圖5 葛根HPLC圖譜Fig.5 HPLC chromatograms of Puerariae Radix

3.1.4 線性關(guān)系考察 精密稱取葛根素對照品，加入30%乙醇溶液，配制成系列不同質(zhì)量濃度對照品溶液 （0.210、0.187、0.168、0.140、0.105、0.070、0.053 mg/mL），按 “3.1.1”項下色譜條件進行分析，以峰面積積分值為縱坐標 （Y），進樣質(zhì)量濃度為橫坐標 （X），計算得線性回歸方程Y=3.76×107X-7.36×104（r=0.999 7），結(jié)果表明葛根素在0.053～0.210 mg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

3.1.5 檢測限 取葛根素對照品溶液按倍比稀釋法制備測定溶液，按 “3.1.1”項下色譜條件測定，以信噪比S/N=3：1計，葛根素最低檢測質(zhì)量濃度為0.214μg/mL。

3.1.6 定量限 取葛根素對照品溶液按倍比稀釋法制備測定溶液，按 “3.1.1”項下色譜條件測定，以信噪比S/N=10：1計；平行6份。葛根素最低檢測質(zhì)量濃度平均為0.535μg/mL，其RSD為1.2%。

3.1.7 精密度試驗 吸取對照品溶液10μL，按 “3.1.1”項下色譜條件連續(xù)進樣6次，測定葛根素對應(yīng)吸收峰面積。其平均峰面積積分值為3 871 803，其RSD為0.3%，表明儀器精密度良好。

3.1.8 重復(fù)性試驗 取“3.1.2.2”項下舒糖絡(luò)顆粒細粉0.2 g，按該項下方法制備供試品溶液，平行處理6份，按 “3.1.1”項下色譜條件分別進樣，測定葛根素對應(yīng)吸收峰面積，計算得葛根素平均含有量為9.55 mg/g，其RSD為1.1%，表明該方法重復(fù)性良好。

3.1.9 中間精密度 取“3.1.2.2”項下舒糖絡(luò)顆粒細粉0.2 g，按該項下方法制備供試品溶液；分別在不同人員、實驗儀器和色譜柱，按“3.1.1”項下色譜條件測定，計算供試品中葛根素的量，經(jīng)t檢驗P值為0.19，P＞0.05，表明組間無顯著性差異。結(jié)果見表1。

表1 葛根素中間精密度試驗結(jié)果Tab.1 Results of intermediate p recision for puerarin

3.1.10 穩(wěn)定性試驗 取“3.1.2.2”項下舒糖絡(luò)顆粒細粉0.2 g，按該項下方法制備供試品溶液，在室溫 （25℃）條件下，按 “3.1.1”項下色譜條件于制備后0、1、2、4、6、8、12 h分別進樣，測定葛根素對應(yīng)吸收峰面積，計算得葛根素平均含有量為9.41 mg/g，其RSD為0.9%，表明在室溫條件下供試品溶液12 h內(nèi)穩(wěn)定。

3.1.11 回收率試驗 取“3.1.2.2”項下舒糖絡(luò)顆粒細粉0.1 g，共6份，每份分別精密加入質(zhì)量濃度為0.200 mg/mL的葛根素對照品溶液5 mL，按 “3.1.1”項下色譜條件分別測定，計算回收率（外標法）。結(jié)果見表2。

表2 葛根素回收率試驗結(jié)果Tab.2 Results of recovery tests for puerarin

3.1.12 樣品測定 分別取3批舒糖絡(luò)顆粒樣品，按 “3.1.2.2”項下供試品制備方法制備供試品溶液，按 “3.1.1”項下色譜條件分別對3批樣品進行測定，計算葛根素量。見表3。

表3 舒糖絡(luò)顆粒中葛根素測定結(jié)果 （n=3）Tab.3 Determ ination results of puerarin in Shutangluo Granules（n=3）

3.2 鹽酸小檗堿測定

3.2.1 色譜條件 Thermo C18色譜柱（250 mm× 4.6 mm，5μm）；流動相為乙腈-0.05 mol/L磷酸二氫鉀 （50：50） （每100 m L流動相中加十二烷基硫酸鈉0.4 g，再以磷酸調(diào)節(jié)pH=4），體積流量1 mL/min；柱溫30℃；檢測波長λ=345 nm；進樣量10μL。按鹽酸小檗堿峰計算理論塔板數(shù)為11 660。

3.2.2 溶液制備

3.2.2.1 對照品溶液制備 精密稱取鹽酸小檗堿對照品0.65 mg，以甲醇作為溶劑，定容至10 m L，配制成0.064 mg/mL的鹽酸小檗堿對照品溶液。

3.2.2.2 供試品溶液制備 取批號20140522的舒糖絡(luò)顆粒適量，粉碎。取細粉2.5 g，精密稱定，加甲醇-鹽酸 （100：1）25 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，取出放至室溫后用甲醇補足減失質(zhì)量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

3.2.2.3 陰性對照溶液制備 取 “2.2”項下陰性顆粒樣品，按 “3.2.2.2”項下制備方法制備黃連陰性對照溶液。

3.2.3 專屬性試驗 分別取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各10μL，按 “3.2.1”項下色譜條件分別進樣，記錄色譜圖。供試品溶液在與鹽酸小檗堿對照品溶液相同的保留時間處，顯示相同特征峰，陰性對照溶液無此特征峰，表明該方法專屬性良好。見圖6。

圖6 黃連HPLC圖Fig.6 HPLC chromatogram s of Coptidis Rhizome

3.2.4 線性關(guān)系考察 精密量取鹽酸小檗堿對照品，加入甲醇溶液，配制系列不同質(zhì)量濃度對照品溶 液 （0.192、0.144、0.096、0.064、0.038、0.021、0.011 mg/mL），按 “3.2.1”項下色譜條件進行分析，以峰面積積分值為縱坐標 （Y），進樣質(zhì)量濃度為橫坐標 （X），計算得到線性回歸方程Y=3.65×107X+5.58×104（r=0.999 5），結(jié)果表明鹽酸小檗堿在0.011～0.192 mg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

3.2.5 檢測限 取葛根素對照品溶液按倍比稀釋法制備測定溶液，按 “3.2.1”項下色譜條件測定，以信噪比S/N=3：1計，鹽酸小檗堿最低檢測質(zhì)量濃度為0.064μg/mL。

3.2.6 定量限 取葛根素對照品溶液按倍比稀釋法制備測定溶液，按 “3.2.1”項下色譜條件測定，以信噪比S/N=10：1計，鹽酸小檗堿最低檢測質(zhì)量濃度為0.026μg/mL，其RSD值為2.8%。

3.2.7 精密度試驗 吸取對照品溶液10μL，按“3.2.1”項下色譜條件連續(xù)進樣6次，測定鹽酸小檗堿對應(yīng)吸收峰面積。其平均峰面積積分值為240 850，其 RSD為 0.5%，表明儀器精密度良好。

3.2.8 重復(fù)性試驗 取“3.2.2.2”項下舒糖絡(luò)顆粒細粉2.5 g，按該項下方法制備供試品溶液，平行處理6份，按 “3.2.1”項下色譜條件分別進樣。測定鹽酸小檗堿對應(yīng)吸收峰面積，計算得鹽酸小檗堿平均含有量為0.47mg/g，其RSD為1.6%，表明該方法重復(fù)性良好。

3.2.9 中間精密度 取“3.2.2.2”項下舒糖絡(luò)顆粒細粉2.5 g，按該項下方法制備供試品溶液；分別在不同實驗人員、實驗儀器和色譜柱的條件下，按 “3.2.1”項下色譜條件測定，計算供試品中鹽酸小檗堿的量，其平均含有量分別為0.49和0.47 mg/g，P=0.06，P＞0.05，表明組間無顯著性差異。見表4。

表4 鹽酸小檗堿中間精密度實驗結(jié)果Tab.4 Results of intermed iate precision for berberine hydrochloride

3.2.10 穩(wěn)定性試驗 取“3.2.2.2”項下舒糖絡(luò)顆粒細粉2.5 g，按該項下方法制備供試品溶液，在室溫 （25℃）條件下，按 “3.2.1”項下色譜條件于制備后0、1、2、4、6、8、12 h分別進樣，測定鹽酸小檗堿吸收峰面積，計算得鹽酸小檗堿平均含有量為0.47 mg/g，其RSD為2.1%，表明室溫條件下供試品溶液12 h內(nèi)穩(wěn)定。

3.2.11 回收率試驗 取“3.2.2.2”項下已知鹽酸小檗堿含有量的舒糖絡(luò)顆粒細粉約1.25 g，共6份，每份中分別精密加入質(zhì)量濃度為0.122 mg/m L的鹽酸小檗堿對照品溶液5 m L，并按照“3.2.2.2”項下方法制備供試品溶液，按“3.2.1”項下色譜條件分別測定，計算回收率（外標法）。見表5。

表5 鹽酸小檗堿回收率試驗結(jié)果Tab.5 Results of recovery tests for berberine hydrochloride

3.2.12 樣品測定 分別稱取3批舒糖絡(luò)顆粒樣品（n=3），按照 “3.2.2.2”項下供試品制備方法制備供試品溶液，按 “3.2.1”項下色譜條件分別對3批樣品進行測定，計算鹽酸小檗堿量。見表6。

3.2.13 樣品中黃連系列生物堿測定 以未知成分的色譜峰與鹽酸小檗堿色譜峰的相對保留時間、黃連藥材系列生物堿色譜峰的保留時間以及對應(yīng)光譜圖作對照，確定表小檗堿、黃連堿和巴馬汀色譜峰，并以鹽酸小檗堿對照品的峰面積作對照，分別計算上述3種生物堿的量。見表7，圖7。

表6 舒糖絡(luò)顆粒中鹽酸小檗堿測定結(jié)果 （n=3）Tab.6 Results of determ ination of Shutangluo Granules（n=3）

表7 樣品中其他生物堿含有量Tab.7 Other alkaloid contents from samples

圖7 表小檗堿、黃連堿及巴馬汀光譜圖Fig.7 Spectral patterns of epiberberine，coptisine and palmatine

4 討論

《中國藥典》2010年版規(guī)定，梓醇和毛蕊花糖苷同為生地藥材的薄層鑒別的指標性成分。但對舒糖絡(luò)顆粒中梓醇進行薄層鑒別時，前處理僅采用《中國藥典》2010年版甲醇回流提取的方法，供試品色譜中色帶明顯，梓醇斑點模糊，為了對梓醇進行富集和減少其他成分的干擾，本實驗考察了用乙酸乙酯、正丁醇和三氯甲烷萃取的方法，結(jié)果表明，正丁醇萃取后供試品及藥材中梓醇斑點較清晰，故將梓醇鑒別列入正文。采用 《中國藥典》2010年版方法對舒糖絡(luò)顆粒中毛蕊花糖苷進行薄層鑒別時，供試品色譜中未見毛蕊花糖苷的斑點，可能是由于水提取過程中毛蕊花糖苷發(fā)生了水解反應(yīng)，生成5-羥甲基糠醛［9］，且為生地和凌霄花的共有成分，故未將毛蕊花糖苷列入鑒別正文。

在對葛根素進行定量測定的過程中，以葛根素提取率為指標，分別對提取方法 （超聲、回流）、提取溶劑 （30%、70%和95%乙醇）和提取時間（15、30和45 min）3個因素進行了考察。結(jié)果顯示，采用30%乙醇提取30 min提取效率較高，而提取方式對提取效率無影響，考慮到超聲提取方法更簡便，故采用超聲提?。?0］。在對黃連生物堿進行定量測定中，以鹽酸小檗堿提取率為考察指標，分別對提取溶劑 （甲醇-鹽酸50：1、100：1、150：1）和超聲時間 （15、30和45 min）2個因素進行了考察。結(jié)果顯示，以甲醇-鹽酸 （100：1）為溶劑、超聲30 min或45 min鹽酸小檗堿提取效率最高，提示超聲30 min便可將鹽酸小檗堿提取完全。

實驗過程中，曾嘗試對制劑中已知成分梓醇和毛蕊花糖苷進行定量測定。但是，在測定過程中發(fā)現(xiàn)梓醇不穩(wěn)定，可能是因為處方藥材經(jīng)合煎后pH發(fā)生了改變，梓醇中存在的糖苷配體在弱酸條件下易發(fā)生水解反應(yīng)［11］。而毛蕊花糖苷在制劑中含有量極少，同樣也很不穩(wěn)定［9］，故未將上述兩種成分列入標準。

樣品中黃連系列生物堿成分的定位首先參考《中國藥典》2010年版一部黃連項下，以待測成分色譜峰與鹽酸小檗堿色譜峰的相對保留時間定位，為排除樣品中其他藥材成分的干擾，同時以黃連藥材中的系列生物堿色譜峰的保留時間以及對應(yīng)光譜圖作對照，最終確定了表小檗堿、黃連堿和巴馬汀3個生物堿成分色譜峰的位置。

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Quality control of Shutangluo Granules

YANG Yu-lan1， CHAIYan2， REN Ai-nong3*， ZHAO Yan3， ZHANG Mei3

（1.Jiangsu University，Zhenjiang 212013，China；2.Jiangsu Zhonghao Medicine Company，Nanjing 21009，China；3.Jiangsu Provincial Institute of Traditional Chinese Medicine，Nanjing 210028，China）

AIMTo establish the quality control of Shutangluo Granules（Puerariae lobatae Radix，Coptidis Rhizoma，Euonymusalarus，Rehmanniaeglutinosa，CampsisFlos）.METHODSTLCwasused to identify Puerariae lobataeRadix，Coptidis Rhizoma，Rehmanniae glutinosa，and Campsis Flos.The quantitative determination ofpuerarin and berberine hydrochloride was completed by HPLC.RESULTSThe spots in TLC were clear without interference.And the same color spots appeared in the corresponding position of references and reference drugs. The linear ranges of puerarin and berberine hydrochloridewere 0.053-0.210 mg/mL（r=0.999 7），and 0.011 -0.192 mg/mL（r=0.999 5），respectively.The average sample recoveries of puerarin，berberine hydrochloride were 99.2%（RSD=2.6%），and 101.6%（RSD=1.1%），respectively.CONCLUSIONThe quality control established is simple，accurate，reproducible and specific，which can be used for the quality control of Shutangluo Granules.

Shutangluo Granules；puerarin；berberine hydrochloride；TLC；HPLC；quality standard

R927.2

A

1001-1528（2015）04-0785-08

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.04.020

2014-08-01

江蘇省社會發(fā)展科技計劃、醫(yī)藥高技術(shù)計劃項目 （BS2007091）

楊玉蘭 （1989—），女，碩士生，從事藥物新劑型與新技術(shù)研究。

*通信作者：任愛農(nóng)（1957—），女，研究員。Tel：（025）85639647，E-mail：lyyy-0@126.com