王 雨 李亦婕 王 越 劉 昕 李 萍*

（貴州省遵義市遵義醫(yī)學院附屬口腔醫(yī)院，貴州 遵義 563003）

淫羊藿苷在腫瘤細胞抑制方面的研究進展

王 雨 李亦婕 王 越 劉 昕 李 萍*

（貴州省遵義市遵義醫(yī)學院附屬口腔醫(yī)院，貴州 遵義 563003）

中草藥相比較于化學療法治療腫瘤有著獨特的優(yōu)勢，它的不良反應小，而且價格也比化療藥物便宜。淫羊藿苷是從淫羊藿屬植物莖葉中提取的總黃酮的有效成分，國內外有關于它的抗瘤報告非常多，確實也發(fā)現其有抑制腫瘤細胞增殖、誘導腫瘤細胞凋亡和分化的功效，但大多還停留在體外實驗階段。淫羊藿苷作為一種新型的抗瘤藥物具有廣遠的應用前景，所以還期待更多的體內和臨床實驗的開展。

淫羊藿苷；腫瘤抑制；研究現狀

淫羊藿是由小檗科淫羊藿屬植物曬干的莖葉中提煉的一種中草藥，黃體酮是它其中主要的化學成分之一，而黃酮類的有效成分主要是淫羊藿苷（icariin，ICA），其一般呈淡黃色，以粉末的形式存在。有報道其對于壯陽補腎、改善心血管系統(tǒng)功能、調節(jié)內分泌、增強免疫、抗腫瘤等均有療效，其中對于抗腫瘤的作用受到國內外眾多學者的重視，關于其抗腫瘤的藥理機制主要表現在抑制腫瘤細胞增殖、促進腫瘤細胞凋亡、誘導腫瘤細胞分化、抑制腫瘤細胞轉移、逆轉腫瘤細胞免疫逃逸等方面。現就國內外有關其抗腫瘤機制的研究作一綜述。

1 對肺癌的作用

肺癌是發(fā)病率和病死率增長最快，對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。肺癌的發(fā)病機制至今仍不完全明確，因此，盡快弄清肺癌的發(fā)病機制并且研究出一種新藥去克服肺癌是我們所有醫(yī)學研究人員應盡的職責。早在2004年我國的研究人員薛興奎等[1]就利用MTT法，采用同一濃度的ICA處理肺癌細胞，在不同的時間點檢測細胞的增殖抑制率，結果發(fā)現與對照組細胞相比較，ICA作用細胞24 h后細胞增殖抑制率隨著時間的延長而逐漸增強。流式檢測ICA用藥實驗組和對照組細胞表面Fas、FasL分子的表達情況，結果發(fā)現200 μg/mL ICA處理72 h后，PG細胞表面Fas抗原表達率較對照組明顯升高而Fasl降低。MTT法檢測ICA對CD3AK細胞殺傷PG細胞作用的影響，結果發(fā)現ICA可以顯著提高CD3AK細胞對PG細胞的殺傷活性。流式細胞儀觀察細胞凋亡，結果發(fā)現，PG細胞和JurkatT細胞共同培養(yǎng)時，ICA處理組的T細胞凋亡率較對照組有所降低。結合上述實驗數據，作者分析PG細胞表面FasL呈較高表達，Fas表達較低，而Jurkat細胞高表達Fas，和活化后的T淋巴細胞相似，而且它的FasL呈低表達，在采用PG細胞與Jurkat T細胞共培養(yǎng)中發(fā)現PG細胞能夠誘導Jurkat T細凋亡。所以作者推測PG細胞表面的FasL可能與JurkatT細胞表面的Fas結合，通過Fas/FasL途徑誘導T淋巴細胞凋亡來逃避免疫系統(tǒng)的攻擊。ICA可有效上調PG細胞Fas的表達，下調FasL的表達。在PG細胞與Jurkat T細胞的共培養(yǎng)中發(fā)現，ICA處理的T淋巴細胞凋亡率有下降，表明ICA在一定程度上阻斷了PG細胞對T淋巴細胞通過Fas/FasL途徑的攻擊，其機制與上調Fas、下調FasL表達有關。另外作者用流式細胞儀檢測了用IL-2和CD3單抗誘導培養(yǎng)第5天的CD3AK細胞，發(fā)現CD3AK細胞既表達Fas，也表達FasL，又因為ICA有下調PG細胞FasL表達、上調Fas表達的功能，所以作者認為對Fas/FasL途徑的調節(jié)也可能是ICA提高PG細胞對CD3AK細胞的殺傷敏感性的機制之一。但腫瘤免疫逃逸的機制較多而且又復雜，腫瘤細胞是怎樣表達無功能的Fasl，得以逃避活化T淋巴細胞的攻擊，在體內腫瘤細胞和免疫細胞是如何相互作用的，還需要進一步研究。

2 對胃癌的作用

胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，具有起病隱匿、發(fā)展迅速、病死率高的特點，往往經發(fā)現已經處于中晚期，失去了手術根治的機會，只能依靠術前的放化療來縮小病灶，爭取手術機會[2]。因此早日弄清胃癌發(fā)病和侵襲轉移的內在機制并且對此研究出相應的藥物迫在眉睫。因為癌細胞不同于正常的細胞，它的生長分裂不受相關生長因子的調控，而是呈現無限制的增殖，因此抑制胃癌細胞的無限增殖對于治療胃癌具有重要的意義。我國的相關人員段文飛等[3]利用MTT和流式（PI法）測得實驗組與對照組比較，低、中、高濃度組均對SGC-7901細胞有抑制作用，且呈一定的量效、時效關系。ICA使胃癌細胞G0/G1期的比例明顯升高，G2/M期細胞比例減少，由此使得處于分裂期的細胞進入靜止期，也許ICA就是通過改變癌細胞的分裂周期來抑制癌細胞的增殖，但這僅僅是從細胞水平分析的，但ICA在分子和基因水平是怎樣改變癌細胞的分裂周期和抑制癌細胞的增殖還需要進一步的研究。

3 對肝癌的作用

肝癌在我國乃至全世界都是比較常見的惡性腫瘤之一，而且因為其具有傳染性，肝病患者常常被社會孤立和歧視，所以研究出一種專門針對肝癌并且能治愈肝癌的新藥尤為重要，2012年我國的相關研究人員朱燕輝等[4]用不同濃度的淫羊藿苷處理SMMC-7721細胞株后，在不同時間點檢測各組細胞的增殖抑制率，與對照組細胞相比較，各濃度的淫羊藿苷均能明顯抑制SMMC-7721細胞的增殖，并呈明顯的時間與濃度依賴性。既然ICA能夠抑制腫瘤細胞的增殖，但它又是怎么抑制腫瘤的增殖以及其中的內在機制是什么呢？所以作者又用不同濃度淫羊藿苷作用SMMC-7721細胞48 h后，再用流式細胞儀檢測細胞周期及凋亡情況，結果顯示淫羊藿苷能夠呈濃度依賴性的使得SMMC-7721細胞S期和G2/M減少，G0/G1增多，從而促進凋亡。所以作者認為ICA能夠阻滯腫瘤細胞的細胞周期的進展，從而促進細胞的凋亡可能是其抑制腫瘤細胞增殖的一個重要原因。但ICA在分子和基因水平是怎樣改變腫瘤細胞周期和促進它的凋亡呢？PCNA是伴隨細胞增殖而表達的一種核內蛋白，所以測定該因子在肝癌細胞中的表達情況就可以初步推測ICA阻滯腫瘤細胞周期進展的內在機制。細胞凋亡是一種由基因控制的細胞自主性死亡方式[5]，上述實驗證實ICA能夠有效促進腫瘤細胞的凋亡，可能有些凋亡相關因子的參與，Bax是Bcl-2家族中研究最廣泛的促凋亡蛋白[6]，所以該作者又進行了Western blot實驗發(fā)現不同濃度的ICA作用肝癌細胞48 h后，SMMC-7721細胞PCNA的蛋白表達水平隨著ICA濃度的增加而逐漸下降，同時隨著ICA濃度的增高，Bcl-2的表達逐漸降低，而Bax表達逐漸增高，呈顯著的濃度依賴性。結合以上所述，所以作者認為ICA可能是通過下調PCNA蛋白的表達使S期細胞減少，G0/G1細胞增加，而且Bcl-2蛋白表達下調，Bax蛋白表達上調，增大Bax/Bcl-2的比值，可能共同參與了凋亡途徑，促使SMMC-7721凋亡。

4 對其他腫瘤的抑制作用。

4.1 對宮頸癌的作用。宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，近年來其發(fā)病有年輕化的趨勢，因此弄清宮頸癌的發(fā)病機制和研究出一種科學的針對宮頸癌的新藥是廣大醫(yī)藥工作者的責任。2011年我國的相關領域的研究人員杜道兵等[7]體外實驗利用MTT法檢測淫羊藿苷對宮頸癌TC-1細胞的增殖抑制作用，結果顯示ICA對TC-1具有明顯的增殖抑制，而且呈現劑量、時間依賴性。同時該作者還進行了Dapi核染色和PI流式檢測，結果顯示淫羊藿苷作用細胞后鏡下呈現明顯的細胞凋亡特征，所以作者認為ICA具有抑制宮頸癌細胞增殖和促進該癌細胞凋亡的作用。雖然本實驗僅僅只是從細胞水平分析ICA的抗腫瘤作用，但此實驗為進一步實驗研究ICA在分子和基因水平的抑瘤機制墊定了一定的基礎。

4.2 對前列腺癌的作用。植物雌激素具有治療前列腺癌的療效[8]，淫羊藿苷具有雌二醇相似的結構，具有植物雌激素樣作用，對前列腺癌細胞也表現出增殖抑制的作用。HUANG等比較了ICA和ICT對前列腺癌細胞的作用，結果顯示ICA對前列腺癌細胞的抑制作用強于ICT[9]。

5 結 語

淫羊藿苷是一種具有很大應用前景的抗癌藥物，因為其本身是植物提取物，屬于中草藥類，相比較西藥的抗癌作用，它的不良反應非常小，但目前關于其抑瘤作用的研究還停留在體外研究和很少的動物體內研究，雖然取得了一些很好的結果，也摸索出了其中的一些機制和相關的作用因子，但最終能否應用于人體且產生抑瘤作用，才是鑒證藥物價值的最終標準，所以希望今后會有更多的更深入的實驗和體內研究的開展，最終研究出一種針對癌癥且能治愈癌癥的新藥。

[1]薛興奎,張玲,王蕓.ICA、PJA逆轉人高轉移肺癌細胞Fas/FasL途徑免疫逃逸機制的研究[J].中國免疫學雜志,2004,20(2):102-105.

[2]Ajani JA,Mansfied PE,Janjan N,et al.Mulleins titutional trial of preoperative chemoradiotherapy in patients with potentially respectable gastric carcinoma[J].J Clin Oncol,2004,22(14):2774-2780.

[3]段文飛,蘇繼榮,付小梅.淫羊藿苷對胃癌細胞株SGC-7901增殖的影響[J].中國醫(yī)藥指南,2009,7(24):17-19.

[4]朱燕輝,黃麗霞.淫羊藿苷對肝癌細胞株SMMC-7721增殖與凋亡的影響[J].中國普通外科雜志,2012,21(8):968-972.

[5]Karam JA,Lotan Y,Karakiewicz PI,et al.Use of combinedapoptosis biomarkers for prediction of bladder cancer recurrenceand mortality after radical cystectomy[J].Lancet Oncol,2007,8(2):128-136.

[6]Oltvai ZN,Milliman CL,Korsmeyer SJ.Bcl-2 heterodimerizes invivo with a conserved homolog,Bax,that accelerates programmedcell death [J].Cell,1993,74(4):609-619.

[7]杜道兵,盧萬根,曹叢仁.淫羊藿苷促進宮頸癌TC-1細胞凋亡作用的研究[J].現代生物醫(yī)學進展,2011,11(4):646-649.

[8]劉海平,左文述,李會慶.植物雌激素與前列腺癌[J].腫瘤防治雜志,2003,10(3):325-328.

[9]Huang X,Zhu DY,Lou YJ.A novel anticancer agent,icaritin,induced cellgrowth inhibition,g1 arrest and mitochondrial transmembrane potential drop in huaman prostate carcinoma PC-3 cells[J].Eur J Pharmacol,2007,564(1):26-36.

R730.5

A

1671-8194（2015）04-0050-02

遵研創(chuàng)合字（編號：cx201313）

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