劉樹生

山東省青州市婦幼保健院，山東青州 262500

比色分析是生化自動分析的主要原理，利用不同價態(tài)元素特定的顏色對溶液粒子濃度進行分析，從而判斷反應物及生成物的增加或減少。催化物、反應物等測定物質的濃度同離子顏色成正比關系，可以通過與標準精準含量物質相對比的方式，分析樣品的物質含量。在化學平衡條件下，依據公式，參考將標準物質同樣品吸光度的值，即可測定樣品的含量。

1 分析過程外對生化自動分析結果的影響因素及對策

1.1 生理因素

生理因素是影響生化自動分析結果的一個重要因素，可以分為不可控因素、可控因素，具體包括季節(jié)變化、體位變化、生理性波動、妊娠、運動、海拔、性別、生活方式、情緒和年齡等多方面內容。

性腺激素含量會因性別的不同存在差異，女性血清水平普遍低于男性，女性不同生理周期內性腺激素也會不斷變化。針對這一問題應針對性別的不同，合理設置檢測項目和參考范圍，降低對生化自動分析檢測結果的影響；同成年人相比，新生兒和生長期兒童的血清總膽紅素、堿性磷酸酶水平各不相同，生化檢測結果會因年齡的不同而改變，應在實際檢測過程中要針對年齡階段的不同而制定準確的參考范圍[1]；受運動因素的影響，機體代謝速度加快，生化檢測結果也會不同，在對患者進行檢測時，應盡量選擇清晨或起床前對住院病人進行抽血檢測，門診患者應在休息15 min后進行。

1.2 飲食因素

人體多種血液成分都會受飲食的影響，不飽和脂肪酸食物、高蛋白食品、咖啡因等多種食物分別會使膽固醇降低、BUN、UA升高和游離脂肪酸、腎上腺素含量增加[2]。進食后進行生化分析，還會因血脂質的增多使血漿、血清呈現乳白渾濁狀態(tài)，影響生化自動分析等操作，干擾比色和檢測的精確程度。為了避免飲食對生化檢測結果帶來的影響，應采取空腹采血的方式，保證患者空腹時間在16 h內，從而提高分析的準確性。

1.3 標本采集因素

患者進行標本采集工作時間的不同，會導致血液化學成分發(fā)生較大的變化，在波動的狀況下很難保證生化檢測結果的精確程度。在臨床樣本采集時盡量選取統(tǒng)一的時間標準，在進食12 h后或清晨空腹時進行采集，確保檢驗條件相符，使檢測結果可以反應患者的真實狀況。此外，血液標本采集部位也是影響生化檢測結果的因素之一，應將血清標準作為主要的臨床生化分析樣本，排除標本采集部位的干擾。

1.4 藥物因素

化學、物理干擾是藥物影響生化自動分析結果的兩個關鍵因素，其中前者主要是因為藥物化學性質干擾患者的物質測定，而后者為患者血清物理性質因藥物分解而產生的影響。如果長期服用藥物，患者肝腎功能也會受藥物副作用的影響，從而干擾生化檢測結果。住院患者在給予點滴輸注治療后，導致部分項目檢測因留取標本稀釋而低于正常值，使檢測結果不夠準確。在排除藥物干擾因素時，工作人員要在停藥后對患者進行采取樣本，避開服藥4 h或靜點時間段。

1.5 標本處理及儲存因素

臨床檢驗工作人員在接收檢測樣本后，應先對樣本進行10 min的水?。?5℃），利用離心機處理5 min，離心轉速為3000 rpm，將血清分離開來。標本處理后，如果放置時間過長，會使樣本發(fā)生溶血現象，還會因為葡萄糖的利用及酵解而降低血清樣本中葡萄糖的含量，不同元素的含量及部分酶的活性也會發(fā)生的變化，造成生化檢測結果高于實際測定值[3]。所以應在規(guī)定的時間內盡早進行檢測分析，如需儲存時，要在密封條件下，在冰箱（4℃）中保存。

2 化學反應條件對生化自動分析結果的影響因素及對策

2.1 濕度因素

化學反應過程中，濕度對生化檢測結果的影響主要體現在以下兩個方面：在0～4℃的條件下，酶參與的反應不會發(fā)生改變，但酶活性會因濕度的增大而降低，從而降低了反應速度；無酶參與的反應中，反應速度會隨濕度的增大而加快。最佳濕度的選擇是保障生化檢測準確性的前提，要參考試劑規(guī)定標準，合理調節(jié)濕度范圍。

2.2 反應物濃度因素

反應速度同反應物濃度有直接的關系，反應物濃度越大反應速度越快，試劑穩(wěn)定較差、樣本過早消耗都會使底物濃度發(fā)生變化，致使?jié)舛鹊陀趯嶋H標準，生化檢測結果偏低。而在生化自動分析過程中，采用比色方法進行操作時，應嚴格的控制相應的范圍，超出范圍會導致生化檢測結果過高。通過機械設定極限值的方法，可以更好的限制反應物濃度值，超出標準后會自動啟動警報器，需要進行調節(jié)后在進行檢測。在確定參考范圍時，可以取線性范圍的極限值，還采用生化自動分析儀檢測吸光度，若反應物吸光度不符合標準數值時，要重新進行配置。

2.3 催化劑因素

激活劑、抑制劑和酶濃度是催化劑因素對生化自動分析結果的主要體現，其中抑制劑對反應的進行起到阻礙的作用，而激活劑可以加快反應速度，在試劑中添加這兩種催化劑后，很容易發(fā)生試劑交叉感染、反應盤感染等問題。除此之外，比色皿透光性、光徑，生化自動分析儀掃描寬度、中心波長，介質成分和稀釋程度等因素都會影響計算結果。實際分析檢測時，要詳細的確定各項實驗條件，如果外界反應條件出現變化，應重新進行分析檢測。要想使酶濃度與酶反應速度呈線性關系，應確保反應物的濃度，當分析檢測物質屬于酶的情況，要避免濃度過大，一旦超出標準，要及時進行稀釋處理，重新測定。

2.4 pH值因素

酶分子的解離狀態(tài)會因pH值的變化而發(fā)生改變，不同PH值條件下，反應物與酶相互結合的過程受到干擾，最終導致化學反應速度減慢，加樣針污染、反應盤污染是pH值影響生化檢測結果的兩個主要方面。檢測試劑在進行自動分析的過程中，由于樣品量較少，所以酸堿程度的差異會嚴重影響試劑檢測結果，酸堿緩沖物質無法發(fā)揮較大的作用[4]。在生化自動分析時，一定要將反應盤進行徹底的清洗，分別用清水、含氯消毒劑、蒸餾水進行沖洗和浸泡消毒，晾干后即可應用于臨床分析檢測。此外，在加樣前，要利用蒸餾水對加樣針進行熏蒸，降低樣本感染情況的發(fā)生機率，就是更換蒸餾水清洗液，杜絕一切感染源。

3 生化自動分析儀的使用影響因素及對策

除分析過程外干擾因素、化學反應條件干擾因素外，生化自動分析儀是否正常使用也會對檢測結果產生一定程度的影響。如果操作使用不規(guī)范，就會增大重復檢測的次數。因此一定要加強對工作人員的約束，做好反應試劑、定標物質選取等工作，參照使用說明，提高測定結果的準確性。

臨床測量工作人員在使用生化自動分析儀時，一定要根據操作規(guī)范進行測量，并定期對儀器進行保養(yǎng)，做好日、周、月的維護工作。遇到檢測項目轉移的情況，應徹底清洗比色皿，對剩余試劑進行合理的處理，以免影響后期分析檢測工作的順利進行。在試劑使用前，一定要查看是否在使用期限內，并依據具體說明對相關參數進行合理的設置，儲存試劑的環(huán)境溫度要控制在2℃～8℃的范圍內。如果試劑發(fā)生污染的情況，要適當使吸液量增大，通常將項目檢測試劑的吸液量標準設為400～700 uL，通常選取500 uL，提升生化測定精確度，將交叉感染限制在1%的范圍[5]。

在對樣品進行處理的過程中，要做到以下幾點：避免樣品在不封閉的狀況下放置時間過長；依據規(guī)范標準，合理儲存、處理樣品；測定時要降低樣品中防腐劑、藥物和抗凝劑等物質的影響；確保樣品無渾濁、凝塊的現象；作樣本空白，降低乳糜微粒和溶血對生化測定結果的干擾。在選擇延遲時間設定方法、測試方法時，盡量選取兩點法、速率法及終點法等。在應用兩點法時，應作樣本空白；而采取速率法時，在37℃、30℃和25℃的環(huán)境下，要分別確保15 s、12 s和10 s以上的延時；使終點法的延時時間在10 s以上。

[1]王瑞麗,孫中立,劉好.影響臨床生化自動化分析前質量的因素[J].中國誤診學雜志，2008(35):8633-8634.

[2]李熙建.臨床生化檢驗前過程對檢驗質量的影響分析[J].中國誤診學雜志，2008(16):3807-3808.

[3]王興寧,李靜.臨床生化自動化分析后的質量控制[J].實用醫(yī)技雜志，2005(2):223.

[4]朱國朝,袁紅萍.臨床生化定量測定室內質量控制方法的設計和應用[J].現代檢驗醫(yī)學雜志，2003(3):39-40.

[5]高佩增,張健,楊清溪.全自動生化分析儀應用的質量保證[J].中國誤診學雜志，2002(3):463.