舒鑫標(biāo) 沈建軍 胡永明

（浙江大飛龍動(dòng)物保健品有限公司,浙江金華 321000）

豬藍(lán)耳病弱毒疫苗對(duì)豬瘟抗體水平的影響

舒鑫標(biāo) 沈建軍 胡永明*

（浙江大飛龍動(dòng)物保健品有限公司,浙江金華 321000）

為探索豬群免疫豬藍(lán)耳病弱毒疫苗對(duì)豬瘟免疫抗體水平的影響，本試驗(yàn)在某規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行了為期一年的藍(lán)耳病抗體與豬瘟抗體水平監(jiān)測(cè)。試驗(yàn)結(jié)果表明，豬藍(lán)耳弱毒疫苗免疫后藍(lán)耳野毒感染率平均達(dá)到64%，藍(lán)耳抗體S/P平均值均已超過(guò)2.5，藍(lán)耳弱毒疫苗免疫之后，豬瘟抗體陽(yáng)性率平均值僅為77%，且抗體離散度平均值僅達(dá)到39%，兩項(xiàng)指標(biāo)均較差，豬瘟抗體不合格。說(shuō)明藍(lán)耳弱毒苗不能對(duì)該場(chǎng)的藍(lán)耳病起到保護(hù)作用，不能有效的控制藍(lán)耳野毒感染；同時(shí)由于藍(lán)耳弱毒苗的使用反而造成的豬瘟抗體水平偏低。

豬藍(lán)耳病弱毒疫苗 豬瘟 抗體 影響

豬藍(lán)耳病與豬瘟仍是我們養(yǎng)豬業(yè)最常見(jiàn)的兩種病毒性傳染病，在生產(chǎn)實(shí)踐中，豬藍(lán)耳病、豬瘟混合感染的情況也越來(lái)越多，同時(shí)，兩種疾病都有可能引起“豬高熱病綜合征”，現(xiàn)已成為危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的最重要疾病，是疫病防控的重點(diǎn)。當(dāng)前，針對(duì)這兩種疾病的防治主要是以疫苗免疫為主，但這兩種疾病免疫時(shí)間較接近，且藍(lán)耳病病毒的感染可引起機(jī)體的免疫抑制。為探索藍(lán)耳弱毒苗對(duì)豬瘟抗體水平的影響，對(duì)廣東某1 600頭基礎(chǔ)母豬規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行了為期一年的抗體水平監(jiān)測(cè)。了解其在免疫了藍(lán)耳弱毒株JXA1-R后對(duì)豬瘟抗體水平的影響。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

廣東某1 600頭基礎(chǔ)母豬群規(guī)模豬場(chǎng)，每次隨機(jī)抽取100份樣品檢測(cè)。

1.1.2 檢測(cè)試劑

豬瘟抗體檢測(cè)ELISA試劑盒、藍(lán)耳病抗體檢測(cè)ELISA試劑盒（均購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司）。

1.1.3 主要試驗(yàn)儀器

微量加樣器；Elx800型酶標(biāo)儀。

1.1.4 試驗(yàn)用疫苗

豬瘟弱毒疫苗（傳代細(xì)胞源）；高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗（JXA1-R株）

1.2 試驗(yàn)方法

藍(lán)耳與豬瘟疫苗采用普打的方式，3個(gè)月1次，1年4次。全場(chǎng)公、母豬1月份、4月份、7月份、10月份的第1周免疫豬瘟弱毒疫苗2頭份/頭，全場(chǎng)公、母豬2月份、5月份、8月份、11月份的第1周免疫藍(lán)耳弱毒疫苗JXA1-R株2頭份/頭。小豬2周齡免疫藍(lán)耳弱毒苗1頭份/頭，4周齡與9周齡分別免疫豬瘟疫苗1頭份/頭與2頭份/頭。本試驗(yàn)從2012年的11月份首次全場(chǎng)免疫了藍(lán)耳弱毒疫苗后，2013年的1月份、4月份、7月份、10月份的25日檢測(cè)藍(lán)耳與豬瘟抗體水平，對(duì)豬場(chǎng)內(nèi)的30頭公豬全部進(jìn)行采血檢測(cè)，經(jīng)產(chǎn)母豬隨機(jī)抽取100頭進(jìn)行檢測(cè)，7周齡與12周齡小豬隨機(jī)抽取50頭進(jìn)行檢測(cè)。2013年該豬場(chǎng)重胎母豬出現(xiàn)流產(chǎn)比例達(dá)到8%，產(chǎn)出的胎兒中死胎比例達(dá)到12%，保育豬消瘦，咳嗽，死亡率達(dá)到15%。

1.3 ELISA試驗(yàn)方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)

ELISA試驗(yàn)方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)，參照IDEXX公司試劑盒的說(shuō)明和標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。豬瘟抗體ELISA試驗(yàn)成立條件時(shí)：陰性對(duì)照的平均OD450值＞0.5，陽(yáng)性對(duì)照的阻斷率＞50%。判斷標(biāo)準(zhǔn)：阻斷率＜40%為陰性；40%≤阻斷率≤50%為可疑值；阻斷率＞50%為陽(yáng)性值。藍(lán)耳抗體檢測(cè)（IDEXX） ELISA 的S/P比例：S/P ＜ 0.4 陰性；0.4 ≤ S/P ≤ 2.5 弱毒疫苗感染，產(chǎn)生抗體；S/P＞2.5 野毒感染，產(chǎn)生抗體。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，將統(tǒng)計(jì)結(jié)果以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，并進(jìn)行方差分析和采用LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果

對(duì)試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄，并按設(shè)計(jì)做了相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析，得出以下幾方面分析結(jié)果，并制成了圖1～圖4。

2.1 藍(lán)耳病抗體水平檢測(cè)結(jié)果

圖1 藍(lán)耳抗體水平檢測(cè)圖

從圖1可以看出，0.4 ≤ S/P ≤ 2.5 為藍(lán)耳弱毒疫苗感染所產(chǎn)生的抗體；S/P＞2.5為藍(lán)耳野毒感染所產(chǎn)生的抗體。公豬藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率達(dá)到94%，野毒感染比例達(dá)到63%；經(jīng)產(chǎn)母豬藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率達(dá)到95%，野毒感染比例達(dá)到61%；7周齡與12周齡小豬藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率達(dá)到99%，野毒感染比例達(dá)到70%。

2.2 藍(lán)耳抗體離散度與抗體平均值

圖2 藍(lán)耳抗體離散度與抗體平均值圖示

由圖2可以看出，公豬藍(lán)耳抗體離散度為52%，抗體平均值為2.82；經(jīng)產(chǎn)母豬藍(lán)耳抗體離散度為47%，抗體平均值為2.85；7周齡與12周齡小豬藍(lán)耳抗體離散度為43%，抗體平均值為2.99。結(jié)果表明，所有豬均藍(lán)耳野毒感染明顯，藍(lán)耳弱毒苗對(duì)該豬場(chǎng)的藍(lán)耳病不能起到保護(hù)作用。

2.3 豬瘟抗體水平檢測(cè)結(jié)果

2.3豬瘟抗體水平檢測(cè)結(jié)果

圖3 豬瘟抗體水平檢測(cè)結(jié)果由圖3可以看出，豬瘟抗體阻斷率＞50%為陽(yáng)性值。公豬豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)到44%；經(jīng)產(chǎn)母豬豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)到52.7%；7周齡與12周齡小豬豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)到57.5%。

2.4 豬瘟抗體離散度與抗體平均值

圖4 豬瘟抗體離散度與抗體平均值圖示

由表4可以看出，公豬豬瘟抗體離散度為37%，抗體平均值為53.2%；經(jīng)產(chǎn)母豬豬瘟抗體離散度為37%，抗體平均值為51.8%；7周齡與12周齡小豬豬瘟抗體離散度為42.5%，抗體平均值為55.2%。結(jié)果表明，整個(gè)豬場(chǎng)的豬瘟抗體水平偏低，離散度不夠理想，對(duì)整個(gè)豬群的豬瘟保護(hù)率不高。

3 討論

豬藍(lán)耳病弱毒疫苗對(duì)豬瘟免疫抗體的影響通過(guò)對(duì)本試驗(yàn)的結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗（JX－A1-R株）免疫后藍(lán)耳野毒感染率高達(dá)64%，藍(lán)耳抗體S/P平均值均已超過(guò)2.5，表明該豬場(chǎng)藍(lán)耳病病毒非?；钴S，已經(jīng)感染了藍(lán)耳野毒，說(shuō)明該疫苗不能有效的控制藍(lán)耳病。豬瘟抗體陽(yáng)性率平均值僅為77%，且抗體離散度平均值僅達(dá)到39%，兩項(xiàng)指標(biāo)均較差，說(shuō)明豬瘟抗體不合格。因此，我們可以得知高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗（JXA1-R株）免疫對(duì)豬瘟細(xì)胞苗免疫產(chǎn)生明顯的干擾或抑制作用。這與張鳳華等[1]報(bào)道免疫豬藍(lán)耳病弱毒苗對(duì)豬瘟免疫效果產(chǎn)生明顯的干擾作用基本一致。這很有可能與藍(lán)耳病病毒的發(fā)病機(jī)理有很大關(guān)系，藍(lán)耳病病毒在復(fù)制時(shí)與肺泡巨噬細(xì)胞的受體結(jié)合，直接導(dǎo)致肺泡巨噬細(xì)胞的碎裂溶解，延緩了肺泡巨噬細(xì)胞對(duì)抗原處理和遞呈作用，從而導(dǎo)致宿主發(fā)生免疫調(diào)節(jié)紊亂[2]。同時(shí)藍(lán)耳病病毒作用于免疫系統(tǒng)的T淋巴細(xì)胞，造成T淋巴細(xì)胞各亞群的比例下降[3]，從而抑制了機(jī)體對(duì)其他病原體的免疫反應(yīng)。同時(shí)藍(lán)耳病病毒還具有“抗體依賴性增強(qiáng)作用”，又對(duì)豬瘟弱毒疫苗的免疫抗體產(chǎn)生有抑制作用，由此可見(jiàn)藍(lán)耳病弱毒疫苗免疫是一把雙刃劍，有利有弊。據(jù)杜喜忠等[4]報(bào)道，兩種疫苗免疫間隔時(shí)間7d，仍然有明顯干擾作用。因此，豬場(chǎng)應(yīng)結(jié)合自己的實(shí)際情況來(lái)決定是否免疫藍(lán)耳弱毒苗。在2013年的李曼世界養(yǎng)豬大會(huì)上，工程院院士楊漢春教授就明確指出我們應(yīng)少用藍(lán)耳弱毒苗，更加不能使用不同毒株的藍(lán)耳弱毒苗（藍(lán)耳病病毒極易發(fā)生變異重組），而應(yīng)采用凈化的方式來(lái)控制藍(lán)耳病。現(xiàn)在這一觀點(diǎn)已得到絕大多數(shù)專家、學(xué)者以及規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)管理者的認(rèn)可。

[1] 張鳳華，蔣國(guó)勝，徐凌松，等.藍(lán)耳病疫苗對(duì)豬群豬瘟抗體水平影響分析[J].河南畜牧獸醫(yī)：綜合版，2013，（3）：10-11.

[2] 蔡雪輝.PRRSV流行毒株NSP2遺傳變異分析及其活疫苗的安全性評(píng)價(jià)[D].吉林大學(xué)，2012.

[3] 李耀.PRRS弱毒苗效果的評(píng)價(jià)及奧得曼1號(hào)對(duì)其免疫的影響[D].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

[4] 杜喜忠，胡旭進(jìn)，樓芳芳，等.豬瘟和藍(lán)耳病母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律及疫苗免疫的干擾作用[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，（5）：1118-1120.

舒鑫標(biāo)（1966-），男，浙江金華人，高級(jí)獸醫(yī)師，主要從事臨床病理學(xué)與藥理學(xué)研究。

胡永明（1985-），男，浙江東陽(yáng)人，預(yù)防獸醫(yī)學(xué)碩士研究生，主要從事病毒學(xué)研究。