蘭 勇，雷 蕾，陳洪波

(湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院泌尿外科 445000)

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·論 著·

膀胱癌患者外周血中IL-17和IL-18的表達(dá)及臨床意義

蘭 勇，雷 蕾，陳洪波△

(湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院泌尿外科 445000)

目的 探討白細(xì)胞介素(IL)-17、IL-18在膀胱癌患者血清中的水平及臨床意義。方法 選擇82例膀胱癌患者作為研究對(duì)象。82例膀胱癌病理分級(jí)：G1 37例，G2～G3 45例；臨床分期：Tis～T1 35例；T2～T4 47例。選擇64例膀胱良性病變患者為疾病對(duì)照組。另選擇健康者56例為健康對(duì)照組。統(tǒng)計(jì)受試者血清IL-17、IL-18水平，并對(duì)血清IL-17、IL-18水平與年齡、病程、膀胱癌病理分級(jí)、臨床分期、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果 膀胱癌組血清IL-17、IL-18水平高于疾病對(duì)照組和健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；疾病對(duì)照組和健康對(duì)照組血清IL-17、IL-18水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。隨著膀胱癌病理分級(jí)的升高，血清IL-17、IL-18水平呈上升趨勢(shì)。隨著膀胱癌臨床分期的升高，血清IL-17、IL-18水平也呈上升趨勢(shì)。血清IL-17、IL-18水平與膀胱癌病理分級(jí)、臨床分期均呈正相關(guān)(P<0.05)；血清IL-17水平與血清IL-18水平呈正相關(guān)(r=0.328，P=0.022)。結(jié)論 IL-17、IL-18在膀胱癌患者血清中呈現(xiàn)高表達(dá)，IL-17、IL-18與膀胱癌發(fā)病、惡性程度及進(jìn)展密切相關(guān)。

膀胱癌； IL-17； IL-18； 相關(guān)性

膀胱癌為常見(jiàn)泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤，近年來(lái)其發(fā)病率、病死率均呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重危害患者健康，給患者家庭及社會(huì)帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)[1]。因此，盡早診治膀胱癌具有重要意義。白細(xì)胞介素家族(ILs)為重要的細(xì)胞因子，在炎癥、免疫調(diào)節(jié)方面均起重要作用，其中白細(xì)胞介素(IL)-17、IL-18為重要的促炎因子，在炎性反應(yīng)過(guò)程中起重要作用[2]。近期研究顯示，血清IL-17、IL-18與胃癌、乳腺癌等惡性腫瘤的發(fā)病相關(guān)[3-5]。本研究通過(guò)檢測(cè)膀胱癌患者血清中IL-17、IL-18水平，旨在探討IL-17、IL-18在膀胱癌患者中的表達(dá)情況及兩者在膀胱癌進(jìn)展中的可能作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月至2013年12月期間本院收治的82例膀胱癌患者設(shè)為膀胱癌組，患者年齡在35～65歲，中位年齡41歲。82例膀胱癌患者經(jīng)本院病理科病理確診為膀胱移行細(xì)胞癌，按世界衛(wèi)生組織(WHO)病理分級(jí)[1]，G1 37例，G2～G3 45例；按UICC-TNM臨床分期[1]，Tis～T1 35例，T2～T4 47例。選擇同期本院收治的64例膀胱良性病變患者為疾病對(duì)照組，其中膀胱乳頭狀瘤24例、膀胱息肉22例，膀胱腺瘤18例。另選擇同期在本院體檢的健康者56例為健康對(duì)照組，年齡37～63歲。各組在年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)等方面差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。本研究均獲受試者知情并簽署知情同意書(shū)。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)[1]納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡35～65歲；符合相關(guān)疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)；無(wú)嚴(yán)重心血管疾??；患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：近期急性感染者；腦血管意外者；肺結(jié)核者；有精神疾病史；自身免疫性疾病患者；糖尿病患者；其他系統(tǒng)惡性腫瘤患者；有酒精或藥物濫用史；未完成隨訪者。

表1 各組研究對(duì)象基本資料比較

注：-表示無(wú)數(shù)據(jù)。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集 于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取受試者外周靜脈血5 mL，3 500 r/min離心10 min，取上清液-80 ℃保存待測(cè)。

1.3.2 標(biāo)本檢測(cè) 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)所有受試者血清IL-17、IL-18水平，試劑盒購(gòu)于上海華大科技有限公司，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作[1]。

1.4 統(tǒng)計(jì)指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)受試者血清IL-17、IL-18水平，并對(duì)血清IL-17、IL-18水平與年齡、病程、膀胱癌病理分級(jí)、臨床分期、BMI進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 三組患者血清IL-17、IL-18水平比較 膀胱癌組血清IL-17、IL-18水平高于疾病對(duì)照組和健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；疾病對(duì)照組和健康對(duì)照組血清IL-17、IL-18水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 三組患者血清IL-17、IL-18水平

2.2 膀胱癌不同病理分級(jí)患者血清IL-17、IL-18水平比較 比較膀胱癌不同病理分級(jí)之間血清IL-17、IL-18水平，結(jié)果顯示，膀胱癌不同病理分級(jí)之間血清IL-17、IL-18水平存在明顯差異(P<0.01)。隨著膀胱癌病理分級(jí)的升高，血清IL-17、IL-18水平呈上升趨勢(shì)，且3組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見(jiàn)表3。

2.3 不同臨床分期膀胱癌患者血清IL-17、IL-18水平比較 比較不同臨床分期膀胱癌患者之間血清IL-17、IL-18水平，結(jié)果顯示，不同臨床分期膀胱癌之間血清IL-17、IL-18水平存在明顯差異(P<0.01)。隨著膀胱癌臨床分期的升高，血清IL-17、IL-18水平呈上升趨勢(shì)，且三組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見(jiàn)表4。

表3 膀胱癌不同病理分級(jí)血清IL-17、IL-18水平比較

表4 不同臨床分期膀胱癌患者血清IL-17、IL-18水平比較

2.4 血清IL-17、IL-18與年齡、病程、膀胱癌病理分級(jí)、臨床分期、BMI的相關(guān)性 對(duì)血清IL-17、IL-18與年齡、病程、膀胱癌病理分級(jí)、臨床分期、BMI等因素進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，血清IL-17、IL-18水平與膀胱癌病理分級(jí)、臨床分期均呈正相關(guān)(P<0.05)；且血清IL-17水平與血清IL-18水平呈正相關(guān)(r=0.328，P=0.022)，見(jiàn)表5。

表5 血清IL-17、IL-18與年齡、病程、膀胱癌病理分級(jí)、臨床分期、BMI的相關(guān)性

3 討 論

膀胱癌發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，可由多種因素誘發(fā)[6]。研究顯示，免疫反應(yīng)和炎性反應(yīng)與惡性腫瘤的發(fā)病及進(jìn)展密切相關(guān)，在惡性腫瘤的進(jìn)展過(guò)程中起重要作用[7-9]。ILs為重要的細(xì)胞因子，在炎癥發(fā)生及轉(zhuǎn)歸過(guò)程中起重要調(diào)節(jié)作用[10-12]。IL-17、IL-18為ILs成員，研究顯示，IL-17、IL-18在許多重癥疾病及惡性腫瘤發(fā)病及進(jìn)展中均發(fā)揮作用[10-12]。本研究重點(diǎn)探討了IL-17、IL-18在膀胱癌發(fā)病、進(jìn)展過(guò)程中可能起的作用。

IL-17為目前研究較多的細(xì)胞因子之一，在炎性反應(yīng)過(guò)程中扮演著重要角色。大量研究顯示，IL-17具有很強(qiáng)的生物學(xué)作用，在促進(jìn)炎癥的發(fā)生和進(jìn)展中起重要作用[10-12]。IL-17作為促進(jìn)炎癥進(jìn)展的重要細(xì)胞因子，與哮喘、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等常見(jiàn)疾病的發(fā)病密切相關(guān)，在上述疾病的進(jìn)展過(guò)程中起重要作用。而新近研究也顯示，IL-17與胃癌、食管癌、乳腺癌等惡性腫瘤的發(fā)病及進(jìn)展亦密切相關(guān)[10-12]。IL-18為近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，具有免疫調(diào)節(jié)功能，可參與機(jī)體免疫反應(yīng)[5]。Zhang等[1]研究發(fā)現(xiàn)，與健康人群比較，IL-18在腫瘤患者外周血中可高表達(dá)。Reid等[11]的大規(guī)模臨床研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤患者血清IL-17水平明顯高于健康人群。本研究檢測(cè)膀胱癌患者血清IL-17、IL-18水平，結(jié)果顯示，膀胱癌患者血清IL-17、IL-18檢測(cè)水平明顯高于健康人群和膀胱良性病變者，與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。另一方面，本研究亦發(fā)現(xiàn)，膀胱良性病變者外周血中IL-17、IL-18表達(dá)并未明顯增強(qiáng)。表明IL-17、IL-18與膀胱癌的發(fā)生和進(jìn)展密切相關(guān)，通過(guò)檢測(cè)血清IL-17、IL-18水平可以區(qū)分膀胱良惡性腫瘤。IL-17、IL-18水平升高后，可以引起膀胱中相關(guān)組織及細(xì)胞的損傷，損傷的組織及細(xì)胞可以產(chǎn)生大量的氧自由基，使局部組織出現(xiàn)明顯變性及壞死。

Zhang等[5]研究發(fā)現(xiàn)，伴隨著膀胱癌臨床分期的變化，機(jī)體內(nèi)生物學(xué)標(biāo)志物的表達(dá)狀況存在明顯差異。本研究對(duì)不同臨床分期膀胱癌患者血清IL-17、IL-18水平進(jìn)行檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)，血清IL-17、IL-18水平隨著膀胱癌臨床分期的增加而升高，即低分化、浸潤(rùn)性膀胱癌血清IL-17、IL-18水平明顯高于高分化、表淺性膀胱癌，究其原因，推測(cè)與臨床分期的不同膀胱癌患者腫瘤惡性程度存在明顯差異有關(guān)。膀胱癌T2～T4期表明腫瘤惡性程度高、浸潤(rùn)性強(qiáng)，機(jī)體結(jié)局較差，與Tis～T1期等惡性程度較低的膀胱癌相比，其惡性程度更高、浸潤(rùn)性更強(qiáng)，機(jī)體病情亦明顯更重，預(yù)后更差[11]。提示血清IL-17、IL-18水平與膀胱癌惡性程度、浸潤(rùn)性同樣關(guān)系密切，血清IL-17、IL-18的表達(dá)情況可以作為監(jiān)測(cè)膀胱移行細(xì)胞癌惡性程度、浸潤(rùn)性的重要指標(biāo)。

Reid等[11]報(bào)道不同病理分級(jí)膀胱癌患者中IL水平呈現(xiàn)明顯差異。本研究檢測(cè)不同病理分級(jí)膀胱癌患者血清IL-17、IL-18水平時(shí)，作者亦發(fā)現(xiàn)不同病理分級(jí)膀胱癌患者血清IL-17、IL-18水平之間同樣存在明顯差異，隨著膀胱癌病理分級(jí)的增加，血清IL-17、IL-18水平呈明顯上升趨勢(shì)，血清IL-17、IL-18水平與膀胱癌病理分級(jí)呈正比。提示IL-17、IL-18與膀胱癌的病理分級(jí)密切相關(guān)，IL-17、IL-18在膀胱癌進(jìn)展中可能起促進(jìn)作用，可促使膀胱癌病情惡化。IL-17、IL-18促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的可能機(jī)制：(1)抑制自然殺傷細(xì)胞的增殖和活化，并降低其活性；(2)抑制機(jī)體淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子；(3)抑制T淋巴細(xì)胞增殖；(4)抑制殺傷性T淋巴細(xì)胞增殖并降低其活化能力[11]。

對(duì)血清IL-17、IL-18與年齡、病程、膀胱癌病理分級(jí)、臨床分期、BMI等因素進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，血清IL-17、IL-18水平與膀胱癌病理分級(jí)、臨床分期均呈正相關(guān)(P<0.05)；血清IL-17水平與血清IL-18水平呈正相關(guān)(P=0.022)。由此可見(jiàn)，血清IL-17、IL-18與膀胱癌發(fā)病密切相關(guān)，隨著膀胱癌病情的進(jìn)展，血清IL-17、IL-18水平呈上升趨勢(shì)。表明IL-17、IL-18在膀胱癌發(fā)病及進(jìn)展中起重要作用，IL-17、IL-18為膀胱癌發(fā)病及進(jìn)展的危險(xiǎn)因素。因此建議對(duì)膀胱癌高危人群或膀胱癌患者宜定期檢測(cè)IL-17、IL-18水平，以監(jiān)測(cè)膀胱癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)及進(jìn)展。

有關(guān)IL-17、IL-18表達(dá)與膀胱癌發(fā)病及惡性程度、病情進(jìn)展的研究較少，因此本研究具有一定的創(chuàng)新性。IL-17、IL-18在膀胱癌患者血清中呈現(xiàn)高表達(dá)，IL-17、IL-18與膀胱癌發(fā)病、惡性程度及進(jìn)展密切相關(guān)。

[1]Zhang G,Chen F,Cao Y,et al.HMGB1 release by urothelial carcinoma cells in response to Bacillus Calmette-Guérin functions as a paracrine factor to potentiate the direct cellular effects of Bacillus Calmette-Guérin[J].J Urol,2013，190(3):1076-1082.

[2]鄧建華,李漢忠,張玉石,等.非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)研究現(xiàn)狀[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2014,94(22):1758-1759.

[3]Donnelly ED,Rakhra S,Helenowski I,et al.Dosimetry and toxicity outcomes in postoperative high-dose-rate intracavitary brachytherapy for endometrial carcinoma[J].J Contemp Brachytherapy,2012,4(3):135-140.

[4]廖洪,肖英明,楊盛柯，等.黏蛋白7檢測(cè)在膀胱癌診斷中的價(jià)值[J].中華泌尿外科雜志,2014,35(4):274-277.

[5]Willson TD,Revesz E,Podbielski FJ,et al.Unusual findings in a benign urachal tumor[J].Am Surg，2013，79(2):76-77.

[6]陳占國(guó),周武,戴美潔，等.IL-10基因啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性和吸煙交互作用與膀胱癌的關(guān)聯(lián)研究[J].中華流行病學(xué)雜志,2013,34(2):183-186.

[7]張家模,吳小候,張翾,等.白細(xì)胞介素2 錨定的exosomes的制備及其對(duì)膀胱癌細(xì)胞的誘導(dǎo)殺傷效應(yīng)[J].中華腫瘤雜志,2011,33(8):564-569.

[8]Freifeld Y,Dekel Y,Stein A.Adjuvant methods to improve results of local bladder irrigations by chemotherapy for NMIBC[J].Curr Urol Rep,2013,14(2):71-77.

[9]陸福鼎,許可慰,畢良寬，等.C型凝集素樣受體1在卡介苗灌注治療膀胱癌中的作用及機(jī)制[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,2014,31(5):1069-1071.

[10]呂磊,章傳華,袁敬東，等.泛素特異肽酶22基因通過(guò)Myc調(diào)控人膀胱癌EJ細(xì)胞增殖的機(jī)制研究[J].中華泌尿外科雜志,2014,35(2):129-133.

[11]Reid CN,Stevenson M,Abogunrin F,et al.Standardization of diagnostic biomarker concentrations in urine:the hematuria caveat[J].PLoS One，2012，7(12):53354.

[12]Lee SJ,Cho SC,Lee EJ,et al.Interleukin-20 promotes migration of bladder cancer cells through extracellular signal-regulated kinase (ERK)-mediated MMP-9 protein expression leading to nuclear factor (NF-κB) activation by inducing the up-regulation of p21(WAF1) protein expression[J].J Biol Chem，2013，288(8):5539-5552.

Expression of IL-17 and IL-18 in patients with bladder cancer and its clinical significance

LANYong,LEILei,CHENHong-bo△

(DepartmentofUrologySurgery,CentralHospital,Tujia-MiaoAutonomousPrefectureofEnshi,Hubei445000,China)

Objective To explore the serum IL-17,IL-18 levels and the clinical significance in patients with bladder cancer.Methods 82 patients with bladder cancer were selected as bladder cancer group,who were divided into G1 (n=37) and G2-G3 (n=45) according to bladder cancer pathology classification,and were divided into Tis - T1 (n=35) and T2-T4(n=47) according to clinical stages. 64 cases patients with urinary bladder benign lesions were selected as disease control group. 56 cases of healthy people were selected as normal control group. The levels of serum IL-17 and IL-18 of all the subjects were counted,and the correlation between IL-17 and IL-18 serum levels with age,course of the disease,bladder cancer pathology classification,clinical stage and BMI were analyzed.Results The serum levels of IL-17 and IL-18 in bladder cancer group were significantly higher than those in disease control group and normal control group (P<0.01). There was no significant difference of serum levels of IL-17 and IL-18 between disease control group and normal control group (P>0.05). As the pathology classification and the clinical stage of bladder cancer rose,the serum levels of IL-17 and IL-18 increased. The serum levels of IL-17 and IL-18 were positively correlated with the pathology classification and the clinical stage of bladder cancer (P<0.05). The serum IL-17 level was also positively correlated with IL-18 level (r=0.328,P=0.022).Conclusion IL-17 and IL-18 show high expression in bladder cancer patients,and they closely relate to the incidence,malignancy degree and development of bladder cancer.

bladder cancer; IL-17; IL-18; correlation

蘭勇，男，主治醫(yī)師，本科，主要從事泌尿系結(jié)石和泌尿系腫瘤研究?！?/p>

，E-mail：chb0103@163.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.07.028

A

1672-9455(2015)07-0945-03

2014-10-15

2014-11-26)