胡先華，張滋勇，郭 斌，張金花△(.川北醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，四川南充 67000；.四川省樂山市市中區(qū)婦幼保健院 64000；.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川南充 67000)

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·臨床探討·

SysmexXN-2000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀在漿膜腔積液計(jì)數(shù)中的研究

胡先華1，張滋勇2，郭 斌3，張金花3△
(1.川北醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，四川南充 637000；2.四川省樂山市市中區(qū)婦幼保健院 614000；3.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川南充 637000)

目的 評(píng)價(jià)SysmexXN-2000血細(xì)胞分析儀在漿膜腔積液計(jì)數(shù)中的應(yīng)用。方法 收集76例漿膜腔積液標(biāo)本，分別用SysmexXE-5000和SysmexXN-2000對(duì)其進(jìn)行有核細(xì)胞計(jì)數(shù)，以SysmexXE-5000血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)結(jié)果為依據(jù)將其分為小于或等于99個(gè)/μL(A組)，100～499個(gè)/μL(B組)，500～999個(gè)/μL(C組)，≥1 000個(gè)/μL(D組)4個(gè)組，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果SysmexXE-5000與SysmexXN-2000有核細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)結(jié)果相關(guān)性好，檢測(cè)結(jié)果差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論SysmexXN-2000適用于臨床漿膜腔積液標(biāo)本的細(xì)胞計(jì)數(shù)。

血液分析儀; 體液檢測(cè)； 細(xì)胞計(jì)數(shù)； 自動(dòng)化

漿膜腔積液如胸腔積液、腹水白細(xì)胞計(jì)數(shù)是臨床常見的檢測(cè)項(xiàng)目，其結(jié)果對(duì)病情診斷、評(píng)估和預(yù)后等具有重要的臨床意義，傳統(tǒng)手工法存在耗時(shí)多、重復(fù)性差、結(jié)果受檢測(cè)者能力的影響等不足，自動(dòng)化分析儀由于其自動(dòng)化程度高，能有效代替手工作業(yè)，故用于體液的檢測(cè)越來越多見。一些資料表明，儀器法計(jì)數(shù)與手工法具有良好的相關(guān)性，且簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確性高[1-2]。近年關(guān)于Sysmex XE-5000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(以下簡(jiǎn)稱Sysmex XE-5000)在檢測(cè)胸腔積液、腹水應(yīng)用方面的報(bào)道較為多見[3-6]，且與手工法的相關(guān)性較高，文獻(xiàn)顯示Sysmex XE-5000適用于臨床漿膜腔積液標(biāo)本的細(xì)胞計(jì)數(shù)。較多文獻(xiàn)多以手工法和儀器法作對(duì)比判斷儀器是否適用于臨床檢測(cè)，本文擬以Sysmex XE-5000為標(biāo)準(zhǔn)，通過對(duì)同一標(biāo)本的測(cè)定分析Sysmex XN-2000在漿膜腔積液有核細(xì)胞計(jì)數(shù)中的應(yīng)用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院患者自2014年8～12月的漿膜腔積液標(biāo)本共76例，其中胸腔積液42例，腹水34例；男51例，女25例；年齡18～84歲，平均(54±17)歲。均由臨床醫(yī)師規(guī)范采集，乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管收集送檢，常規(guī)計(jì)數(shù)1 h之內(nèi)計(jì)數(shù)完畢。

1.2 主要儀器與試劑 Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀原裝配套試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品，Sysmex XN-2000全自動(dòng)血液分析儀原裝配套試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品，日本Olympus光學(xué)顯微鏡及改良牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板。

1.3 方法

1.3.1 Sysmex XE-5000分析儀檢測(cè) 取標(biāo)本混勻后，嚴(yán)格按照Sysmex XE-5000標(biāo)準(zhǔn)操作手冊(cè)進(jìn)行，在體液手動(dòng)模式下進(jìn)行檢測(cè)，儀器質(zhì)控各項(xiàng)參數(shù)均在其允許范圍內(nèi)。

1.3.2 Sysmex XN-2000分析儀檢測(cè) 取標(biāo)本混勻后，嚴(yán)格按照Sysmex XN-2000標(biāo)準(zhǔn)操作手冊(cè)進(jìn)行，在體液手動(dòng)模式下進(jìn)行檢測(cè)，儀器質(zhì)控各項(xiàng)參數(shù)均在其允許范圍內(nèi)。

1.3.3 手工法 手工法嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》要求進(jìn)行。采用改良牛鮑氏細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)用3%冰醋酸酸化后的漿膜腔積液，計(jì)數(shù)10個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，同時(shí)進(jìn)行瑞氏染色對(duì)有核細(xì)胞進(jìn)行分類，計(jì)數(shù)兩次取均值。

1.3.4 分組 以Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀有核細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果為依據(jù)將其分為小于或等于99個(gè)/μL(A組)，100～499個(gè)/μL(B組)，500～999個(gè)/μL(C組)，≥1 000個(gè)/μL(D組)4個(gè)組，觀察Sysmex XN-2000有核細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。

2 結(jié) 果

2.1SysmexXE-5000與SysmexXN-2000有核細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果比較A組12例，B組17例，C組16例，D組31例。SysmexXE-5000與SysmexXN-2000有核細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果相關(guān)性較好，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 Sysmex XE-5000與Sysmex XN-2000有核細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果比較±s，個(gè)/μL)

2.2 Sysmex XE-5000與Sysmex XN-2000分類計(jì)數(shù)結(jié)果比較 對(duì)分類結(jié)果采用線性回歸分析，結(jié)果如圖1所示，P值分別為0.143和0.103，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。。

圖1 Sysmex XE-5000與Sysmex XN-2000分類計(jì)數(shù)結(jié)果比較

3 討 論

漿膜腔積液如胸腔積液、腹水白細(xì)胞計(jì)數(shù)是臨床常見的檢測(cè)項(xiàng)目[7]，其結(jié)果對(duì)于臨床醫(yī)師鑒別漏出液和滲出液具有重要意義，若以多核細(xì)胞為主，提示化膿性炎癥或早期結(jié)核性積液，若以單核細(xì)胞為主，提示慢性感染，可見于病毒感染、多發(fā)性漿膜炎等[8]。

Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀是少數(shù)具有專門檢測(cè)體液模式的自動(dòng)化分析儀，其體液模式包括了流式細(xì)胞術(shù)及核酸熒光染色方法的檢測(cè)原理，根據(jù)細(xì)胞內(nèi)核酸水平進(jìn)行熒光定量，側(cè)向熒光反映細(xì)胞核酸水平，側(cè)向散射光測(cè)定細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度，具有相對(duì)精確而靈敏的計(jì)數(shù)和鑒別功能，能夠?qū)δX脊液、漿膜腔積液進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類[9]。該模式只需200 μL的標(biāo)本即可檢出結(jié)果，其檢測(cè)白細(xì)胞的線性范圍是(0～10 000)×103/μL，因此能準(zhǔn)確檢測(cè)白細(xì)胞很少的漿膜腔積液。Sysmex XN-2000是利用液壓聚集法(DC檢測(cè))、流式細(xì)胞術(shù)等手段，對(duì)體液中的有形成分進(jìn)行分析，液壓聚集單元改進(jìn)了細(xì)胞計(jì)數(shù)的精確度和重現(xiàn)性，同時(shí)，由于血細(xì)胞顆粒是排成一行通過貫流分析池的中心，故而防止產(chǎn)生異常血液脈沖并可減少對(duì)貫流分析池的污染，流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法使用半導(dǎo)體激光器，檢測(cè)前向散射光、側(cè)向散射光以及側(cè)向熒光，通過測(cè)量熒光強(qiáng)度，可以得到有關(guān)血細(xì)胞染色程度的信息，熒光向所有方向散射，Sysmex XN-2000檢測(cè)側(cè)向發(fā)出的熒光，只需很少的標(biāo)本即可對(duì)細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。

由結(jié)果可知，Sysmex XE-5000與Sysmex XN-2000白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較，A組、C組、D組三組相關(guān)系數(shù)(r)分別為0.796、0.915、0.998，說明使用儀器進(jìn)行漿膜腔積液有核細(xì)胞計(jì)數(shù)的相關(guān)性較好，P值均大于0.05。B組(100～499個(gè)/μL)結(jié)果與其余三組差異較大，但r=0.896，P=0.094>0.05。Sysmex XN-2000有核細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果與Sysmex XE-5000的比較中差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Sysmex XN-2000在體液模式進(jìn)行檢測(cè)漿膜腔積液時(shí)數(shù)據(jù)可以信任。

Sysmex XE-5000與Sysmex XN-2000有核細(xì)胞分類結(jié)果比較，單個(gè)核細(xì)胞和多個(gè)核細(xì)胞的r2分別為0.911和0.913，相關(guān)性較好，2臺(tái)儀器檢測(cè)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.143和0.103)。值得提出的一點(diǎn)是在此次76例標(biāo)本中，有血性標(biāo)本4例，分布在100～499個(gè)/μL中，手工復(fù)檢發(fā)現(xiàn)較多紅細(xì)胞及碎片，考慮在分類過程中紅細(xì)胞碎片或間質(zhì)細(xì)胞聚集導(dǎo)致儀器辨認(rèn)為有核細(xì)胞的可能性，但是由于樣本量太少，其結(jié)果有待探討，建議當(dāng)血性標(biāo)本用手工法復(fù)檢最佳。

有研究報(bào)道Sysmex XE-5000在漿膜腔積液有核細(xì)胞計(jì)數(shù)方面表現(xiàn)優(yōu)異，本文通過Sysmex XE-5000與Sysmex XN-2000檢測(cè)76例漿膜腔積液標(biāo)本的對(duì)比分析，得出2儀器間有核細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的結(jié)論，表明Sysmex XN-2000血細(xì)胞分析儀進(jìn)行漿膜腔積液的臨床檢測(cè)有實(shí)用價(jià)值。

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.22.052

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1672-9455(2015)22-3420-02

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2015-07-01)

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