蔡 穎，曹永躍，馬 亮，沈 軍，龍 紅，曹永彤（中日友好醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100029）

222例臨床全血細(xì)胞減少患者的回顧性分析＊

蔡 穎，曹永躍，馬 亮，沈 軍，龍 紅，曹永彤△
（中日友好醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100029）

目的探討外周血白細(xì)胞、血紅蛋白及血小板三系同時(shí)減少患者的外周血和骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，并分析其常見(jiàn)疾病類型。方法對(duì)222例2005年6月至2011年2月于該院就診的全血細(xì)胞減少患者的骨髓涂片及外周血涂片進(jìn)行瑞氏染色，結(jié)合骨髓組織化學(xué)染色及患者其他相關(guān)臨床資料進(jìn)行疾病類型分析。結(jié)果222例全血細(xì)胞減少患者中，造血系統(tǒng)疾病占84.65%（188/222），非造血系統(tǒng)疾病占15.35%（34/222），兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。150例進(jìn)行外周血涂片的患者中58%的患者外周血涂片結(jié)果具有診斷價(jià)值。結(jié)論引起全血細(xì)胞減少的疾病中，常見(jiàn)的為造血系統(tǒng)疾病，但也不能忽視非造血系統(tǒng)疾病。外周血涂片對(duì)這類疾病的診斷具有較高價(jià)值。

全血細(xì)胞減少； 外周血細(xì)胞； 骨髓細(xì)胞； 形態(tài)學(xué)

全血細(xì)胞減少是指外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞［包括血紅蛋白（Hb）］及血小板均低于正常參考范圍。引起全血細(xì)胞減少的疾病類型很多，外周血細(xì)胞形態(tài)檢查和骨髓細(xì)胞學(xué)檢查有助于臨床診斷?，F(xiàn)對(duì)本院血液科2005年6月至2011年2月收治的222例全血細(xì)胞減少患者的外周血細(xì)胞形態(tài)、骨髓細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)以及發(fā)病原因進(jìn)行分析。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2005年6月至2011年2月于本院初診的全血細(xì)胞減少的疑為血液系統(tǒng)疾病患者222例，其中男117例、女105例；年齡11～98歲，平均55歲。納入患者均符合以下診斷標(biāo)準(zhǔn)：血液常規(guī)檢查至少2次，白細(xì)胞（WBC）＜4.0× 109/L，血小板（PLT）＜100×109/L，男性Hb＜120g/L，女性Hb＜110g/L，6～14歲兒童Hb＜120g/L［1］。222例患者均行骨髓穿刺，行骨髓細(xì)胞學(xué)檢查，必要時(shí)結(jié)合髓過(guò)氧化物酶染色（POX）、糖原染色（PAS）、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）、鐵染色（FE）等細(xì)胞化學(xué)染色方法。診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2008年發(fā)布的WHO造血與淋巴組織腫瘤分型標(biāo)準(zhǔn)。其中有150例在骨髓穿刺之前進(jìn)行了外周血涂片檢查。

1.2 方法

1.2.1 全血細(xì)胞分析 日本Sysmex公司XT－4000i自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套質(zhì)控品，對(duì)EDTA－K2抗凝血進(jìn)行全血細(xì)胞分析。

1.2.2 外周血細(xì)胞形態(tài)染色及顯微鏡分析 末梢血或EDTA－K2－抗凝血涂片，晾干后，瑞氏染色30min，水沖洗、晾干待檢。顯微鏡（100×）分類計(jì)數(shù)100～200個(gè)白細(xì)胞，從數(shù)量、比例及形態(tài)學(xué)改變上對(duì)白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板進(jìn)行分析。

1.2.3 骨髓細(xì)胞形態(tài)染色及顯微鏡分析 患者臥位行骨髓穿刺，取骨髓穿刺液涂片，晾干后瑞氏染色1h，水沖晾干待檢。顯微鏡分類計(jì)數(shù)200～500個(gè)有核細(xì)胞（100×），計(jì)數(shù)巨核細(xì)胞（10×），觀察骨髓增生程度，造血島充盈狀態(tài)，各階段、各系幼稚細(xì)胞的比例、形態(tài)學(xué)改變、異常細(xì)胞和異常比例的細(xì)胞，結(jié)合組織化學(xué)染色、臨床體征及臨床資料等進(jìn)行分析給出診斷意見(jiàn)，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2008年發(fā)布的WHO造血與淋巴組織腫瘤分型標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.4 組織化學(xué)染色分析 POX采用四甲基聯(lián)苯胺法，陽(yáng)性判斷：在細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)黑色顆粒即為陽(yáng)性。PAS采用貝索生物技術(shù)有限公司PAS試劑盒進(jìn)行染色，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)彌散狀、顆粒狀或塊狀紅色即為陽(yáng)性。FE采用酸性亞鐵氰化鉀將骨髓小粒及幼紅細(xì)胞內(nèi)的鐵顆粒著色。NAP采用偶氮偶聯(lián)法，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)紫黑色或棕紅色顆粒為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 全血細(xì)胞減少患者的疾病類型分布 222例全血細(xì)胞減少患者中造血系統(tǒng)疾病占84.68%（188/222），其中再生障礙性貧血（AA）占26.6%（59/222），骨髓增生異常綜合征（MDS）占32.4%（72/222），急性白血?。ˋL）占9.9%（22/222），巨幼細(xì)胞性貧血（MA）占11.3%（25/222），多發(fā)性骨髓瘤（MM）占1.8%（4/222），特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）占1.3%（3/222），骨髓纖維化（MF）占0.9%（2/222），其他疾病共占1.35%，包括1例噬血細(xì)胞綜合征（HPS）和2例轉(zhuǎn)移癌（2/222）。非造血系統(tǒng)疾病占15.35%（34/222），其中脾功能亢進(jìn)1.35%（3/222），繼發(fā)性貧血（包括肝性貧血、腎性貧血等）占3.6%（8/222），其他占9.4%（21/222）。血液系統(tǒng)疾病所占比例高于非血液系統(tǒng)疾病。見(jiàn)表1。

2.2 外周血涂片檢查對(duì)血液系統(tǒng)疾病的提示 陽(yáng)性表現(xiàn)分為兩種，一種是幼稚細(xì)胞（包括原始細(xì)胞、各階段幼稚粒細(xì)胞、幼稚單核細(xì)胞、幼稚淋巴細(xì)胞、有核紅細(xì)胞）的出現(xiàn)及數(shù)量和比例上的改變，一種是形態(tài)學(xué)上的異常表現(xiàn)（包括粒系的核分化不良、脫顆粒、多分葉、中毒顆粒、空泡變性等；血小板出現(xiàn)的巨大血小板、異形血小板、血小板顆粒減少等）。222例患者中有150例在行骨髓穿刺前血常規(guī)檢測(cè)的同時(shí)檢測(cè)了外周血涂片，其中58%的患者外周血涂片結(jié)果有陽(yáng)性意義，見(jiàn)表2。血液系統(tǒng)和非血液系統(tǒng)疾病外周血涂片檢測(cè)陽(yáng)性改變的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。外周血涂片檢測(cè)中，MDS和AL的陽(yáng)性率最高，兩者比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）

2.3 貧血程度與疾病的關(guān)系 分析4種貧血程度患者的疾病類型，Hb≤30g/L為極重度貧血，疾病類型包括AL和MDS；Hb：＞30～60g/L為重度貧血，疾病類型以AL、AA和MDS為主，也包括MA和繼發(fā)性貧血；Hb：＞60～90g/L為中度貧血，疾病類型包括AL、MDS、AA以及MA、繼發(fā)性貧血等；Hb＞90g/L至正常參考值下限之間為輕度貧血，見(jiàn)表4。

3 討 論

全血細(xì)胞減少不是一種獨(dú)立的疾病，而是一組不同疾病在某一側(cè)面的共同表現(xiàn)。全血細(xì)胞減少癥可由多種疾病引起。引起全血細(xì)胞減少的原因主要為造血系統(tǒng)疾病，臨床最常見(jiàn)的疾病為AA、MDS、AL等［2］。金建剛等［3］利用Bayes判別分析得出了全血細(xì)胞減少患者中MDS更為常見(jiàn)的結(jié)論，本文與此報(bào)道一致。目前，細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查是血液病診斷的主要手段之一。尤其在骨髓取材困難、骨髓干抽的情況下，形態(tài)學(xué)檢查的骨髓穿刺液用量少、易固定、細(xì)胞破壞少的優(yōu)勢(shì)十分明顯，再結(jié)合其他相關(guān)檢查、患者的臨床資料、全血細(xì)胞減少的原因，可以得出較為準(zhǔn)確的診斷。

引起全血細(xì)胞減少的常見(jiàn)原因的有：（1）造血原料不足，多見(jiàn)于非造血系統(tǒng)疾病，如MA；（2）異?？寺≡錾种屏斯撬枵Ｔ煅δ?，多見(jiàn)于惡性血液系統(tǒng)疾病，如AL、MM、MF等；（3）骨髓造血功能衰竭，多見(jiàn)于AA；（4）骨髓無(wú)效造血，多見(jiàn)于MDS；（5）血細(xì)胞破壞過(guò)多，多見(jiàn)于脾功能亢進(jìn)及免疫因素導(dǎo)致的血細(xì)胞減少，如自身免疫性溶血性貧血等［4］。貧血的程度對(duì)血液系統(tǒng)疾病有一定的提示作用［5－7］。本組中，Hb≤30g/L的均為血液系統(tǒng)疾病，AA患者Hb大多小于90g/L，非造血系統(tǒng)疾病貧血程度相對(duì)較輕，MDS和AL則可能發(fā)生任何程度的貧血。

外周血涂片檢查方便快捷，標(biāo)本易取得、易制備，能提供大量血常規(guī)所不能提供的信息，對(duì)血液系統(tǒng)疾病的發(fā)現(xiàn)及診斷有非常大的提示價(jià)值。骨髓病態(tài)造血在外周血涂片通常也有所體現(xiàn)，包括異常幼稚細(xì)胞的出現(xiàn)以及細(xì)胞形態(tài)學(xué)上的改變。本研究中，AL在外周血涂片中均發(fā)現(xiàn)有幼稚細(xì)胞；AA患者外周血淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞比例上升；MDS患者約89%出現(xiàn)了幼稚粒細(xì)胞或有核紅細(xì)胞以及細(xì)胞形態(tài)學(xué)上的改變；MF患者可出現(xiàn)幼稚粒細(xì)胞及淚滴紅細(xì)胞等等，這些改變對(duì)于全血細(xì)胞減少患者血液系統(tǒng)疾病的診斷非常有價(jià)值。

［1］ 張之南.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)［M］.北京.北京科學(xué)出版社，2008：1－4.

［2］ 王莉，董家薔，高海燕，等.骨髓檢查在全血細(xì)胞減少中的診斷價(jià)值［J］.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，45（1）：83－85.

［3］金建剛，陳虎，劉麗輝，等.Bayes判別分析全血細(xì)胞減少的分類診斷［J］.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2009，13（6）：1139－1142.

［4］劉彤華.194例全血細(xì)胞減少癥的病因診斷與鑒別診斷［J］.吉林醫(yī)學(xué)，2012，33（1）：154－155.

［5］劉麗，胡小平.全血細(xì)胞減少癥168例骨髓象及病因分析［J］.中國(guó)誤診學(xué)雜志，2011，11（34）：8472－8472.

［6］王蓮榮.全血細(xì)胞減少96例骨髓象分析［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10（15）：503－504.

［7］秦楓，楊澤松.骨髓細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)92例全血細(xì)胞減少性疾病的診斷價(jià)值［J］.重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，35（2）：283－285.

Retrospective analysis on 222 patients with pancytopenia＊

Cai Ying，Cao Yongyue，Ma Liang，Shen Jun，Long Hong，Cao Yongtong△
（Department of Clinical Laboratory，China－Japan Friendship Hospital，Ministry of Health，Beijing100029，China）

ObjectiveTo investigate the patients′cell morphology characteristics in peripheral blood and bone marrow with the reduce of leukocyte，hemoglobin and platelet in peripheral blood，and analyze the common cause.MethodsFrom June 2005to February 2011，222patients with pancytopenia treated in the hospital were enrolled in the study，whose peripheral blood and bone marrow smears were stained by Wright，combined with histochemical staining and the clinical data of patients，the disease types were analyzed.ResultsIn the 222patients with pancytopenia，patients with hematopoietic system disease accounted for 84.65%（188/222），non－h(huán)ematopoietic system disease accounted for 15.35%（34/222），the difference was statistically significant（P＜0.05）.In 150patients whose peripheral blood smears were obseved，58%patients obtained positive results.ConclusionThe diseases of hematopoietic system are the common cause of pancytopenia，but can not ignore the non－h(huán)ematopoietic system diseases.Peripheral blood smear has a high value in the diagnosis of these diseases.

pancytopenia； peripheral blood cell； bone marrow cell； morphology；

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.014

A

1673－4130（2015）03－0319－03

2014－11－10）

國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2012BAH24F05）。 作者簡(jiǎn)介：蔡穎，女，主管檢驗(yàn)技師，主要從事臨床血液學(xué)與檢驗(yàn)的研究。